脈沖電場抑制荷黑素瘤小鼠腫瘤生長同時(shí)造成心肌損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、脈沖電場（pulsed electric fileds, PEFs），是一種融合多學(xué)科的新型腫瘤治療方法，具有獨(dú)特的生物電效應(yīng)，目前被廣泛用于腫瘤治療領(lǐng)域的研究。其中高強(qiáng)度脈沖電場（KV/cm場強(qiáng),μs~ns數(shù)量級脈寬的脈沖電場）備受研究者們青睞，它以不可逆性電穿孔（ irreversible electroporation, IRB）效應(yīng)，選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，可實(shí)現(xiàn)腫瘤組織靶向消融治療。然而機(jī)體存在電壓耐受現(xiàn)象，高強(qiáng)度脈沖電場（h

2、igh-intensity pulsed electric field，HPEF）對具有自主心電活動(dòng)的電場敏感組織的安全性問題，成為其臨床應(yīng)用的瓶頸。相對高壓脈沖電場，低壓脈沖電場（low-voltage electric current pulse，LVECP）可作為一種新的選擇。本課題組前期實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)：不同刺激參數(shù)組合對心肌組織有不同程度影響。因此，本實(shí)驗(yàn)主要從以下兩方面進(jìn)行研究：1、脈沖電場對荷黑素瘤小鼠腫瘤的抑制效應(yīng)；2、脈沖

3、電場對荷黑素瘤小鼠心肌損傷的影響。
　　第一部分：脈沖電場對荷黑素瘤小鼠腫瘤的抑制效應(yīng)
　　目的：觀察脈沖電場對荷黑素瘤小鼠腫瘤生長的抑制效應(yīng)。
　　方法：將B16F10黑素瘤細(xì)胞接種于BALB/c小鼠背部皮下組織，成功構(gòu)建荷黑素瘤小鼠模型，隨機(jī)分為4組：對照組（n=10）和治療組（n=30）。治療組分別采用1ms、3ms、5ms脈沖寬度，100V/cm場強(qiáng)、10Hz頻率的脈沖電場，10min/d連續(xù)刺激15d。用游標(biāo)

4、卡尺測定腫瘤體積大小，HE染色光鏡下觀察腫瘤組織病理學(xué)改變，采用 qRT-PCR測定腫瘤組織中PCNA mRNA的表達(dá)水平，免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)檢測腫瘤組織PCNA蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：電刺激第15天后，各治療組腫瘤體積分別為（238.4±307.2mm3）、（81.9±63.4 mm3）、（63.9±83.9 mm3），均較對照組（506.2±341.7mm3）減?。≒＜0.05）；與對照組比較，光鏡觀察發(fā)現(xiàn)治療組瘤細(xì)胞胞

5、質(zhì)內(nèi)充滿黑素顆粒，腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)變性、壞死；3ms組、5ms組PCNA mRNA和蛋白表達(dá)均降低（P＜0.05，P＜0.01）。
　　結(jié)論：脈沖電場可抑制黑素瘤生長，這與抑制腫瘤細(xì)胞增殖有關(guān)。
　　第二部分：脈沖電場對荷黑素瘤小鼠心肌損傷的影響
　　目的：觀察脈沖電場對心臟電活動(dòng)和心肌細(xì)胞的影響。
　　方法：將40只荷黑素瘤小鼠隨機(jī)分為對照組、治療組（1ms、3ms、5ms組），治療組給予100V/cm場強(qiáng)、10H