乙醇對小腦皮層浦肯野細(xì)胞復(fù)雜峰電位活動的影響.pdf

1、目的:小腦是乙醇損傷的主要靶器官之一，過量飲酒會造成中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷，甚至引起腦萎縮。小腦皮層唯一輸出神經(jīng)元-浦肯野細(xì)胞，對乙醇高度敏感;酒精中毒可使浦肯野細(xì)胞發(fā)生變性、樹突減少，出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)。酒精對浦肯野細(xì)胞自發(fā)性簡單峰電位放電幾乎沒有影響，而乙醇對小腦皮層浦肯野細(xì)胞自發(fā)性復(fù)雜峰電位的影響機(jī)制尚不明確，應(yīng)用電生理和藥理學(xué)手段，研究乙醇對小鼠小腦皮層浦肯野細(xì)胞復(fù)雜峰電位活動的影響，明確乙醇對復(fù)雜峰電位波形特征、電流性質(zhì)影響的藥理學(xué)機(jī)制

2、。
　　方法:成年ICR小鼠（6-8周齡），腹腔注射烏拉坦(1.3 g/kg)麻醉后，于小腦Vermis區(qū)的相應(yīng)部位行一直徑為1-1.5 mm的開顱術(shù)，剝除硬腦膜，腦表面的暴露部位持續(xù)給予人工腦脊液(ACSF)灌流;選用在體膜片鉗記錄的電生理記錄方法，并且結(jié)合生物素染色技術(shù)，記錄電極內(nèi)充裝10μl電極內(nèi)液，電極阻抗為4-6 MΩ;通過膜片鉗放大器(Axopatch-200B)及數(shù)據(jù)采集軟件記錄小腦皮層浦肯野細(xì)胞自發(fā)性活動;電生理實(shí)

3、驗(yàn)數(shù)據(jù)分析采用Clampfit10.3軟件。各組數(shù)據(jù)均用Mean±SEM表示，樣本數(shù)用n表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析使用SPSS軟件，均數(shù)之間的比較使用單因素方差分析，P＜0.05認(rèn)為有顯著性差異。
　　結(jié)果:1.在烏拉坦麻醉下，小鼠小腦皮層Vermis區(qū)浦肯野細(xì)胞表現(xiàn)為規(guī)律的單純峰電位放電，其平均頻率為19±4.2 Hz;并伴有不規(guī)律的復(fù)雜峰電位(complex spikes，CS)活動，平均頻率為（0.31±0.12 Hz）;

4、>　　2.在電流鉗記錄模式下，乙醇(300 mM)可使放電暫停時間縮短、后超極化振幅減少;
　　3.在電壓鉗下，乙醇顯著抑制小穗個數(shù)以及波形下面積，但對CS發(fā)生頻率、小穗間隔頻率沒有顯著影響;
　　4.乙醇對CS的抑制作用具有一定的劑量依存性;其半數(shù)有效抑制濃度為168.5mM;
　　5.阻斷NMDA和mGluR1受體對乙醇所導(dǎo)致的CS抑制作用沒有顯著影響，但乙醇對CS的抑制作用可以被CB1受體阻斷劑所廢除。