自擬枳椇子湯預(yù)防性解酒保肝作用的研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，建立急性酒精性中毒小鼠模型，探討自擬枳椇子湯對(duì)急性酒精性中毒小鼠的預(yù)防性解酒作用及其肝臟保護(hù)機(jī)制；通過(guò)分子對(duì)接模擬方法，探討枳椇子湯解酒保肝的作用靶點(diǎn)及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為治療急性酒精性中毒的臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　?、湃?0只小鼠隨機(jī)分成3組，一次性給酒，灌胃劑量為0.14ml/10g、0.16ml/10g、0.18 ml/10g。記錄算出小鼠的醉酒耐受時(shí)間、醒酒時(shí)間、醉酒率和

2、死亡率。⑵取60只小鼠隨機(jī)分成6組：空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組（葛花解酲湯組）、枳椇子湯高、中、低劑量組，先給藥后給酒，記錄小鼠醉酒耐受時(shí)間、醒酒時(shí)間。⑶取40只小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、枳椇子湯組，造模3h后取小鼠肝組織制備肝勻漿，按ADH試劑盒說(shuō)明書的方法檢測(cè)ADH活性。⑷取40只小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組和枳椇子湯組。小鼠連續(xù)造模3天后摘眼球取血，按AST、ALT試劑盒說(shuō)明書測(cè)量小鼠血中AST和ALT的含

3、量。⑸取63只小鼠隨機(jī)分為0.5h、1.5h、3h這3個(gè)時(shí)間段組，再分別分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、枳椇子湯組。造模后在三個(gè)時(shí)間段分別取血，用氣相色譜法檢測(cè)小鼠血乙醇濃度并對(duì)其方法學(xué)進(jìn)行研究。⑹構(gòu)建枳椇子湯化學(xué)成分分子數(shù)據(jù)庫(kù)，通過(guò)Atoudocking vina1.1.2分子對(duì)接平臺(tái)，選取ADH、ALDH、COX-2和OPRM1這4個(gè)靶點(diǎn)蛋白，對(duì)枳椇子湯中枳椇子、茯苓、砂仁、甘草的化學(xué)成分進(jìn)行虛擬篩選。
　　結(jié)果：
　?、龠x用0

4、.16ml/10g的灌胃劑量作為本實(shí)驗(yàn)最佳的致醉量，因小鼠的醉酒耐受時(shí)間和醒酒時(shí)間相對(duì)較短，致醉率和24h生存率均為100％，方便試驗(yàn)研究。②與模型組比較，枳椇子湯高、中劑量組和葛花解酲湯組預(yù)防性給藥均可明顯延長(zhǎng)小鼠的醉酒耐受時(shí)間，縮短醒酒時(shí)間，具有顯著性差異（P<0.01）。③與空白組比較，模型組、葛花解酲湯組和枳椇子湯組的ADH值均增高，均具有顯著性差異（P<0.01）。與模型組比較，葛花解酲湯組和枳椇子湯組的ADH亦增高，具有顯著

5、性差異（P<0.01）。④與空白組比較，模型組小鼠血清AST、ALT活性明顯升高，具有顯著性差異(P<0.01)；與模型組比較，葛花解酲湯組和枳椇子湯組具有顯著性差異(P<0.01)；枳椇子湯組與葛花解酲湯組兩組比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）。⑤與模型組比較，葛花解酲湯組和枳椇子湯組在0.5h、1.5h、3h這三個(gè)時(shí)間段的血乙醇濃度明顯降低，具有顯著性差異P(<0.01)。直接氣相色譜法滿足檢測(cè)要求。⑥枳椇子湯有206個(gè)藥效成分能作用