珍稀瀕危植物伯樂樹的遺傳多樣性及纖維特性研究.pdf

1、伯樂樹（BretschneideraSinensisHensl.）又名鐘萼木，屬伯樂樹科，是我國特有的、古老的單種科和殘遺種，1999年被國家林業(yè)局列為國家一級重點(diǎn)保護(hù)野生植物，目前該樹種處于瀕危狀態(tài)。本文首先建立和優(yōu)化了伯樂樹ISSR反應(yīng)體系，在此基礎(chǔ)上利用ISSR和RAPD分子標(biāo)記技術(shù)對23份樣品進(jìn)行了遺傳多樣性研究:同時(shí)對伯樂樹木材纖維形態(tài)特征的徑向變異進(jìn)行了分析。主要結(jié)果如下:
　　 1、采用單因素對比試驗(yàn)和正交優(yōu)化試驗(yàn)

2、研究模板DNA、TaqDNA聚合酶的用量，以及Mg2+、dNTP、引物的濃度和退火溫度對PCR擴(kuò)增的影響。建立了適宜的ISSR-PCR擴(kuò)增體系，即20μL體系中含90ng模板DNA，1xPCRbuffer，1.Ommol·L-1Mg2+，0.15mmol.L-1dNTP，0.5μmol.L-1引物，0.75UTaqDNA聚合酶，退火溫度因引物而異。
　　 2、通過引物篩選，分別得到的13條ISSR和10條RAPD多態(tài)性引物。用于

3、23份伯樂樹樣品PCR分析分別檢測到79和57條擴(kuò)增帶，其中多態(tài)性條帶分別為50和33條。ISSR檢測的有效等位基因數(shù)為1.4036，基因多樣性為0.2305，Shannon信息指數(shù)為0.3405，而RAPD分析得到的對應(yīng)數(shù)值分別為1.3601、0.2115和0.3145，表明檢測的樣品具有較豐富的遺傳變異。對比ISSR和RAPD在PCR反應(yīng)中的穩(wěn)定性和檢測變異的能力表明，ISSR的實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性優(yōu)于RAPD，且ISSR能檢測到比RAPD更

4、多的遺傳變異。另外，我們推斷人類活動(dòng)的干擾和生境的片斷化是導(dǎo)致伯樂樹瀕?，F(xiàn)狀的主要因素之一。
　　 3、伯樂樹木纖維長度平均值為1140.49μm，木纖維寬度平均值為34.91μm，木纖維雙壁厚平均值為16.OOμm，木纖維壁腔比平均值為0.90，木纖維腔徑比平均值為0.54，木纖維長寬比平均值33;纖維長度、寬度、雙壁厚、壁腔比、腔徑比、長寬比都不同程度地隨輪齡逐漸增加，9年后均變緩，9年之后，樹齡對纖維長度與寬度影響不顯著。