替米沙坦和胰島素對糖尿病大鼠睪丸內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和沉默信息調(diào)節(jié)因子1表達的影響.pdf

1、目的：
　　觀察替米沙坦和胰島素對1型糖尿病大鼠睪丸組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)CCAAT增強子結(jié)合蛋白同源蛋白（CHOP）、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-78（GRP-78）、半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-12（caspase-12）、沉默信息調(diào)節(jié)因子1（Sirt1）mRNA表達的影響，探討替米沙坦和胰島素對糖尿病大鼠的睪丸保護作用及機制。
　　方法：
　　雄性SD大鼠36只隨機分為正常對照組8只（A組）和糖尿病造模組28只。用鏈脲佐菌素（

2、STZ）誘導(dǎo)T1DM模型，24只成功。造模成功的大鼠被隨機分為糖尿病組（B組，n=8)、糖尿病胰島素治療組（C組，n=8)和替米沙坦治療組（D組， n=8）。給C、D組分別予以胰島素注射及替米沙坦灌胃，C組每日予以精蛋白鋅胰島素注射液3-5U/只皮下注射，血糖控制在約10mmol/l，D組給予替米沙坦10mg/kg/d灌胃。A組和B組等量生理鹽水。于實驗第8周末留取血標(biāo)本，然后處死動物，迅速取出雙側(cè)睪丸，稱重并計算睪丸指數(shù)，剪下附睪制備

3、精子懸液，計數(shù)精子數(shù)量及活動率。睪丸組織迅速投入液氮中，凍透后保存于-70℃冰箱待用。睪酮水平用放射免疫法測定。CHOP、GRP-78、Caspase-12、Sirt1 mRNA表達水平用實時熒光定量PCR測定。
　　結(jié)果：
　　1、與A組比較，B組糖尿病大鼠血糖[（5.11±0.23）比（27.38±0.82）mmol/l，P<0.05]明顯升高，睪酮[血清睪酮（1.60±0.38）比（3.75±1.01）ng/ml，睪丸

4、睪酮（0.45±0.12）比（3.31±0.26）pg/μg蛋白，均P<0.05]、睪丸重量[（1.79±1.10）比（3.23±0.49）g，P<0.05]、精子數(shù)量[（38.25±3.06）比（34.38±3.58）x106個/mL， P<0.05]及活動率[83.13±3.68）比（74.38±7.01）％，P<0.05]水平明顯降低，睪丸CHOP、GRP-78、Caspase-12 mRNA[（1.33±0.04）比（1.00±

5、0.00）、（1.64±0.16）比（1.00±0.00）、（1.55±0.13）比（1.00±0.00），均P<0.05]表達水平明顯升高，Sirt1 mRNA[（0.52±0.04）比（1.00±0.00），P<0.05]表達水平明顯降低。
　　2、經(jīng)胰島素治療后，C組大鼠血糖[（9.71±0.23）比（27.38±0.82）mmol/l，P<0.05]較B組明顯降低，睪酮[血清睪酮（2.48±0.57）比（1.60±0.38

6、）ng/ml，睪丸睪酮（3.11±0.63）比（0.45±0.12）pg/μg蛋白，均P<0.05]、睪丸重量[（3.05±0.36）比（1.79±1.10）g，P<0.05]、精子數(shù)量[（34.38±3.58）比（7.75±1.67）x106個/mL， P<0.05]及活動率[（74.38±7.01）比（19.25±2.38）%，P<0.05]較B組明顯升高，睪丸CHOP、GRP-78、Caspase-12 mRNA表達水平較B組明顯

7、降低[（0.98±0.06）比（1.33±0.04）、（1.21±0.08）比（1.64±0.16）、（1.24±0.10）比（1.55±0.13），均P<0.05]，Sirt1 mRNA表達水平較B組明顯升高[（0.83±0.09）比（0.52±0.04），P<0.05]。
　　3、替米沙坦治療后，D組大鼠血糖[（21.28±0.54）比（27.38±0.82）mmol/l，P<0.05]較B組明顯降低，精子數(shù)量[（11.1±2

8、.03）比（7.75±1.67）x106個/mL，P<0.05]、精子活動率[（30.13±3.83）比（19.25±2.38）%，P<0.05]明顯升高，睪酮[血清睪酮（1.71±0.32）比（1.60±0.38）ng/ml，睪丸睪酮（0.58±0.10）比（0.45±0.12）pg/μg蛋白，P>0.05]、睪丸重量[（2.16±0.99）比（1.79±1.10）g，P>0.05]無明顯變化，睪丸CHOP、GRP-78、Caspas

9、e-12 mRNA表達水平均較B組明顯降低[（1.29±0.04）比（1.33±0.04）、（1.36±0.12）比（1.64±0.16）、（1.33±0.09）比（1.55±0.13），均P<0.05]，Sirt1 mRNA表達水平較B組明顯升高[（0.69±0.07）比（0.52±0.04），均P<0.05]。
　　4、四組大鼠睪丸指數(shù)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義[(0.94±0.20)比(1.07±0.52)、(0.73±0.08

10、)比(0.94±0.201)、(0.73±0.08)比(1.07±0.52)、(1.03±0.39)比(0.94±0.201)、(1.03±0.39)比(1.07±0.52)（P均>0.05）]。
　　結(jié)論：
　　1、糖尿病大鼠睪丸CHOP、GRP-78和Caspase-12表達水平升高，Sirt1表達水平降低，導(dǎo)致睪丸內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平升高，沉默信息調(diào)節(jié)因子1保護作用減低，最終可致糖尿病大鼠睪丸病變的發(fā)生。
　　2、替米