蘆丁、小檗堿對(duì)代謝綜合征大鼠的藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　蘆丁及其苷元槲皮素為常見的黃酮類成分，已有不少文獻(xiàn)報(bào)道了其調(diào)節(jié)糖脂代謝紊亂方面的作用，而近年來蘆丁及其苷元槲皮素在降尿酸方面的作用成為了一研究熱點(diǎn)。小檗堿即黃連素，是一種常見的異喹啉生物堿，對(duì)胰島素抵抗方面的研究開展的較早，目前已研究的較為深入。在整理總結(jié)大量國內(nèi)外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)開展了蘆丁與小檗堿的聯(lián)合使用對(duì)糖尿病大鼠胰島素抵抗的改善作用研究以及不同劑量下槲皮素、蘆丁與小檗堿的聯(lián)合使用對(duì)高尿酸血癥大鼠的降尿酸作用

2、研究。
　　方法:
　　1、采用一次腹腔注射STZ40mg/kg與高脂飼料喂養(yǎng)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型，對(duì)大鼠連續(xù)灌胃蘆丁和小檗堿，通過測(cè)定大鼠血漿中TC、TG、LDL-C的含量評(píng)價(jià)藥物對(duì)糖尿病大鼠脂代謝的調(diào)節(jié)作用，測(cè)定血漿SOD、MDA、TNF-α的含量觀察藥物對(duì)糖尿病大鼠抗氧化應(yīng)激與抗炎方面的療效。并以基因芯片技術(shù)檢測(cè)篩選差異表達(dá)基因。
　　2、以灌胃腺嘌呤100mg/kg+乙胺丁醇250mg/kg建立大鼠高尿酸血癥模型

3、，對(duì)大鼠連續(xù)灌胃不同劑量槲皮素、蘆丁和小檗堿的復(fù)合低劑量以及別嘌醇與苯溴馬隆，測(cè)定大鼠血漿中UA、XO活力、Cr與BUN;測(cè)定尿液中UA、Cr并計(jì)算FEUA，Cur以及Ccr;大鼠腎組織HE染色觀察病理形態(tài)學(xué)變化;免疫組化法對(duì)腎小管上皮細(xì)胞中URAT1蛋白的表達(dá)進(jìn)行半定量分析。
　　結(jié)果:
　　糖尿病實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組大鼠在注射STZ三周后，F(xiàn)PG顯著上升，模型復(fù)制成功，且模型組的TC、TG、LDL-C、UA、MDA以及T

4、NF-α與空白組比顯著升高;SOD活力顯著下降。與模型組相比，復(fù)合高劑量能顯著降低TC、TG、UA、MDA、TNF-α，升高SOD活力，復(fù)合低劑量組能顯著降低TC、TG、UA、LDL-C、MDA、TNF-α，升高SOD活力;蘆丁組能顯著降低TC、TG、MDA，提高SOD活力，但UA、LDL-C與TNF-α與模型組比無顯著性差異。小檗堿組能顯著降低TC、LDL-C、MDA，對(duì)TG、UA、SOD活力、TNF-α并未顯現(xiàn)顯著的影響。通過對(duì)正常

5、組、模型組以及復(fù)合低劑量組大鼠腎臟做基因芯片檢測(cè)發(fā)現(xiàn)復(fù)合低劑量能回調(diào)多個(gè)模型組異常表達(dá)的基因。
　　高尿酸血癥的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，造模2周時(shí)模型組大鼠血尿酸與空白組比顯著升高，表明高尿酸血癥模型復(fù)制成功，同時(shí)在給藥兩周時(shí)，與模型組相比，槲皮素低中高劑量、復(fù)合低劑量以及陽性藥別嘌醇與苯溴馬隆均能顯著的降低尿酸水平;在給藥3周時(shí)，槲皮素低劑量組的血尿酸水平與模型組比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而其他各組大鼠血尿酸水平顯著下降;槲皮素高劑量、別嘌醇與苯溴

6、馬隆能顯著增加模型大鼠24小時(shí)尿液體積、24小時(shí)尿尿酸總量以及尿酸清除率。槲皮素高劑量、復(fù)合低劑量、別嘌醇與苯溴馬隆對(duì)高尿酸大鼠血漿中XO具有顯著的抑制作用。大鼠腎組織HE染色做病理形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，正常組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)正常，腎小球大小正常，腎小管無混腫變性，腎組織無病理改變。高尿酸模型組大鼠腎皮質(zhì)中腎小管中有些可見紅色的紅細(xì)胞管型，部分腎小管上皮細(xì)胞有些水腫，呈氣球樣變性。各給藥組具有不同程度的病理改變。免疫組化法測(cè)定腎小管上皮細(xì)胞中U

7、RAT1蛋白的表達(dá)結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常組大鼠腎臟上皮細(xì)胞URAT1蛋白成弱陽性表達(dá)，而高尿酸模型組大鼠腎臟上皮細(xì)胞URAT1蛋白則大量表達(dá)，槲皮素高劑量，復(fù)合低劑量與苯溴馬隆能顯著抑制URAT1蛋白表達(dá)。
　　結(jié)論:
　　蘆丁與小檗堿的聯(lián)合使用對(duì)糖尿病大鼠在降脂、抗炎方面的療效優(yōu)于蘆丁或小檗堿的單獨(dú)使用。蘆丁與小檗堿的聯(lián)合使用以及槲皮素能顯著降低高尿酸大鼠的血尿酸水平，其作用機(jī)制可能與抑制黃嘌呤氧化酶的活力和抑制URAT1蛋白在腎上