LncRNA-HOTAIR對大腸癌CCL244細(xì)胞增殖侵襲力及輻射敏感性的影響.pdf

1、目的：探究長鏈非編碼RNA HOTAIR對大腸癌CCL244細(xì)胞增殖侵襲及輻射敏感性的影響。
　　方法：應(yīng)用實時熒光定量PCR方法檢測53例大腸癌腫瘤組織、53例對應(yīng)癌旁正常組織、四株大腸癌細(xì)胞（HCT116、CCL244、SW480、DLD-1）及正常腸粘膜細(xì)胞(FHC)中HOTAIR的相對表達(dá)量。通過瞬時轉(zhuǎn)染將化學(xué)合成的人HOTAIR siRNA及陰性對照轉(zhuǎn)染至大腸癌細(xì)胞CCL244中，實時熒光定量PCR驗證下調(diào)效果。MTT法

2、、克隆形成實驗及細(xì)胞周期實驗檢測下調(diào) HOTAIR對細(xì)胞增殖的影響。細(xì)胞劃痕實驗及Transwell小室侵襲實驗檢測下調(diào)HOTAIR對細(xì)胞侵襲遷移的影響?？寺⌒纬陕?lián)合輻照檢測下調(diào)HOTAIR對細(xì)胞輻射敏感性的影響。流式細(xì)胞術(shù)檢測下調(diào)HOTAIR對輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的影響。Western blot檢測下調(diào)HOTAIR對細(xì)胞凋亡及遷移相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：相較于53例對應(yīng)癌旁正常組織及正常腸粘膜細(xì)胞，在53例腫瘤組織及四株腫

3、瘤細(xì)胞中HOTAIR高表達(dá)。瞬時轉(zhuǎn)染siRNA顯著降低CCL244細(xì)胞中HOTAIR表達(dá)量。下調(diào)HOTAIR抑制CCL244細(xì)胞生長增殖，抑制CCL244細(xì)胞侵襲遷移，促進(jìn)輻射誘導(dǎo)的CCL244細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)CCL244細(xì)胞的輻射敏感性，抑制遷移相關(guān)蛋白MMP2、MMP9的表達(dá)，抑制抗凋亡基因Bax的蛋白表達(dá)而促進(jìn)促凋亡基因Bcl-2的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)論：HOTAIR在大腸癌腫瘤組織及細(xì)胞中高表達(dá)，下調(diào) HOTAIR可抑制大腸癌