淫羊藿膠囊調(diào)節(jié)骨礦化治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效觀察和機制研究.pdf

1、目的：從理論研究的角度總結(jié)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(PMOP)的發(fā)病機制，從臨床研究的角度探索PMOP患者基質(zhì)gla蛋白（MGP）與骨代謝的關(guān)系及胎球蛋白A-基質(zhì)gla蛋白-鈣磷礦化復(fù)合物（FMC）參與PMOP的發(fā)病機制，并觀察中藥淫羊藿膠囊治療PMOP患者（腎陽虧虛證）的臨床療效和作用機制。
　　方法：
　　1、理論研究：
　　查閱文獻，總結(jié)PMOP的發(fā)病機制，分析骨礦化異常與PMOP之間的關(guān)系；對古今相關(guān)文獻進行系統(tǒng)的回顧

2、總結(jié)，以了解中醫(yī)對PMOP的病因病機及治則治法的認識，為臨床試驗研究提供理論依據(jù)。
　　2、血清基質(zhì)gla蛋白與骨代謝的相關(guān)性：
　　本研究錄入120例PMOP患者和60例骨量正常的絕經(jīng)后婦女。通過聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)檢測血清MGP mRNA水平,骨狀態(tài)通過骨密度（BMD）和骨轉(zhuǎn)換標志物(β-CTX，P1NP）評估。此外，也檢測血清雌二醇（E2）、甲狀旁腺素（PTH）、血鈣（Ca）、血磷（P）水平。
　　3、胎球蛋

3、白A-基質(zhì)gla蛋白-鈣磷復(fù)合體(FMC)參與PMOP的機制研究：
　　選取行腰椎手術(shù)的PMOP患者和骨量正常的絕經(jīng)后女性各23例，在手術(shù)時取其部分腰椎骨組織，患者血清胎球蛋白A（fetuin A）、基質(zhì)gla蛋白(MGP)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP2）、runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（RUNX2）水平采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，骨組織局部fetuin A、MGP、BMP2、RUNX2 mRNA及蛋白的表達則分別通過PCR及免疫

4、組化的方法檢測。
　　4、中藥療效研究：
　　選取PMOP患者90例，將其隨機雙盲分為A組（安慰劑對照組）、B組（淫羊藿膠囊低劑量組）及 C組（淫羊藿膠囊高劑量組），共治療24周。于治療前和治療24周后，觀測患者疼痛VAS評分、主要癥候評分、中醫(yī)證候積分療效變化，并檢測患者 BMD、血清中 PINP、β-CTX及血清Fetuin-A、MGP水平的變化。
　　統(tǒng)計學(xué)的處理：數(shù)據(jù)的分析處理采用統(tǒng)計軟件SPSS20.0進行，

5、所有的數(shù)據(jù)都用均數(shù)±標準差( x±s)的形式表示，統(tǒng)計結(jié)果出現(xiàn) P＜0.05則認為差異具有統(tǒng)計學(xué)的意義。
　　結(jié)果
　　1、查閱文獻，研究表明骨礦化異常是OP/PMOP的發(fā)病原因之一，F(xiàn)MC的形成是維持正常骨礦化的重要機制，但FMC是如何參與OP/PMOP發(fā)病的尚不清楚；中醫(yī)學(xué)認為 OP/PMOP的發(fā)病關(guān)鍵在于多種原因?qū)е碌哪I虛髓虧，還與脾胃虛弱、肝血不足、瘀血阻滯有關(guān)。此外，我的導(dǎo)師向楠教授痰濁也是OP發(fā)病的重要因素。因此

6、中醫(yī)藥治療OP/PMOP也以補腎為基礎(chǔ)，補腎中藥是否能夠通過影響骨礦化從而改善 OP/PMOP的臨床癥狀有待研究。
　　2、PMOP組與非骨質(zhì)疏松組相比，BMD、MGP mRNA、β-CTX、P1NP的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。PMOP患者血清MGP mRNA水平顯著低于對照組(0.835±0.415 VS4.524±0.769，P<0.001),與BMD(r=0．376， P<0．001)、E2(r=0.227，P=0.

7、013)呈正相關(guān)。未發(fā)現(xiàn)MGPmRNA與年齡、身高、體重、PTH、Ca、P、β-CTX，P1NP有明顯相關(guān)性。在骨量正常的絕經(jīng)后婦女中，在MGP mRNA與其他參數(shù)之間沒有發(fā)現(xiàn)明顯的相關(guān)性。
　　3、PMOP組血清Fetuin-A、MGP、腰椎BMP2、Runx2 mRNA表達明顯低于非骨質(zhì)疏松組，而腰椎MGPmRNA表達高于非骨質(zhì)疏松組（P<0.05）；兩組間比較，血清BMP2、RUNX2水平、腰椎Fetuin-A mRNA表達

8、沒有明顯的差異（P>0.05）。多元邏輯回歸分析顯示，腰椎MGP、BMP2及RUNX2 mRNA表達與BMD相關(guān)（分別是OR1.016,95％ CI0.809-0.991,P=0.029；OR1.230,95% CI1.063-1.424,P=0.015；OR1.107,95% CI1.016-1.205,P=0.048）。
　　免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，骨小梁周邊的成骨細胞及骨髓基質(zhì)細胞胞漿均可見Fetuin-A、BMP2、RUNX

9、2、MGP的陽性表達，骨小梁周邊的破骨細胞還可見到MGP的陽性表達。與非骨質(zhì)疏松組相比， PMOP組MGP的光密度值水平較高（P＜0.05）而BMP2和RUNX2水平較低（P＜0.05或P＜0.01）；兩組間比較，F(xiàn)etuin-A光密度值水平差異不明顯(P＞0.05）；
　　4、同治療前相對比，B、C兩組都能有效改善患者的臨床癥狀、增加患者腰椎及股骨頸的骨密度、提高血清 Fetuin-A及 MGP的水平（P<0.05），對骨代謝標

10、志物影響不明顯（P＞0.05）；其中C組能更快緩解疼痛，且對腰椎骨密度的升高效果更為顯著（P<0.01）。與治療前比較，A組對各項指標影響均不顯著（P＞0.05）。
　　結(jié)論
　　1、臨床與試驗研究提示，MGP與PMOP有一定的相關(guān)性，而FMC很可能通過影響骨礦化從而影響PMOP的發(fā)?。谎a腎中藥治療PMOP有中醫(yī)的理論基礎(chǔ)，也有現(xiàn)代試驗研究的支持。
　　2、低血清MGP mRNA水平可能與PMOP的發(fā)病有關(guān)，而雌激素參