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文檔簡介
1、阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease,AD)是患病率最高的老年性神經系統(tǒng)疾病,臨床以記憶力、感覺能力、判斷力、思維能力、運動能力、情感反應等降低為主。構建阿爾茨海默癥的細胞模型對研究其病因、病理過程以及篩選防治阿爾茨海默病的新藥具有重要作用。本研究使用RT-PCR的方法從人神經細胞中克隆了多個AD相關基因。在此基礎上用pcDNA3.1真核表達載體經脂質體轉染U251細胞、G418篩選后獲得了APPsw(Lys595Asn
2、,Met596Leu)和野生型BACE1轉染的穩(wěn)定表達細胞株。基因組DNA PCR、RT-PCR和Western blot結果表明目的基因轉染成功并在mRNA和蛋白質水平穩(wěn)定表達,APPsw蛋白和BACE1蛋白表達對U251細胞形態(tài)無明顯影響,APPsw(Lys595Asn,Met596Leu)轉染后APP蛋白和Abeta的表達量與對照組相比明顯增多,BACE1轉染組的Abeta產量明顯增多。本研究結果將為以后深入研究阿爾茨海默癥分子機
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