CUG-BP1在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:
　　本研究旨在探索喉鱗狀細(xì)胞癌中CUG-BP1的蛋白和RNA表達(dá)情況，表達(dá)部位及意義，旨在尋求喉癌早期診斷，基因靶向治療方法及預(yù)后評(píng)價(jià)的指標(biāo)。
　　材料與方法:
　　一、實(shí)驗(yàn)材料
　　實(shí)驗(yàn)組:收集2011至2014年間在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院耳鼻咽喉科手術(shù)治療的60例喉鱗狀細(xì)胞癌組織標(biāo)本，對(duì)照組:選取其中25例行全喉手術(shù)標(biāo)本中距腫瘤邊緣＞2cm黏膜組織作為對(duì)照組.
　　二、實(shí)驗(yàn)方法
　　1、

2、Real Time-PCR方法測(cè)CUG-BP1蛋白的mRNA表達(dá)量.
　　TAKARA試劑盒法提取實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組RNA，轉(zhuǎn)錄為cDNA后進(jìn)行RealTime-PCR擴(kuò)增。
　　2、免疫組化檢測(cè)CUG-BP1蛋白在實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組中的表達(dá)情況及表達(dá)部位。
　　3、western blot方法檢測(cè)CUG-BP1蛋白的表達(dá).
　　提取實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組組織的總蛋白，應(yīng)用SDS-PAGE凝膠電泳方法轉(zhuǎn)印CUG-BP1蛋白于PV

3、DF膜上， ECL發(fā)光后保存圖片，測(cè)定CUG-BP1蛋白的灰度值，分析CUG-BP1蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1、本研究檢測(cè)了60例喉癌和25例喉正常黏膜的CUG-BP1mRNA水平。所有的腫瘤標(biāo)本及正常黏膜中均有CUG-BP1表達(dá)，但其表達(dá)量存在差異。喉癌中CUG-BP1mRNA表達(dá)的相對(duì)值是6.56±1.10:癌旁＞2cm黏膜中CUG-BP1mRNA表達(dá)的相對(duì)值是2.68±0.55。喉癌中CUG-BP1的mRNA

4、表達(dá)水平是癌旁＞2cm黏膜的2.22-4.48倍;差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　2、本研究檢測(cè)了60例喉癌和25例正常黏膜的CUG-BP1蛋白表達(dá)，95％(57/60)的喉鱗狀細(xì)胞癌有CUG-BP1蛋白表達(dá);52％(13/25)的喉黏膜細(xì)胞內(nèi)存在CUG-BP1的蛋白表達(dá)，且CUG-BP1蛋白在喉癌中表達(dá)量高于癌旁黏膜。GAPDH蛋白在喉鱗癌和癌旁黏膜中表達(dá)水平相似。
　　3、本研究應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)CUG-B

5、P1蛋白的細(xì)胞內(nèi)分布。喉癌組織中CUG-BP1蛋白主要定位于細(xì)胞核內(nèi)，少量分布在細(xì)胞漿內(nèi)。喉鱗狀細(xì)胞癌中CUG-BP1蛋白表達(dá)量明顯高于黏膜中CUG-BP1蛋白表達(dá)量。因此喉鱗狀細(xì)胞癌中的CUG-BP1蛋白表達(dá)量同癌旁黏膜的表達(dá)量存在差異。在陰性對(duì)照的切片中沒有觀察到免疫反應(yīng)。
　　4、喉鱗狀細(xì)胞癌組織中CUG-BP1蛋白的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性(P＜0.05)，而與患者的年齡、性別、腫瘤生長(zhǎng)部位因素?zé)o相關(guān)

6、性(P＞0.05).
　　結(jié)論:
　　1、喉癌組織中存在CUG-BP1 mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　2、喉癌組織中CUG-BP1 mRNA和蛋白表達(dá)水平高于對(duì)照黏膜組織，二者之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、CUG-BP1的蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)量高于癌旁＞2cm的黏膜的表達(dá)量，且主要位于細(xì)胞核內(nèi)。
　　4、CUG-BP1蛋白的表達(dá)同腫瘤的臨床分期，分化程度及腫瘤是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，說明CUG-