聚甲基丙烯酸甲酯對原代脊柱轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性機制及臨床作用.pdf

1、第一部分
　　聚甲基丙烯酸甲酯對原代培養(yǎng)脊柱轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性
　　目的：觀察并研究聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）對原代培養(yǎng)脊柱轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡以及對細(xì)胞周期變化的作用及其機制，探討PMMA對體外培養(yǎng)的脊柱轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞可能的細(xì)胞毒性機制。
　　方法：將不同階段的PMMA骨水泥處理原代培養(yǎng)脊柱轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞處理24h。首先測量骨水泥內(nèi)部以及表面溫度，并利用MTT來測經(jīng)處理后細(xì)胞增殖，通過臺盼藍染色法來判斷細(xì)胞壞死，而后細(xì)胞

2、的凋亡和細(xì)胞周期是通過流式細(xì)胞術(shù)來觀測的。PMMA對Bcl-2、Bax、Caspase3、Caspase8、Fas和 PARP在與細(xì)胞凋亡的關(guān)系；cyclin D1， P21 and P27與細(xì)胞周期的關(guān)系是由 SYBR GreenⅠ熒光定量 PCR法和western blot檢測的。
　　結(jié)果：我們的結(jié)果顯示與對照組相比，使用PMMA刺激后的細(xì)胞生長更加顯著的緩慢。此外雖然冷卻期的PMMA治療組與對照組的凋亡率區(qū)別不大，但 PM

3、MA組細(xì)胞凋亡率明顯高于對照組。冷卻后PMMA組、拉絲期PMMA組、對照組的凋亡率分別為（28.57±8.31）％、（41.87±7.35）%、（4.08±1.09）%，各組凋亡率均顯著高于對照組( P<0.05)；相應(yīng)的G0/G1期細(xì)胞比率為(50.91±6.23)%、(77.04±8.61)%和(38.89±9.27)%，PMMA兩組G0/G1期細(xì)胞也顯著衰減；此外，PMMA刺激的原代培養(yǎng)細(xì)胞中，分子標(biāo)記的細(xì)胞凋亡，包括 Fas c

4、aspase-3 caspase-9激活，Bcl-2/Bax失調(diào)。此外，我們評估細(xì)胞周期有關(guān)基因周期蛋白cyclin D1， P21 and P27。結(jié)果表明在PMMA治療組中cyclin D1更低水平的表達，而P21升高(P<0.05)。
　　結(jié)論：PMMA骨水泥能夠明顯誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞凋亡和阻止細(xì)胞在G0/G1期，它為注入骨水泥治療脊椎轉(zhuǎn)移瘤提供了實驗證據(jù)。
　　第二部分經(jīng)皮椎體成形術(shù)治療脊柱轉(zhuǎn)移瘤的作用
　　目的：

5、探討行經(jīng)皮椎體成形術(shù)PVP在治療脊柱椎體轉(zhuǎn)移瘤中臨床短期和長期效果。
　　方法：對36例脊椎轉(zhuǎn)移瘤患者的107個椎體行PVP，術(shù)后一周、三個月、半年、一年分別使用視覺模擬評分法對疼痛的緩解程度進行評估分級；并應(yīng)日常生活自理能力量表對手術(shù)后患者的生活自理能力進行評估。術(shù)后1周通過x線片評估骨水泥在椎體的充盈比例以及其與患者的疼痛緩解的關(guān)系。
　　結(jié)果：顯示成功穿刺107個椎體，雖然19個椎體出現(xiàn)骨水泥漏但均未伴臨床癥狀。椎體成

6、型術(shù)后各階段疼痛緩解率分別為91.7％，86.1％，81.8％，81.8％。8個椎體充盈不足1/3的椎體進行評估，優(yōu)良率為37.5%；充盈大于1/3的優(yōu)良率為89．3％，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。椎體成型術(shù)前患者生活質(zhì)量評分63.9±8.3分，PVP術(shù)后1年82.9±8.7分，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＝0.003）。
　　結(jié)論：經(jīng)皮椎體成形術(shù)PVP是目前治脊柱轉(zhuǎn)移瘤的有效的微創(chuàng)手術(shù)，其緩解疼痛到作用與PMMA在病椎椎體內(nèi)的充