常見薊馬的分子鑒定及中國3地區(qū)西花薊馬遺傳差異分析.pdf

1、薊馬屬于纓翅目，全世界大約有5500種，其中有記載的對農(nóng)作物造成嚴重危害的薊馬僅占薊馬總數(shù)的1％。薊馬一般個體微小(<2mm)，適生性強，繁殖率高，為害時隱藏于植物的各個部位，危害初期常不易被人發(fā)現(xiàn)，直到被危害作物顯現(xiàn)出被害癥狀后才引起人們注意。某些薊馬還可以傳播植物病毒，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來更為嚴重的損失。傳統(tǒng)的薊馬鑒定工作費時費力，尤其是薊馬在幼蟲，蠕蟲，及蛹期不容易通過形態(tài)特征被鑒定出來。這些都給鑒定工作增加了困難，容易導致鑒定錯誤。這

2、對植物檢疫和綜合防治都不利。 基于PCR技術的分子鑒定為物種的鑒定提供了新的手段，彌補了傳統(tǒng)形態(tài)鑒定的諸多不足，可以檢測物種間及同種個體間的細微差別。近年來，外來薊馬物種的入侵使得準確快速地鑒定薊馬成為迫切需要解決的問題。本研究第一部分用PCR產(chǎn)物直接測序法對入侵害蟲西花薊馬和其他8種薊馬的線粒體基因COI 433 bp片段測序，獲得62個個體的序列。分子數(shù)據(jù)分析顯示：種內個體間平均遺傳距離在0～0.005之間，2003年在北京

3、發(fā)現(xiàn)的西花薊馬與歐洲等地區(qū)報導的西花薊馬不存在明顯的遺傳差異；9種薊馬種間平均遺傳距離為0.213。構建的NJ樹可以很好的顯示薊馬的聚類，物種各單元型最初分支自展值均達到100％。結果表明，基于PCR及直接測序技術的分子鑒定可以達到準確鑒定薊馬物種之目的。本研究還根據(jù)實驗得到的分子數(shù)據(jù)，以及從NCBI上搜索得到的相關數(shù)據(jù)，對薊馬的分子系統(tǒng)發(fā)育關系進行了分析，分析結果表明，基于線粒體COI部分片段構建的系統(tǒng)發(fā)育樹，可以很好地對薊馬進行聚類

4、，但對于準確確定某些種的系統(tǒng)發(fā)育地位還存在偏差。 本研究第二部分用PCR擴增了分別在中國云南、山東泰安、北京采集到的西花薊馬COI 433bp片段和ITS2部分片段，分析了這三地西花薊馬的遺傳差異，結果顯示，這3地采集到的西花薊馬從COI序列上顯示遺傳差異，而在ITS2則差異不明顯。 為了更快速地鑒定入侵害蟲西花薊馬，根據(jù)對3種花薊馬屬薊馬的ITS2序列比對分析設計出對西花薊馬的特異引物，該特異引物經(jīng)驗證對西花薊馬特異，