TSH對裸鼠甲狀腺乳頭狀癌的影響及瘤體中cAMP含量的測定及意義.pdf

1、目的：促甲狀腺激素（Thyroid Stimulating Hormone，TSH）與促甲狀腺激素受體（Thyroid Stimulating Hormone Receptor，TSHR）結(jié)合后，可引起細胞內(nèi)第二信使環(huán)磷酸腺苷（ Cyclic Adenosine Monophosphate， cAMP）含量升高，發(fā)揮促進細胞生長與增殖的作用。甲狀腺乳頭狀癌（Papillary Thyroid Cancer，PTC）細胞表面也存在TSHR

2、的表達，故TSH也可促進癌細胞的生長與增殖。本實驗通過構(gòu)建 PTC裸鼠模型（TPC-1系），對在體PTC組織注射不同濃度的TSH，對比各組間腫瘤體積及瘤體內(nèi)cAMP的含量，探究TSH對甲狀腺乳頭狀癌的促生長作用。
　　方法：
　　傳代培養(yǎng)人甲狀腺乳頭狀癌細胞（TPC-1）。35只裸鼠（4周齡，雄性，BALB/c-nu/nu）隨機分為7組，每組5只。于頸背部皮下注射TPC-1癌細胞1×106個。癌細胞注射后第2天起，相同部位皮

3、下注射0.1ml TSH溶液（濃度分別為0 mU/L，2mU/L，4mU/L，8mU/L，12mU/L，16mU/L，20mU/L）。飼養(yǎng)16天后處死。測量腫瘤的長、寬、高徑線，計算腫瘤體積（體積=長×寬×高/2），應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELLSA）測定瘤體內(nèi)cAMP的濃度并應(yīng)用考馬斯亮藍法進行蛋白校正。所得數(shù)據(jù)應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS13.0進行分析。
　　結(jié)果：實驗

4、期內(nèi)各組裸鼠均存活，可見 PTC瘤體形成，無其他明顯意外狀況發(fā)生，如裸鼠間相互撕咬，瘤體破潰、感染等等。組間比較甲狀腺乳頭狀癌腫瘤體積，存在統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）；其中，1組和2組間腫瘤體積的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；其余各組兩兩比較，腫瘤體積均存在差異（P＜0.05）；Pearson相關(guān)性分析，腫瘤體積與 TSH呈顯著的正相關(guān)性（r=0.990，P＜0.01）。各組cAMP濃度存在統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）；兩兩比較，5組

5、和6組間cAMP濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；其余各組兩兩比較，cAMP濃度均有差異（P＜0.05）；Pearson相關(guān)性分析，cAMP濃度與TSH濃度呈顯著正相關(guān)性（r=0.883，P＜0.01）。Pearson相關(guān)性分析，瘤體內(nèi) cAMP的濃度與腫瘤體積正良好相關(guān)性（r=0.927，P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.TSH可以促進裸鼠甲狀腺乳頭狀癌（TPC-1系）組織生長及增殖， TSH濃度越高，成瘤體積越大