星毛冠蓋藤藥用成分粗提取及其萃提物的體外抗癌活性初步研究.pdf

1、目的：對(duì)星毛冠蓋藤（PileostegiatomentellaHand.-Mazz.）進(jìn)行藥用成分粗提取并初步研究星毛冠蓋藤萃提物的體外抗癌活性。
　　方法：（1）選擇超聲功率、液料比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、超聲處理時(shí)間、浸泡時(shí)間作為考察因素，以總黃酮含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，運(yùn)用分光光度法，經(jīng)由單因素試驗(yàn)、正交試驗(yàn)優(yōu)選星毛冠蓋藤中總黃酮的提取工藝。此外，還分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取星毛冠蓋藤的乙醇超聲提取物。（2）采用MTT法，檢測(cè)

2、星毛冠蓋藤石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇及水層萃提物5種成分對(duì)人宮頸癌SiHa細(xì)胞和人肝癌Hep G2細(xì)胞的體外增殖的影響，并在倒置顯微鏡下觀察癌細(xì)胞經(jīng)藥物作用后的形態(tài)學(xué)改變。采用AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測(cè)Hep G2細(xì)胞經(jīng)星毛冠蓋藤萃提物作用后的凋亡情況。
　　結(jié)果：（1）在40℃水浴，超聲功率100 W，正交試驗(yàn)表明最佳提取星毛冠蓋藤總黃酮工藝為20倍量65％乙醇，室溫下浸泡3 h，超聲提取50 min。還制備

3、了星毛冠蓋藤的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇及水層萃提物5種粗分離成分。（2）星毛冠蓋藤的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和水層萃提物對(duì)兩種癌細(xì)胞均有劑量依賴性的增殖抑制作用，并且對(duì)Hep G2癌細(xì)胞的增殖抑制作用呈時(shí)間依賴性，但星毛冠蓋藤的正丁醇萃提物對(duì)兩種癌細(xì)胞的增殖均無影響。其中，星毛冠蓋藤的氯仿萃提物對(duì)SiHa細(xì)胞的36 h作用IC50最低，為217.651±5.510μg/ml，星毛冠蓋藤的石油醚萃提物對(duì)Hep G2細(xì)胞的72 h作用I

4、C50最低，為541.308±29.223μg/ml。通過比較可知，SiHa細(xì)胞對(duì)星毛冠蓋藤萃提物較Hep G2細(xì)胞敏感。同時(shí),倒置相差顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)的觀察結(jié)果表明，上述星毛冠蓋藤4種萃提物劑量依賴性抑制癌細(xì)胞生長增殖，正丁醇萃提物對(duì)癌細(xì)胞的生長增殖無明顯作用，觀測(cè)結(jié)果與MTT分析結(jié)論一致。星毛冠蓋藤石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃提物作用24、48小時(shí)后Hep G2細(xì)胞凋亡率呈逐漸升高趨勢(shì)。
　　結(jié)論：（1）在40℃水浴，超聲功率10