長(zhǎng)鏈非編碼RNA基因變異與冠心病的遺傳易感性研究.pdf

1、目的:
　　1.通過(guò)比較冠脈造影陽(yáng)性（冠心?。┡c陰性個(gè)體，初步探討冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素及其作用強(qiáng)度。
　　2.探討長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)基因SNPs(ANRIL rs2069416 A＞T, ANRIL rs2383206A＞G, ANRIL rs10757274 A＞G, ANRIL rs4977574 A＞G,H19 rs2839698 C＞T, DOCK9-AS2rs913432 A＞G)與冠心病易感性的關(guān)聯(lián)

2、。并對(duì)位于同一單體型域的SNPs構(gòu)建單體型，進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。
　　3.探討基因-基因交互作用對(duì)冠心病發(fā)病的影響。
　　方法:
　　1.臨床危險(xiǎn)因素研究:研究對(duì)象來(lái)源于天津泰達(dá)國(guó)際心血管病醫(yī)院，895例冠脈造影陽(yáng)性個(gè)體作為病例組，594例冠脈造影陰性個(gè)體作為對(duì)照組，進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，收集體格檢查資料、病史信息和相應(yīng)的生化檢測(cè)指標(biāo)數(shù)據(jù)。
　　2.遺傳關(guān)聯(lián)研究:研究對(duì)象來(lái)源于天津泰達(dá)國(guó)際心血管病醫(yī)院進(jìn)行冠狀動(dòng)脈造影檢查的

3、人群，共計(jì)811人，其中CAG陽(yáng)性病例611例，CAG陰性對(duì)照200例。采集血樣，提取基因組DNA，應(yīng)用PCR對(duì)研究對(duì)象的ANRIL rs2069416 A＞T, ANRIL rs2383206 A＞G,ANRIL rs10757274 A＞G, ANRIL rs4977574 A＞G, H19 rs2839698 C＞T, DOCK9-AS2rs913432 A＞G6個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行基因分型。
　　3.資料處理和分析:數(shù)據(jù)庫(kù)的建立使用

4、Epidata3.2，用SPSS19.0和STATA12.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。使用t檢驗(yàn)、非參數(shù)檢驗(yàn)、x2檢驗(yàn)、多因素Logistic回歸等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)流行病學(xué)調(diào)查資料和實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　1.共納入1489例研究對(duì)象。其中冠脈造影陽(yáng)性895例，陰性對(duì)照組594例。CAG陽(yáng)性組和陰性對(duì)照組比較，年齡、性別、高血壓病史、糖尿病病史、吸煙史、飲酒史、心梗史和CAD家族史及臨床生化指標(biāo)中尿酸、肌酐、空腹血糖、纖維蛋白原

5、、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇在兩組間的分布差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CAG陽(yáng)性組與陰性組相比較，高尿酸、高肌酐個(gè)體發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別增加45％、74％(Crude OR=1.45，95％CI:1.17-1.78; Crude OR=1.74，95％CI:1.41-2.15)，在校正年齡和性別后，兩者未見(jiàn)有意義。高空腹血糖、高纖維蛋白原個(gè)體患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)可分別增加110％、52％(crude O

6、R=2.10，95％CI:1.68-2.61;crudeOR=1.52，95％CI1.23-1.88)，經(jīng)年齡和性別校正后，可分別增加127％、53％(AdjustedOR=2.27，95％CI:1.80-2.85; Adjusted OR=1.53，95％CI:1.22-1.92)。高水平膽固醇、高水平低密度脂蛋白膽固醇個(gè)體患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別降低53％、54％(crude OR=0.47，95％CI:0.38-0.59; crude

7、OR=0.46，95％CI:0.37-0.57)，經(jīng)年齡和性別校正后，分別降低48％、51％(Adjusted OR=0.52,95％CI:0.42-0.65; Adjusted OR=0.49,95％CI:0.40-0.62)。校正年齡和性別后，高水平甘油三酯的個(gè)體發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)增加了45％(Adjusted OR=1.45，95％CI:1.16-1.80)，低水平高密度脂蛋白膽固醇的個(gè)體發(fā)生冠心病風(fēng)險(xiǎn)增加31％(Adjusted

8、OR=1.31，95％CI:1.05-1.63)。多因素logistic回歸結(jié)果顯示高水平甘油三酯、低水平低密度脂蛋白膽固醇、高水平空腹血糖、高水平纖維蛋白原、糖尿病、高血壓、吸煙史、心梗史、CAD家族史、年齡大于60歲、男性是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P＜0.05)。
　　2.ANRIL rs10757274 A/G基因多態(tài)性與冠心病風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性(GG基因型vs AA基因型:OR=1.67，95％CI=1.00-2.80;AG+G

9、G基因型vs AA基因型:OR=1.53，95％CI=1.05-2.23;G等位基因vs A等位基因:OR=1.29，95％CI=1.01-1.65）。按照年齡性別進(jìn)行分層分析，在校正年齡因素的影響后，發(fā)現(xiàn)男性群體中攜帶rs10757274 AG、GG、AG+GG基因型的個(gè)體相比于AA基因型攜帶者，患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別增加101％、163％和114％(OR=2.01,95％CI1.14-3.53; OR=2.63,95％CI:1.16-5

10、.96; OR=2.14,95％CI1.25-3.67);在校正性別因素的影響后，60歲以上的人群中攜帶rs10757274 AG、AG+GG基因型的個(gè)體相較于AA基因型的個(gè)體，患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別增加95％和88％(OR=1.95，95％CI:1.14-3.33;OR=1.88，95％CI:1.14-3.10)。采用多因素Logistic回歸分析校正年齡、性別、高血壓家族史、吸煙史、糖尿病家族史，rs10757274 A/G位點(diǎn)與冠心病

11、風(fēng)險(xiǎn)仍存在相關(guān)性。在純合子模型下，有84.39％的把握度獲得校正OR等于1.87(α=0.05)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，ANRIL rs4977574 A/G基因多態(tài)性與冠心病風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性(AG基因型vs AA基因型:OR=1.59，95％CI=1.03-2.45; GG基因型vs AA基因型:OR=1.94，95％CI=1.10-3.42; AG+GG基因型vs AA基因型:OR=1.67，95％CI=1.11-2.53;G等位基因vs A等位

12、基因:OR=1.37，95％CI=1.05-1.80）。在校正年齡因素的影響后，發(fā)現(xiàn)男性群體中攜帶rs4977574AG、GG、AG+GG基因型的個(gè)體相比于AA基因型的個(gè)體，患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別增加101％、191％和121％(OR=2.01，95％CI:1.09-3.72;OR=2.91，95％CI:1.21-6.96;OR=2.21，95％CI1.23-3.95)。在校正性別因素的影響后，年齡小于60歲的人群中攜帶rs4977574A

13、 G+G基因型的個(gè)體相比于AA基因型攜帶者發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)增加113％(OR=2.13，95％CI1.07-4.28)，攜帶GG基因型的個(gè)體相較于AA、AA+AG基因型攜帶者，發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別增加320％和183％(OR=4.20，95％CI:1.55-11.34;OR=2.83，95％CI1.21-6.64);年齡大于60歲的人群中攜帶rs4977574 AG、AG+GG基因型的個(gè)體相較于AA基因型攜帶者，發(fā)生冠心病的風(fēng)險(xiǎn)分別增加

14、94％和79％(OR=1.94，95％CI1.07-3.50;OR=1.79，95％CI:1.03-3.12)。采用多因素Logistic回歸分析校正年齡、性別、高血壓家族史、吸煙史、糖尿病家族史，rs4977574 A/G位點(diǎn)與冠心病風(fēng)險(xiǎn)仍存在相關(guān)性。在純合子模型下，有92.57％的把握度獲得校正OR等于2.18(α=0.05)。未發(fā)現(xiàn)其他位點(diǎn)突變與冠心病發(fā)病存在關(guān)聯(lián)。
　　3.GMDR模型結(jié)果顯示二階、三階、四階和五階交互作用

15、模型均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4.單體型分析顯示，ANRIL的4個(gè)SNPs間存在16種可能的單體型，與頻率最高的單體型AAAA(rs10757274、rs2069416、rs2383206、rs4977574)相比，攜帶其余單體型的個(gè)體患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)無(wú)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.性別、年齡、高血壓史、糖尿病史、吸煙史、飲酒史、心梗史、冠心病家族史、高尿酸、高肌酐、高空腹血糖、高纖維蛋白原、低

16、水平TC、高水平TG、低水平HDL-C和低水平LDL-C是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素。
　　2.ANRIL基因rs10757274A/G和rs4977574 A/G位點(diǎn)變異與冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)。
　　3.按性別分層分析，ANRIL基因rs10757274 A/G和rs4977574A/G位點(diǎn)突變與冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)在中國(guó)漢族男性中更為顯著。按年齡分層分析，攜帶ANRIL基因rs10757274 A/G位點(diǎn)突變基因型的60歲以