寒水石化灰小劑對大鼠胃癌前病變及胃癌干預的實驗研究.pdf

1、目的：寒水石化灰小劑是蒙藥治療消化系統(tǒng)疾病的藥物中具有代表性的灰化劑，本課題探討寒水石化灰小劑對大鼠胃癌前病變及胃癌的預防及治療作用，為其臨床應用提供理論基礎和實驗依據(jù)。
　　方法：化學誘變劑甲基硝基亞硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)誘導32周建立大鼠胃癌前病變及胃癌模型；造模21周開始分別給予高、中、低劑量寒水石化灰小劑及陽性藥胃復春，觀察藥物對大鼠胃癌前病變及胃癌模型

2、的干預作用；觀察實驗期間各組大鼠體重、進食量、飲水量及一般體征變化；40周實驗結束時，對各組大鼠胃黏膜進行大體觀察，計算腫瘤發(fā)生率；放免法檢測血清中胃泌素（GAS）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平；采集胃部病變及病變旁組織做HE染色，進行病理觀察；免疫組化技術檢測胃部病變及病變旁組織Bcl-2/Bax表達；Western Blotting檢測胃部病變及病變旁組織Bcl-2/Bax表達。
　　結果：（1）大鼠一般狀況體征變化：模

3、型組體態(tài)消瘦，被毛松散、變黃，精神萎靡，糞便稀溏甚至泄瀉，尾色蒼白，給藥后以上癥狀均有不同程度改善，尤其高劑量組癥狀恢復明顯；造模期間，從第4周開始，模型組體重顯著低于正常組，給藥干預后，大鼠體重有所增長，但體重仍低于正常組。（2）大鼠進食量、飲水量結果：模型組與正常組相比，進食量、飲水量均減少；給予藥物干預后，給藥組進食量、飲水量均有不同程度增加。（3）胃部大體觀察結果顯示：隨著造模時間延長，模型組胃部黏膜變薄、顏色變淺，彈性變差，皺

4、襞走向逐漸紊亂，造模第40周時，胃竇部有明顯腫物，胃黏膜大部分脫落且顏色蒼白，胃壁較薄，彈性變差，胃黏膜皺襞走向紊亂，皺襞變淺，有大量出血點，成散狀或樹枝狀，血管透見；給予寒水石化灰小劑后，以上癥狀有所改善。（4）各組腫瘤發(fā)生率結果：模型組腫瘤發(fā)生率最高，給予寒水石化灰小劑組腫瘤發(fā)生率明顯下降。（5）寒水石化灰小劑對GAS、TNF-α表達的影響結果：模型組GAS、TNF-α水平顯著升高（P＜0.01），給予寒水石化灰小劑干預后，與模型組

5、相比，各給藥組GAS、TNF-α水平均有不同程度降低，高劑量組GAS、TNF-α水平顯著降低，說明寒水石化灰小劑能夠下調(diào)GAS、TNF-α表達水平，高劑量組干預作用尤為明顯。（6）胃部病變組織及病變旁組織病理變化觀察結果：隨著造模時間延長，模型組胃部細胞大小、形態(tài)、極性逐漸出現(xiàn)異常，造模第40周時，癌細胞深至肌層，表現(xiàn)為腺癌，腺腔擴張，核分裂增多，非典型增生，腺體排列紊亂，深染，腺體大小不一，核分裂較多，核固縮，結構紊亂，腫瘤突破黏膜，

6、癌旁組織癥狀輕于癌組織癥狀；給予寒水石化灰小劑后，病理切片中細胞排列、形態(tài)、極性等有所改善。（7）免疫組化技術檢測Bcl-2/Bax蛋白表達結果：隨著造模時間延長，Bcl-2陽性表達逐漸增加，Bax陽性表達逐漸降低，Bcl-2/Bax比值逐漸增加，同一時期內(nèi)病變組織的Bcl-2/Bax比值高于病變旁組織的比值；給予寒水石化灰小劑后，Bcl-2陽性表達逐漸降低，Bax陽性表達逐漸增加，Bcl-2/Bax比值逐漸降低，其中高劑量的干預作用最

7、強。（8）Western Blotting技術檢測Bcl-2/Bax蛋白表達結果：隨著造模時間延長，模型組Bcl-2/Bax比值均有不同程度升高，同一時期內(nèi)病變組織的Bcl-2/Bax比值高于病變旁組織的比值；給予寒水石化灰小劑后，Bcl-2/Bax比值降低，說明寒水石化灰小劑能夠下調(diào)Bcl-2，上調(diào)Bax的表達，其中高劑量的干預作用最強。
　　結論：（1）MNNG能夠成功建立大鼠胃癌前病變及胃癌模型。（2）寒水石化灰小劑能夠增加