絲素蛋白基復(fù)合材料重建尿道的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、很多情況，比如感染、炎癥、創(chuàng)傷和先天性疾病等，可導(dǎo)致尿道缺陷或者狹窄并需要尿道重建治療。之前有許多研究嘗試去解決這一臨床問題。而組織工程技術(shù)展現(xiàn)出希望。組織工程尿道組織近幾年已經(jīng)逐漸興起，其中生物材料，種子細(xì)胞以及將種子細(xì)胞復(fù)合到材料的種植方法，是其中至關(guān)重要的三個(gè)因素。
　　為此我們比較了不同體外復(fù)合技術(shù)構(gòu)建組織工程尿道的優(yōu)劣以及舌黏膜作為種子細(xì)胞來(lái)源的可行性分析。通過(guò)對(duì)復(fù)合中的一些關(guān)鍵性技術(shù)進(jìn)行細(xì)致的比較分析，探索構(gòu)建最佳組織

2、工程化尿道的可能性。首先我們分離獲得舌粘膜上皮細(xì)胞和肌細(xì)胞，采用4種復(fù)合技術(shù)行細(xì)胞與標(biāo)準(zhǔn)化材料的復(fù)合：三明治復(fù)合組、層疊復(fù)合組、動(dòng)-靜態(tài)復(fù)合組和離心復(fù)合組。研究發(fā)現(xiàn)舌粘膜可以作為組織工程化尿道的種子細(xì)胞的來(lái)源；各種種植方法各有優(yōu)劣，針對(duì)不同的目的和選用材料，可選擇合適的復(fù)合方法。
　　隨后本研究率先提出利用過(guò)氧化鈣對(duì)絲素蛋白復(fù)合材料進(jìn)行進(jìn)一步的改良，使其具備長(zhǎng)期釋氧的能力，因而能夠更適合后續(xù)的組織工程修復(fù)重建的基礎(chǔ)研究及臨床應(yīng)用需

3、要。由于本實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建材料為蛋白生物膜，所以根據(jù)前一部分復(fù)合方法的探究，分層共培養(yǎng)復(fù)合方法最適合用于本實(shí)驗(yàn)體外構(gòu)建組織工程化前尿道，并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。雖然利用本研究設(shè)計(jì)的蛋白生物膜可以成功修復(fù)前尿道缺損，但是這種蛋白生物膜較薄，需要與周圍組織粘附保證養(yǎng)分供應(yīng)，因此可能不適合后尿道修復(fù)，為此我們需要進(jìn)一步探索將絲素蛋白改性以期用于后尿道修復(fù)重建中的應(yīng)用。
　　而通過(guò)對(duì)后尿道全層組織多尺度結(jié)構(gòu)分析，設(shè)計(jì)了設(shè)計(jì)仿尿道結(jié)構(gòu)的雙層微/納

4、組織工程尿道支架。隨后本研究提出構(gòu)建同時(shí)具備三維微孔結(jié)構(gòu)和納米表層的雙層支架的可行性。將具有納米纖維的細(xì)菌纖維素與絲素蛋白冷凍干燥法相結(jié)合，使最終的復(fù)合材料具有兩種材料的優(yōu)點(diǎn)。細(xì)菌纖維素的納米纖維層可以防止尿液有毒物質(zhì)的侵蝕并有利于上皮細(xì)胞的增殖。絲素蛋白微孔結(jié)構(gòu)有助于細(xì)胞體外粘附和遷移,周圍組織可以生長(zhǎng)。本研究同樣證明了其用于重建后尿道長(zhǎng)段缺損的可行性，這種理念同樣可以應(yīng)用在其他生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。由于本實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建材料為同時(shí)具備三維微孔結(jié)構(gòu)