不同給藥途徑注射CompoundC對缺血性腦損傷及自噬的影響.pdf

1、目的：
　　觀察AMPK抑制劑CompoundC對大鼠永久性局灶性腦缺血損傷后大腦缺血半球皮層內(nèi)哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammaliantargetofrapamycin，mTOR）表達對自噬相關(guān)蛋白LC3和Beclin-1表達的影響，探討不同給藥途徑干預(yù)AMPK對大鼠缺血性腦損傷的保護作用。
　　方法：
　　選取若干健康成年雄性SD大鼠，將它們分為假手術(shù)組、MCAO對照組（腹腔和顱內(nèi)）、腹腔注射藥物干預(yù)組和顱內(nèi)注射

2、藥物干預(yù)組。MCAO對照組和藥物干預(yù)組采用線栓法制作永久性大腦中動脈閉塞(permanentmiddlecerebralarteryocclusion，MCAO）模型，腹腔藥物干預(yù)組大鼠于缺血造模結(jié)束時（完成MCAO后）立即經(jīng)腹腔注射AMPK抑制劑CompoundC，顱內(nèi)干預(yù)組大鼠也于同樣的時間段進行顱內(nèi)注射同一藥物，MCAO對照組和假手術(shù)對照組于同一個時間給予注射等劑量溶媒（生理鹽水+DMSO）。各組大鼠于術(shù)后24h時間點取患側(cè)皮層腦

3、組織，使用Westernblot法檢測mTOR、LC3、Beclin-1的表達情況。以行為學(xué)癥狀評分、腦梗死體積結(jié)果來評價抑制AMPK活性對大鼠缺血性腦損傷的影響。
　　結(jié)果：
　　神經(jīng)癥狀學(xué)評分結(jié)果顯示：假手術(shù)組大鼠未表現(xiàn)出神經(jīng)癥狀，行為學(xué)評分為0分；MCAO組大鼠出現(xiàn)較明顯的神經(jīng)癥狀，行為學(xué)評分高，與假手術(shù)對照組相比，具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.01）；腹腔及顱內(nèi)注藥組與MCAO對照組相比，評分明顯降低（p＜0.01）。腹腔

4、給藥及顱內(nèi)注藥對照組相比，腹腔組的評分要略低于顱內(nèi)注藥組（p＜0.01）。TTC染色法結(jié)果顯示：與假手術(shù)組相比，MCAO組大鼠腦梗死體積明顯加重（p＜0.01），而無論是腹腔給藥組還是顱內(nèi)給藥組，與MCAO組大鼠相比較均能顯著減少腦梗死體積(p＜0.01)。WesternBlot實驗結(jié)果顯示：Beclin-1蛋白表達水平，MCAO組相比假手術(shù)組明顯升高，(p＜0.01)，腹腔組及顱內(nèi)組的表達結(jié)果相比MCAO組則表現(xiàn)出減少（p＜0.01）

5、，將兩組之間互相比較可以發(fā)現(xiàn)后者的蛋白表達情況下降程度更多（p＜0.01）；LC蛋白表達趨勢與Beclin-1相似，MCAO組相比假手術(shù)組明顯升高，(p＜0.01)，而與腹腔組及顱內(nèi)組的表達相比時發(fā)現(xiàn)MCAO組的表達有減少（p＜0.01），兩組互相比較發(fā)現(xiàn)顱內(nèi)組的表達量下降程度更多（p＜0.01）。mTOR蛋白水平表達與Beclin-1相反，MCAO組的表達程度最低（p＜0.01），兩組注藥組之間相比較則顯示顱內(nèi)組表達量相對更高（p＜0