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文檔簡介
1、目的:
1.建立戊巴比妥鈉睡眠小鼠模型,觀察不同劑量柴郁安神湯對小鼠睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時間的影響,從而觀察其改善睡眠的作用,確定助眠效果最合理的用藥劑量;
2.建立PCPA(對氯苯丙氨酸)失眠小鼠模型,通過檢測失眠小鼠腦內(nèi)5-HT(5-羥色氨)、NE(去甲腎上腺素)及γ-GABA(γ-氨基丁酸)含量,觀察柴郁安神湯對與失眠相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響,探討柴郁安神湯治療失眠的作用機(jī)制,為臨床廣泛應(yīng)用柴郁安神湯治療失眠提
2、供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
1.采用腹腔注射戊巴比妥鈉的方法,制備睡眠小鼠模型;采用腹腔注射PCPA方法制備小鼠失眠模型;
2.實(shí)驗(yàn)室條件下喂養(yǎng)1周后,將小鼠分為兩大組,第一大組50只,隨機(jī)分為5小組,分別為空白組、陽性對照組、中藥低劑量組、中藥高劑量組;按照0.2mL/10g體積予空白組小鼠蒸餾水灌胃,柴郁安神湯組給予25%、50%、100%濃度的柴郁安神湯濃煎液(1g/ml)灌胃,陽性對照組予濃度為1.3%的
3、艾司唑侖水溶液灌胃,灌胃1周。在最后一次灌胃1小時后,將戊巴比妥鈉45mg/kg(在預(yù)實(shí)驗(yàn)中,引起全部小鼠睡眠的最小劑量)給予小鼠腹腔注射。觀察小鼠的翻正反射消失時間及睡眠持續(xù)時間;第二大組90只小鼠,隨機(jī)分為空白組、模型組、陽性對照組、中藥低劑量組、中藥中劑量組與中藥高劑量組,除空白組外,其余組小鼠全部造模,造模方法為連續(xù)兩日腹腔注射PCPA混懸液,造模成功后,統(tǒng)一灌胃6天,空白組予0.2ml/10g體積蒸餾水灌胃,其余組灌胃方法同實(shí)
4、驗(yàn)一;于實(shí)驗(yàn)第8d各組灌胃1小時后取材,檢測不同小組小鼠腦內(nèi)5-HT、NE及γ-GABA含量,進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析并比較各組差異。
結(jié)果:
1.柴郁安神湯對戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期及睡眠持續(xù)時間的影響。①模型小鼠翻正反射消失時間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:艾司唑侖與中藥均有縮短模型小鼠入睡時間的作用:中藥中劑量組、中藥高劑量組與陽性對照組相比,無顯著性差異(P>0.05),中藥低劑量組與陽性對照組,存在顯著差異(p<0.05),中藥低
5、劑量組與空白組比較,無顯著性差異(P>0.05)。②模型小鼠睡眠時間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:艾司唑侖與中藥均有延長小鼠睡眠持續(xù)時間的作用:中藥高、中、低劑量組與陽性對照組比較,結(jié)果無顯著性差異(P>0.05),說明中藥高劑量組、中藥中劑量組、與中藥低劑量組均有延長小鼠睡眠持續(xù)時間的作用,與陽性對照組無顯著差異。
2.柴郁安神湯對PCPA致失眠小鼠腦內(nèi)5-HT、NE及γ-GABA含量的影響;實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:模型組與空白組小鼠腦內(nèi)5-HT、
6、NE及γ-GABA含量的比較,具有極顯著性差異(P<0.01);陽性對照組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組,與模型組比較,具有極顯著性差異(P<0.01);陽性對照組與中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組相比,具有極顯著性差異(P<0.01)中藥中劑量組與陽性對照組比較,具有極顯著性差異(P<0.01)。
結(jié)論:
1.采用PCPA連續(xù)兩日腹腔內(nèi)給藥的造模方法,可成功制備對氯苯丙氨酸小鼠失眠模型;
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