利用天然蛋白及PCL（全程）雜交電紡膜支架構(gòu)建的心肌補(bǔ)片治療心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、干細(xì)胞作為一類可以自我復(fù)制、并具有向多種組織器官方向分化潛能的細(xì)胞，在器官再生方面受到越來越多的關(guān)注。心肌細(xì)胞外基質(zhì)（Cardiac Extracellular Matrix，ECM）為移植的干細(xì)胞提供心肌組織微環(huán)境，它對于移植的細(xì)胞來說是十分重要的結(jié)構(gòu)。
　　本研究將天然膠原蛋白與彈力蛋白按照質(zhì)量比7:3的比例混合均勻后與聚己內(nèi)酯(PCL)按照2:8，5:5和8:2的質(zhì)量比混合制備靜電紡絲膜。并以純聚己內(nèi)酯電紡膜（PCL）作為對

2、照電紡膜。通過對其表征及生物學(xué)性能的比較，篩選出配比最優(yōu)的雜交電紡絲膜。應(yīng)用純聚己內(nèi)酯電紡膜作為對照，將配比最優(yōu)的靜電紡絲膜（80%NP）通過種植GFP來源的小鼠c-kit+干細(xì)胞而制備“支架材料-干細(xì)胞”心肌補(bǔ)片。將獲得的心肌補(bǔ)片移植到心肌梗死的小鼠心臟表面。通過對小鼠心臟超聲檢測、左心血流動力學(xué)檢測、心臟組織學(xué)染色和免疫熒光追蹤移植的GFP+干細(xì)胞的方法探討其對心肌梗死的治療機(jī)制。
　　結(jié)果顯示，天然蛋白的加入明顯的改變了雜交

3、電紡膜的力學(xué)特性和親水性。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)本研究所制備的電紡膜可以促進(jìn)c-kit+骨髓干細(xì)胞的增殖。尤其是80%天然蛋白雜交電紡膜；因此選用80%天然蛋白雜交電紡膜進(jìn)行后續(xù)的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，心梗模型組小鼠心臟出現(xiàn)了心室壁瘤，并出現(xiàn)了心肌矛盾運(yùn)動。而支架材料可以完整地覆蓋在缺血心肌表面，為其提供力學(xué)支撐；心肌補(bǔ)片組小鼠心功能及血流動力學(xué)均表現(xiàn)出明顯優(yōu)于其他組的趨勢；另外，該心肌補(bǔ)片可以減少小鼠心肌梗死后的心肌細(xì)胞凋亡，減少膠原蛋白

4、的沉積，并且可以緩解左心的重構(gòu)現(xiàn)象。
　　本研究率先制備了一種新型心肌補(bǔ)片，即高濃度天然蛋白雜交電紡絲膜聯(lián)合骨髓來源的c-kit+干細(xì)胞。通過對天然蛋白與聚己內(nèi)酯不同比例制備的電紡膜表征及生物學(xué)特性的比較，獲得配比最優(yōu)的雜交電紡膜并將其復(fù)合干細(xì)胞而制備成的心肌補(bǔ)片移植到小鼠體內(nèi)。體外研究證實(shí)，該支架材料對c-kit+干細(xì)胞具有促進(jìn)增殖的作用，而體內(nèi)實(shí)驗(yàn)則得到了其對于心肌梗死后心臟修復(fù)的可靠證據(jù)。該支架材料及其制備的新型心肌補(bǔ)片對心