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文檔簡介
1、目的:口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma)是口頜系統(tǒng)中經(jīng)常發(fā)生的惡性癌變,極其嚴(yán)重的危害著人類的健康。本實驗將通過口腔鱗狀細胞癌細胞細胞株(OSC-3、OSC-4)分泌的胞外體,研究其對細胞生物學(xué)行為的影響。
方法:分別培養(yǎng)OSC-3、OSC-4兩種類型的口內(nèi)鱗狀細胞癌細胞,從OSC-3、OSC-4的上清培養(yǎng)液中分離提純胞外體(exosome, EXO),取正常的OSC-3和OSC-4作為
2、對照組,有胞外體作用后的OSC-3和OSC-4作為實驗組。使用免疫金標(biāo)技術(shù)找到胞外體膜上的CD9。將提取的胞外體作用于OSC-3和OSC-4,MTT實驗分別檢測胞外體對OSC-3和OSC-4增殖能力的影響;細胞劃痕實驗各自觀察胞外體對OSC-3和OSC-4遷移能力的結(jié)果;transwell小室侵襲實驗分別檢測胞外體對OSC-3和OSC-4侵襲能力的作用。
結(jié)果:細胞上清液提取物免疫金標(biāo)結(jié)果可見金標(biāo)記的CD9,即分離提純物為胞外
3、體;MTT檢測結(jié)果顯示胞外體作用后的OSC-3和OSC-4的增殖能力24h、48h、72h組均增強;細胞劃痕實驗結(jié)果顯示胞外體作用后的OSC-3和OSC-4的遷移能力增強;Transwell實驗結(jié)果表明加入胞外體組的OSC-3和OSC-4的細胞被染色的數(shù)量明顯多于對照組,對細胞計數(shù)后進行統(tǒng)計學(xué)分析,OSC-3和OSC-4加入胞外體組侵襲細胞的數(shù)目明顯多于對照組,顯示其侵襲能力也增強。
結(jié)論:OSC-3和OSC-4分泌的胞外體可
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