不同根管預(yù)備長度對正常和免疫抑制大鼠感染根管形成根尖生物膜的影響.pdf

1、根管治療是治療根尖周炎的首選方法，即在治療中最大程度的清除根管內(nèi)感染，并進(jìn)行嚴(yán)密的三維充填以防止再感染。少數(shù)的患牙，即使進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的根管治療，根尖周炎仍遷延不愈，我們通常將此稱為難治性根尖周炎。根尖生物膜被認(rèn)為是導(dǎo)致難治性根尖周炎的重要原因。對于牙周健康的患牙，根尖生物膜來源于感染根管已達(dá)成共識。
　　但根管內(nèi)的細(xì)菌是在環(huán)境因素的誘導(dǎo)下主動(dòng)溢出根尖孔，還是受擠壓而溢出根尖孔形成根尖生物膜仍存在爭議。為了研究根尖生物膜的形成原因

2、，本課題組前期實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了體外研究，表明只有根管全長預(yù)備和超預(yù)備狀態(tài)下，才在根尖周檢測到細(xì)菌及根尖生物膜。但體外實(shí)驗(yàn)忽略了機(jī)體的免疫反應(yīng)。根尖周炎的病理反應(yīng)與機(jī)體的免疫反應(yīng)密不可分，而根尖周細(xì)菌形成根尖生物膜又與根尖周的免疫炎癥反應(yīng)可能有著一定聯(lián)系。
　　本實(shí)驗(yàn)將建立免疫抑制大鼠模型和大鼠感染根管動(dòng)物模型，對免疫正常組和免疫抑制組進(jìn)行不同長度的根管預(yù)備，以觀察不同根管預(yù)備長度及免疫抑制對根尖生物膜形成的影響。為臨床工作中預(yù)防難治性根

3、尖周炎的形成提供理論依據(jù)。
　　目的：
　　建立感染根管大鼠模型和免疫抑制大鼠模型，探討不同根管預(yù)備長度對免疫正常和免疫抑制大鼠感染根管形成根尖生物膜的影響。
　　材料和方法
　　1、建立免疫抑制大鼠模型：54只大鼠分為免疫正常組（n=27）和免疫抑制組（n=27）。免疫抑制組腹腔注射環(huán)磷酰胺50mg/kg，1周1次，以建立免疫抑制動(dòng)物模型。
　　2.建立感染根管大鼠模型：免疫正常組隨機(jī)分為對照組A(n=3

4、),實(shí)驗(yàn)組B、C、D、E（均n=6）；免疫抑制組均隨機(jī)分為對照組a(n=3),實(shí)驗(yàn)組b、c、d、e（均n=6）。對照組不做處理。實(shí)驗(yàn)組雙側(cè)上頜第一磨牙均行開髓處理。開髓后髓腔暴露于口腔環(huán)境中正常飼養(yǎng)4周，以建立感染根管動(dòng)物模型。
　　3.根管干預(yù)：B、b組開髓后不做任何處理。C、c組雙側(cè)上頜第一磨牙近中根管行根管預(yù)備至根管上2/3工作長度。D、d組雙側(cè)上頜第一磨牙近中根管行根管預(yù)備至全長。E、e組雙側(cè)上頜第一磨牙近中根管超出根管工

5、作長度1毫米預(yù)備。根管預(yù)備后第7天和21天，每組均分別處死3只大鼠，取左側(cè)上頜第一磨牙近中牙根表面組織進(jìn)行PCR檢測，取右側(cè)上頜第一磨牙近中牙根用于掃描電鏡，觀察是否形成根尖生物膜。
　　結(jié)果：
　　根管預(yù)備后第7天和21天，全長組（D、d組）及超長組（E、e組）根尖區(qū)樣本擴(kuò)增出16SrDNA特異性引物片段，對照組（A、a組）、開髓組（B、b組）及2/3干擾組（C、c組）均未檢測到。
　　根管預(yù)備后第7天，A、a組樣本

6、的根尖區(qū)均可見大量膠原纖維覆蓋于牙根表面，未見暴露的牙骨質(zhì)及吸收陷窩。而B、C、D、E、b、c、d、e組近中牙根根尖區(qū)在掃描電鏡下均未觀察到細(xì)菌生物膜的存在,但根尖區(qū)牙骨質(zhì)表面暴露，牙根表面幾乎沒有膠原纖維覆蓋，并可見許多牙骨質(zhì)吸收陷窩。根管預(yù)備后第21天，E組中僅有一例樣本觀察到小范圍細(xì)菌生物膜存在，主要由桿菌組成，周圍包裹有少量無定型基質(zhì)樣物質(zhì)。其余組與根管預(yù)備后第7天一致。
　　結(jié)論：
　　1.成功建立免疫抑制大鼠模型