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文檔簡介
1、目的:
探討脂肪間充質(zhì)干細胞復合人工真皮(皮耐克)對深度燒傷愈合的影響及機制的研究。
方法:
選用 SPF級綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠,取其腹股溝處脂肪墊,膠原酶消化法獲取脂肪間充質(zhì)干細胞(Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs),流式分析細胞表面特異性標志物,并誘導其向成脂細胞、成骨細胞等方向分化,觀察 ADSCs的多向分化能力。將制備成功的大鼠(成年雌性實驗
2、級 SD大鼠)深度燒傷模型為兩組:A組:人工真皮(皮耐克)+ADSCs組;B組:人工真皮(皮耐克)+生理鹽水組。術(shù)后每天觀察創(chuàng)面有無感染、異常分泌物等情況,并每周記錄創(chuàng)面最大直徑以評估創(chuàng)面愈合情況。術(shù)后3周取創(chuàng)面皮膚組織進行冰凍切片,評估 ADSCs參與創(chuàng)面愈合情況,HE切片觀察創(chuàng)面皮膚組織中肉芽組織增生和上皮化過程。
結(jié)果:
1.實現(xiàn)了大鼠 ADSCs的成功分離、培養(yǎng)、純化及鑒定,3代-10代內(nèi)基本按對數(shù)生長,形態(tài)
3、均一,具備典型的間充質(zhì)干細胞的形態(tài)學特征。流式檢測結(jié)果顯示 ADSCs高表達間充質(zhì)標記物 CD29、CD90、CD105;低表達造血系細胞表面標記物 CD34及血管內(nèi)皮性抗原 CD45。
2.皮膚深度燒傷模型顯示:與對照組相比,在1周、2周和3周的時間里ADSCs-皮耐克復合真皮治療組(A組)創(chuàng)面最大直徑明顯小于對照組(B組)創(chuàng)面,并且在實驗組,創(chuàng)面愈合后的皮膚附屬結(jié)構(gòu)恢復情況好于對照組創(chuàng)面。HE染色顯示,A組、B組均與正常皮
4、膚結(jié)構(gòu)形態(tài)相似,但 A組形態(tài)更為接近正常皮膚結(jié)構(gòu)。熒光顯微鏡下,移植了 ADSCs的A組創(chuàng)面組織可見位于散落點狀熒光。
結(jié)論:
1.人工真皮(皮耐克)具有很好的吸附性、親和性和保濕性,且生物來源廣泛、價格低廉、安全無毒,是一種極佳的可應用于創(chuàng)面修復的生物工程材料。2. ADSCs免疫原性低,移植于大鼠深度燒傷創(chuàng)面后一定時期內(nèi)仍可在組織內(nèi)存活而不被排斥,保證了移植后持續(xù)發(fā)揮作用。同時,人工真皮(皮耐克)可在創(chuàng)面上形成一
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