香椿葉的化學(xué)成分研究及黃酮類化合物的分析.pdf

1、香椿葉是一味應(yīng)用歷史悠久的中草藥，具有清熱解毒、去濕等作用。近年來，國內(nèi)外對香椿葉的生物活性、物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理等進(jìn)行了初步探索，為本文奠定了較好的基礎(chǔ)。在本論文中，主要圍繞以下四個方面開展了研究工作：
　　（1）香椿葉多酚類化學(xué)成分的分離和鑒定
　　采用液液萃取、柱色譜等分離和純化香椿葉的化學(xué)成分，并利用理化檢測和紫外光譜、電噴霧質(zhì)譜（負(fù)離子模式）、1H-NMR和13C-NMR等技術(shù)鑒定所得化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。從香椿葉中分離

2、得到了6個多酚類化學(xué)成分，分別鑒定為：鄰苯二甲酸二丁酯（1）、1,2,3,6-四-O-沒食子酸-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、1,2,3,4,6-五-O-沒食子酸-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、（-）-表沒食子兒茶素沒食子酸酯（4）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（6）、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）和山奈酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（8）?；衔?和4為首次從香椿中分離得到

3、，其中化合物4則為首次從香椿屬植物中分離得到。
　　（2）香椿葉總黃酮的含量測定
　　以蘆丁為對照品，建立了鋁鹽荷移UV法測定香椿葉中總黃酮的方法。結(jié)果表明，蘆丁在4.05~50.6μg/mL之間其濃度與吸光度之間線性關(guān)系良好，該方法的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、重復(fù)性良好，平均回收率達(dá)到97.27％，適用于香椿葉中總黃酮的含量測定。此外，考察了不同產(chǎn)地和采收時間所得香椿葉中總黃酮的含量，不同采收時間的香椿葉中總黃酮含量存在較大差異，4

4、月至6月是一年中香椿葉中總黃酮含量較高的時間段；而就產(chǎn)地而言，山東煙臺產(chǎn)香椿葉中總黃酮的含量最高，山東鄆城的則為最低。
　?。?）香椿葉總黃酮的提取工藝研究
　　采用乙醇水浴加熱回流的方法提取香椿葉中總黃酮，并對提取工藝進(jìn)行正交優(yōu)化，據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，總黃酮的最佳提取工藝為：按照1:30的比例加入70%乙醇，80oC下加熱回流1.5 hrs，提取兩次。在此條件下香椿葉總黃酮得率為3.356%，利用D101大孔吸附樹脂純化后總黃

5、酮得率達(dá)到90.866%。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)考察優(yōu)化而得出的工藝經(jīng)濟(jì)簡單，安全環(huán)保，提取率高，適合工業(yè)化應(yīng)用。
　?。?）4種黃酮醇苷的含量測定及不同產(chǎn)地香椿葉的聚類分析
　　選擇了香椿葉中4個主要黃酮醇苷，包括蘆丁（I）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（II）、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷（III）、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷（IV），并對提取方法與色譜分析條件進(jìn)行了優(yōu)化。采用XBridge Shield RP18（4.

6、6 mm×150 mm，3.5μm）色譜柱；進(jìn)樣量為10μL；以0.3%三氟乙酸水溶液（A）-0.1%三氟乙酸乙腈溶液（B）為流動相；流速為1.0 mL/min；梯度洗脫程序?yàn)?~20 min， A由85%降至80%，20~31 min，A由80%降至70%；柱溫保持在35oC；紫外檢測波長設(shè)定為254 nm。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化合物I、II、III和IV分別在1.038~66.4、1.147~73.4、2.566~164.2、1.691~10

7、8.2μg范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r2分別為0.9994、0.9996、0.9995、0.9990；精密度處于0.13%~1.76%（n=6），重復(fù)性RSD<5%（n=6），所制備的樣品溶液在48 hrs內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定；平均加樣回收率為96.01%~108.53%（n=3），RSD<5%。測定了11個產(chǎn)地香椿葉（A~J）中4種黃酮醇苷的含量，其中化合物 I的含量介于0.007%~0.200%；化合物 II的含量介于0.026%