維生素K2對骨質(zhì)疏松大鼠Ⅰ型膠原影響的實驗研究.pdf

1、研究背景:隨著人類老齡化的發(fā)展，骨質(zhì)疏松癥患者日益增多。女性絕經(jīng)后由于激素水平顯著下降，骨丟失加速，從而成為骨質(zhì)疏松和骨質(zhì)疏松性骨折的高危人群。在骨質(zhì)疏松的發(fā)生和發(fā)展過程中，Ⅰ型膠原扮演著非常重要的角色，目前也越來越引起人們的重視。維生素K2自1960年被發(fā)現(xiàn)對骨折愈合有一定作用后，逐漸成為了骨質(zhì)疏松的治療用藥，但其對骨代謝影響尤其是骨膠原的影響機制研究較少。
　　目的:觀察維生素K2對去卵巢大鼠Ⅰ型膠原代謝指標的變化，電鏡下觀察

2、骨膠原形態(tài)學改變，以及生物力學的改變，從Ⅰ型膠原方面探討維生素K2對骨質(zhì)疏松預防和治療作用。
　　方法:將60只成年雌性SD大鼠隨機分為維生素K2組（VitK2組）20只，卵巢摘除組（OVX組），對照組（SHAM組）20只。VitK組與OVX組行手術(shù)去勢，摘除雙側(cè)卵巢。常規(guī)分籠飼養(yǎng)12周后， VitK2組給予四烯甲萘醌，喂養(yǎng)八周后處死大鼠，采用ELISA法檢測血Ⅰ型前膠原氨基端前肽(PINP)值、血Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTX)值

3、。取松質(zhì)骨染色制片后，光鏡下觀察骨組織結(jié)構(gòu)變化以及骨膠原形態(tài)。取大鼠左股骨遠三分之一段，沿冠狀面正中鋸開，經(jīng)固定、沖洗、脫水、干燥、噴金后制成電鏡觀察標本后，在掃描電鏡下觀察骨小梁以及膠原的分布情況。取大鼠脛骨干骺端，通過免疫蛋白印跡法分別檢測大鼠骨組織中Ⅰ型膠原蛋白含量。取大鼠右側(cè)股骨，在電子萬能材料試驗機上進行力學實驗，分析骨的生物力學性能。
　　結(jié)果:卵巢摘除組光鏡下HE染色見骨小梁稀疏，斷裂，Masson染色見膠原纖維排列

4、稀疏紊亂，變細甚至斷裂溶解，連續(xù)性差，股骨生物力學測定屈服點載荷（99.4±10.2N），NTX明顯升高，PINP無明顯變化，電鏡觀察見膠原纖維排列紊亂、零散，結(jié)構(gòu)松散、斷裂，被破壞的骨膠原失去正常形態(tài)，免疫蛋白印跡見Ⅰ型膠原蛋白含量表達減少。維生素K2組HE染色下骨小梁致密，Masson染色見膠原纖維排列規(guī)則，走向清晰，連續(xù)性好，股骨生物力學測定屈服點載荷（120.8±14.7N），NTX明顯降低，PINP稍有升高，電鏡觀察見膠原纖維