高壓氧聯(lián)合氫水用于胸部戰(zhàn)創(chuàng)傷后嚴重肺損傷治療的基礎研究.pdf

1、1、研究目的：
　　肺損傷是胸部戰(zhàn)創(chuàng)傷中最嚴重的損傷之一，治療方法有限。高壓氧治療可以迅速增加動脈血氧含量、提高PaO2，迅速改善各器官組織缺氧，減少酸性代謝產物，恢復各器官功能。氫氣是一種優(yōu)質的抗氧化物質，近幾年，關于氫氣的抗氧化、抗炎癥反應的研究逐漸成為熱點。目前文獻無兩者聯(lián)合治療肺損傷的研究報道。本研究基于以上的理論基礎和文獻參考，探討兩者聯(lián)合用于戰(zhàn)創(chuàng)性急性肺損傷治療的可行性，并探討相應的干預措施。查閱相關文獻和多次實驗發(fā)現(xiàn)

2、，胸部創(chuàng)傷模型變量多，對實驗結果產生較大偏差，因此我們利用成熟的呼吸道吸入脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）技術制造出嚴重肺損傷模型，利用該模型模擬胸部創(chuàng)傷后急性肺損傷。建模成功后，通過給大鼠單獨注射氫氣飽和生理鹽水溶液、單獨高壓氧治療以及聯(lián)合兩者治療的方法，觀察肺組織病理改變及炎細胞浸潤情況，測定血清及肺組織中的炎性因子水平、肺組織細胞凋亡率改變及肺組織中抗氧化酶水平變化。通過以上指標的觀察，以確定飽和氫水聯(lián)合高壓

3、氧對于肺損傷的作用，明確氫水聯(lián)合高壓氧治療對嚴重肺損傷的治療意義，為臨床肺損傷治療方法的建立提供理論依據。
　　2、研究方法：
　　成年雄性Sprague-Dawlay大鼠40只，體重約為(240±10)g，隨機分成5組（n=8/組），分別為對照組（sham組）、LPS組、LPS組+高壓氧組(LPS+O2組)、LPS組+飽和氫水組(LP S+H2)組、LPS組+高壓氧+飽和氫水組(LPS+O2+H2)組，每組8只。Sham組

4、氣管內注射與實驗組同等劑量的生理鹽水，正常飼養(yǎng);LPS組按體重3mg/kg氣管內注射LPS試劑制造肺損傷模型，建模成功后正常飼養(yǎng);LPS+O2組在建模后1小時給予2.5ATA純氧治療120分鐘，每12小時治療一次，連續(xù)治療3天;LPS+H2組在建模成功后1小時，大鼠按體重5ml/kg腹腔內注射飽和氫水，每12小時后重復腹腔給藥一次，連續(xù)治療3天;LPS+O2+H2組在建模1小時后，先給予飽和氫水5ml/kg腹腔注射，然后立即把實驗動物放

5、入高壓艙給予2.5ATA純氧加壓治療120分鐘，每12小時給予腹腔注射飽和氫水和高壓氧治療，3日后取標本。比較肺組織濕干重比，檢測各組大鼠血清、肺組織和肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平，檢測血清和肺組織中MDA含量和SOD活性，TUNEL法測量肺組織內細胞凋亡情況，光鏡下觀察肺組織病理改變，計算凋亡指數。
　　3、研究結果:
　　(1)大鼠肺濕干重比:和LPS組肺組織濕/干比相比，LPS+O2組、LPS+H2

6、組、LPS+O2+H2組的肺組織濕/干比降低，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，LPS+O2組、LPS+H2組、LPS+O2+H2組之間比較沒有統(tǒng)計學差異。
　　(2)病理觀察:sham組大鼠肺泡腔結構完整、均一，四壁光滑，未見腔內有紅白細胞浸潤。LPS組可見大鼠肺泡結構破壞，肺間質增厚明顯，間質內見大量白細胞，肺泡腔內可見出血及白細胞浸潤。LPS+O2組和LPS+H2組肺泡壁增厚，肺泡及間質亦可見白細胞浸潤，病理評分低于LPS組。

7、LPS+O2+H2組與LPS+O2組、LPS+H2組之間病理評分無統(tǒng)計學差異。
　　(3)肺組織勻漿中MDA含量:LPS+O2組、LPS+H2組、LPS+O2+H2組中MDA含量低于LPS組(P＜0.05)，但各組之間無差異。肺組織中SOD活力:LPS+O2組、LPS+H2組、LPS+O2+H2組活性大于LPS組(P＜0.05)，低于sham組(P＜0.05)。
　　(4)肺組織及血清中TNF-α、IL-1β、IL-6檢測:

8、IL-1β在肺組織及血清中LPS+O2組、LPS+H2組、LPS+O2+H2組中均低于LPS組(P＜0.05)。TNF-α、IL-6在肺組織及血清中差異不明顯，可能與取材時間有關。
　　(5)肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β含量:LPS+O2組、LPS+H2組、LPS+O2+H2組中含量低于LPS組(P＜0.05)，高壓氧和氫水組、氫氧聯(lián)合組之間無統(tǒng)計學差異。
　　(6)細胞凋亡:LPS組和sham組有明顯統(tǒng)計學差異(P＜

9、0.0001)，單用氫水、單用高壓氧、氫氧聯(lián)合均與LPS組存在顯著差異(P＜0.05);LPS+H2與LPS+H2+O2亦有顯著差異(P=0.0012＜0.05)，可見氫水聯(lián)合高壓氧治療對減少細胞凋亡具有協(xié)同作用。
　　4、結論：
　　1、富氫鹽水可通過減少致炎因子，促進抗氧化酶活性，降低肺組織氧化應激，減少肺細胞凋亡，對LPS導致的急性肺損傷起到保護作用。
　　2、高壓氧可通過減輕肺組織炎性物質的釋放，減少氧化產物的