青蒿琥酯對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷的干預(yù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討青蒿琥酯(Art)是否可以抑制高糖誘導(dǎo)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK-52E)凋亡及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：傳代培養(yǎng)NRK-52E細(xì)胞，分為6組:正常對(duì)照組、高糖組、Art小劑量組、Art中劑量組、Art高劑量組、依那普利組。培養(yǎng)48 h后，四甲基偶氮唑鹽微量比色(MTT)法觀察細(xì)胞增殖能力的改變;流式細(xì)胞儀AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù);酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子

2、-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-8(IL-8)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)蛋白含量;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)細(xì)胞Toll樣受體4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB) mRNA含量;蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)法檢測(cè)細(xì)胞TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：①與正常對(duì)照組相比，高糖組NRK-52E細(xì)胞增殖抑制，細(xì)胞凋亡率增高，細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-8和MCP-1蛋白濃度升高

3、，細(xì)胞中TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯升高(P＜0.05)。②與高糖組比較，Art小、中、高劑量組NRK-52E細(xì)胞增殖明顯，細(xì)胞凋亡率減低，細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-8和MCP-1蛋白濃度降低，細(xì)胞中TLR4、NF-κ BmRNA和蛋白表達(dá)水平明顯降低，且干預(yù)作用呈劑量依賴性（P＜0.05）。
　　結(jié)論：Art可抑制高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與Art抑制TLR4/NF-κB信號(hào)通路，下調(diào)TLR