促紅細(xì)胞生成素對(duì)心臟移植大鼠心肌損傷的影響及與PKC通路的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　研究促紅細(xì)胞生成素（EPO）對(duì)心臟移植后心肌損傷的影響及其與PKC通路的關(guān)系研究。
　　方法：
　　通過同系大鼠心臟移植來建立心肌缺血再灌注損傷模型，實(shí)驗(yàn)分為兩批（5天、10天），每批將SD雄性成年大鼠分成5組：假手術(shù)組（A組）；單純心臟移植空白對(duì)照組（B組）；心臟移植+EPO治療組（C組）；心臟移植+EPO治療+PKC抑制劑組（D組）；心臟移植+EPO+PKC激動(dòng)劑組（E組）。第一批術(shù)后第5天，第二批術(shù)后

2、第10天處死各組大鼠，各組標(biāo)本進(jìn)行HE染色，觀察組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)損害及細(xì)胞浸潤程度，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組心肌組織中EGFR蛋白表達(dá)水平，蛋白免疫印跡雜交法（Western Blot）檢測(cè)磷酸化PKC及PLC-γ1，特殊試劑盒檢測(cè)組織MDA、ATP酶、GSH-Px、鈣離子水平。
　　結(jié)果：
　　1. HE染色結(jié)果：A組心肌結(jié)構(gòu)完整，排列緊密，無異常改變；B組，5天時(shí)的心肌結(jié)構(gòu)排列疏松、炎細(xì)胞浸潤明顯、組織有出血，10天時(shí)的心

3、肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)更加紊亂疏松、炎癥浸潤程度顯著、組織出血更明顯，有明顯結(jié)構(gòu)破壞；C組，5天時(shí)有少量炎癥細(xì)胞浸潤、結(jié)構(gòu)尚完整、有少量組織出血，10天時(shí)心肌組織基本趨于正常、結(jié)構(gòu)緊密、無顯著細(xì)胞浸潤；D組，5天時(shí)心肌結(jié)構(gòu)尚完整、細(xì)胞間隙稍增大、有明顯組織出血，10天時(shí)心肌結(jié)構(gòu)明顯疏松紊亂、大量炎癥細(xì)胞浸潤；E組，5天時(shí)心肌組織有少量炎癥細(xì)胞浸潤、結(jié)構(gòu)尚完整，10天時(shí)心肌組織結(jié)構(gòu)完整緊密，無顯著炎癥細(xì)胞浸潤；
　　2.心肌組織MDA水平：（1

4、）5天各組中，A組明顯低于B、C、D、E組（P<0.05）；B組高于C、D、E組（P<0.05）； C組低于D組（P<0.05），高于E組（P<0.05）；（2）10天各組中，A組低于B、D組（P<0.05），A、C、E組三組間比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；C、E組低于B組（P<0.05），B、D組間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；5天與10天各個(gè)對(duì)應(yīng)組，除A組無明顯差異外，其余各組比較均差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）

5、，并且均為10天各組結(jié)果低于5天各組；
　　3.各組GSH-Px結(jié)果比較：5天時(shí)，A組高于B組（P﹤0.05），低于C、D、E組（P﹤0.05）；B組低于C、D、E組（P﹤0.05）；C組高于D但是低于E組（P﹤0.05）；10天各組中，各組GSH-Px表達(dá)水平變化和5天各組相似；5天與10天相對(duì)應(yīng)各組比較，除假手術(shù)組無明顯差異外，其余各組差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；
　　4.各組ATP酶變化：兩批結(jié)果類似，其中

6、A組低于C、E組（P<0.05），但是高于B組（P<0.05），A、D組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；其中C組高于D組，但是低于E組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；
　　5.免疫組化EGFR表達(dá)水平比較：5天與10天結(jié)果相似，A組低于B、C、D、E組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；B組低于C、D、E組（P<0.05）；C、D、E組相互比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；其中5天與10天相應(yīng)組比較，除假手術(shù)組及單

7、純移植組無明顯差異外，其余各組均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；
　　6. Western Blot比較PLC-γ1表達(dá)差異：5天與10天結(jié)果相似，A組低于B、C、D、E組（P<0.05）；B組低于C、D、E組（P<0.05）；C、D、E組相互比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；5天和10天各個(gè)對(duì)應(yīng)組比較，除假手術(shù)組無差異外，其余均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；
　　7.心肌組織磷酸化PKC表達(dá)水平比較：（1）5天各組中

8、，A組低于C、E組（P<0.05），高于B組（P<0.05），與D組相比無明顯差異（P>0.05）；C組高于D組（P<0.05），而低于E組（P<0.05）；（2）10天各組中，A組低于C、E組（P<0.05），高于D組（P<0.05），與B組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；B組低于C、E組（P<0.05），與D組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；C組高于D組（P<0.05），但是低于E組（P<0.05）；
　　8.心肌組織