K562細胞外泌體抑制骨髓間充質(zhì)干細胞黏附功能的實驗研究.pdf

1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：416523112097南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文K562K562細胞外泌體抑制骨髓間充質(zhì)干細胞黏附功能的細胞外泌體抑制骨髓間充質(zhì)干細胞黏附功能的實驗研究實驗研究K562cellderivedexosomessuppresstheadhesivefunctionofbonemarrowmesenchymalstemcells林晉培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：王小中教授專業(yè)學(xué)位

2、種類：臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)領(lǐng)域名稱：臨床檢驗診斷學(xué)論文答辯時間：2015年6月答辯委員會主席：評閱人：2015年6月摘要II摘要背景背景：慢性粒細胞白血病(chronicmyeloidleukemia，CML)是一類造血干細胞增殖異常的獲得性惡性血液腫瘤，其病因是融合基因BCRABL編碼的融合蛋白P210具有強烈酪氨酸激酶活性，引發(fā)造血細胞惡性轉(zhuǎn)化。CML是一種相對少見的惡性腫瘤，大約占所有癌癥的0.3%，占成人白血病的20%。根據(jù)骨髓中白血病

3、細胞的數(shù)量和癥狀的嚴重程度，可將CML分為三個期：慢性期、加速期和急變期。CML進展緩慢，但隨著時間推移病程逐漸出現(xiàn)進展表現(xiàn)，大量CML細胞進入外周血并浸潤髓外臟器。究其原因，主要是骨髓微環(huán)境（microenvironment）的黏附功能降低，未成熟造血細胞得以穿越髓血屏障而逃逸。目前，唯一可能徹底治愈CML的方法是異基因造血干細胞移植，近來研究發(fā)現(xiàn)，正常造血干細胞植入CML患者后其歸巢、黏附、定植于骨髓微環(huán)境的能力不足，是移植治療失敗

4、的重要原因，進一步說明CML骨髓微環(huán)境的黏附功能存在缺陷。外泌體是一類直徑為30120nm的有膜囊泡，可由多種細胞分泌釋放入體內(nèi)，攜帶有蛋白、核酸等生物活性分子，能在細胞間信號傳遞、信息交流中發(fā)揮一定作用。因此，本研究主要從CML細胞釋放的外泌體對骨髓微環(huán)境黏附功能的影響來闡述CML的進展機制，為深入理解疾病進展及提高療效提供新的研究方向。目的目的：探討CML細胞K562分泌的外泌體對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bonemarrowmesen

5、chymalstemcells，BMSCs)黏附功能的影響，為慢性粒細胞白血病的疾病進展機制提供新的思路。方法方法：提取K562細胞外泌體及分離培養(yǎng)小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs），將外泌體與BMSCs細胞共培養(yǎng)后，檢測BMSCs細胞黏附人臍血單個核細胞的能力，通過westernblot與RTPCR技術(shù)檢測BMSCs細胞黏附相關(guān)分子CD44與CXCL12的表達，最后利用芯片分析和qRTPCR技術(shù)檢測外泌體miR711的表達。結(jié)果結(jié)果：