耐堿性木聚糖酶生產(chǎn)菌株ZCF58的誘變及其creA基因的克隆與敲除.pdf

1、木聚糖(Xylan)是一類分子結(jié)構(gòu)變化范圍很大的多糖,其主鏈由D-木糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成,側(cè)鏈?zhǔn)怯稍S多短的取代基組成。它是自然界中僅次于纖維素的一類多糖,分布廣泛,是一種重要的可再生資源。木聚糖酶是人類利用木聚糖的重要工具,它在造紙、食品、飼料、生物質(zhì)轉(zhuǎn)化以及果汁、酒類、咖啡、香料和色素生產(chǎn)等方面有著廣泛的應(yīng)用前景,已經(jīng)引起越來越多研究者的重視。目前在木聚糖酶應(yīng)用時仍存在木聚糖酶活力低、真菌木聚糖酶耐堿性較差等問題,大大阻礙了

2、其在工業(yè)化生產(chǎn)中的應(yīng)用。鑒于上述原因,篩選耐堿性高產(chǎn)木聚糖酶的菌株一直是相關(guān)行業(yè)一個重要的研究方向。
　　本文以實驗室篩選的菌株ZCF58為出發(fā)菌株,其產(chǎn)生的木聚糖酶最適pH為7.0,酶活力為272.7 IU/mL,具有潛在的應(yīng)用價值。本論文通過硫酸二乙酯和甲基磺酸乙酯誘變處理后,篩選到了一株木聚糖酶活力較高的突變株1-35-2,傳代5次后產(chǎn)酶能力仍然穩(wěn)定性良好,生產(chǎn)的木聚糖酶活力較出發(fā)株提高了19.8%。
　　常壓室溫等離

3、子體誘變技術(shù)是近年來發(fā)展起來的一種新型誘變技術(shù),本文以獲得誘變高效菌株為研究目的,采用等離子體誘變結(jié)合透明圈篩選方法,獲得了遺傳性狀穩(wěn)定的優(yōu)勢菌株L-9-L-10,其木聚糖酶活力較出發(fā)株提高了46.1%。采用該突變株生產(chǎn)的木聚糖酶的粗酶液對預(yù)處理的玉米芯進(jìn)行酶解實驗,結(jié)果表明:該酶液具有一定的內(nèi)切木聚糖酶活力,且木糖苷酶活力較低,可用于生產(chǎn)低聚木糖。
　　CRE蛋白是在酵母和絲狀真菌中普遍存在的一種碳源代謝抑制因子。人們發(fā)現(xiàn)瑞氏木