臨床血細(xì)胞膜脂肪酸譜檢測(cè)方法研究.pdf

1、測(cè)定生物體內(nèi)脂肪酸含量一直是臨床研究以及脂質(zhì)組學(xué)研究的重點(diǎn)。脂肪酸在人體內(nèi)存在游離態(tài)與非游離態(tài)兩種形式，而且碳鏈長(zhǎng)度由八個(gè)碳到二十六個(gè)碳，這其中又存在大量的順反異構(gòu)體，這都給全面檢測(cè)脂肪酸含量增加了難度。血清中脂肪酸含量被認(rèn)為可以反映短期內(nèi)脂肪酸代謝狀況，而研究者也報(bào)道了紅細(xì)胞膜上的脂肪酸含量更能反映人體內(nèi)長(zhǎng)期脂肪酸代謝狀況。但白細(xì)胞膜上的脂肪酸與血小板膜上的脂肪酸含量以及代謝狀況分析卻未見報(bào)道。本論文從血細(xì)胞分離出發(fā)，建立了一整套檢測(cè)

2、細(xì)胞膜脂肪酸含量的方法，并對(duì)44位健康志愿者的血樣進(jìn)行了血細(xì)胞膜脂肪酸含量分析。具體結(jié)論如下:
　　1、在Ficoll梯度密度離心分離法的基礎(chǔ)上，建立了血細(xì)胞分離方法。血細(xì)胞分離效果好，通過加入羥乙基淀粉，HEPES等試劑，優(yōu)化了分離步驟，解決了分離出的白細(xì)胞與血小板中紅細(xì)胞污染的問題。
　　2、比較了TG-WAX色譜柱與SP-2560色譜柱兩種極性色譜柱對(duì)復(fù)雜脂肪酸甲酯組分分離能力，結(jié)果顯示，利用TG-WAX色譜柱分離脂肪

3、酸甲酯時(shí)，幾種順反異構(gòu)體不能有效分離。但TG-WAX色譜柱的柱長(zhǎng)短，當(dāng)分析組分不復(fù)雜時(shí)，利用其進(jìn)行檢測(cè)工作可以縮短分析時(shí)間。SP-2560色譜柱對(duì)復(fù)雜脂肪酸甲酯組分的分離效果較好，滿足本論文分離要求。本論文應(yīng)用SP-2560色譜柱進(jìn)行了一系列檢測(cè)方法學(xué)驗(yàn)證工作，保證檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性。同時(shí)對(duì)衍生方法也進(jìn)行了準(zhǔn)確性，溫度性考察。
　　3、對(duì)來自北京，長(zhǎng)沙兩地的健康志愿者進(jìn)行脂肪酸檢測(cè)分析，總結(jié)了健康27種人紅細(xì)胞膜，白細(xì)胞膜，血小板膜