激光共聚焦顯微鏡

1、1. 論述激光共聚焦顯微鏡的工作原理，并分析其與普通顯微鏡的區(qū)別？激光共聚焦顯微鏡的工作原理 激光共聚焦顯微鏡的工作原理1）用激光做光源因?yàn)榧す獾膯紊苑浅：?，光源波束?波長(zhǎng)相同，從根本上消除了色差。采用點(diǎn)光源照射標(biāo)本，在焦平面上形成一個(gè)輪廓分明的小的光點(diǎn)，該點(diǎn)被照射后發(fā)出的熒光被物鏡收集，并沿原照射光路回送到由雙向色鏡構(gòu)成的分光器。分光器將熒光直接送到探測(cè)器。2）采用共聚焦技術(shù)光源和探測(cè)器前方都各有一個(gè)針孔（照明針孔和探測(cè)針孔） 。

2、直徑約 100-200nm；相對(duì)于焦平面上的光點(diǎn)，兩者是共軛的，即光點(diǎn)通過(guò)一系列的透鏡，最終同時(shí)聚焦于照明針孔和探測(cè)針孔。這樣，來(lái)自焦平面的光，可以會(huì)聚在探測(cè)孔范圍之內(nèi)，而來(lái)自焦平面上方或下方的散射光都被擋在探測(cè)孔之外而不能成像。3）采用點(diǎn)掃描技術(shù)激光逐點(diǎn)掃描樣品，探測(cè)針孔后的光電倍增管也逐點(diǎn)獲得對(duì)應(yīng)光點(diǎn)的共聚焦圖像，轉(zhuǎn)為數(shù)字信號(hào)傳輸至計(jì)算機(jī)，最終在屏幕上聚合成清晰的整個(gè)焦平面的共聚焦圖像。4）用計(jì)算機(jī)采集和處理光信號(hào)，并利用光電倍增管