ws_t 799—2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測方法標準

1、 ICS 13.060 CCS C 51 WS 中 華 人 民 共 和 國 衛(wèi) 生 行 業(yè) 標 準 WS/T 799—2022 污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測方法標準 Method for enrichment and nucleic acid detection of SARS-CoV-2 in sewage 2022 - 03 - 24 發(fā)布 2022 - 03 - 24 實施 中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會 發(fā) 布

2、 WS/T 799—2022 1 污水中新型冠狀病毒富集濃縮 和核酸檢測方法標準 1 范圍 本標準規(guī)定了污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測方法。 本標準適用于生活污水、醫(yī)療機構污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本標準必不可少的條款。 其中， 注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本標準；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本 標準。 GB/T

3、 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法 WS/T 697 新冠肺炎疫情期間特定人群個人防護指南 3 術語和定義 下列術語和定義適用于本標準。 新型冠狀病毒 severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2 屬于β屬冠狀病毒，基因組為線性單股正鏈的RNA病毒，全長約30 kb，有包膜，呈圓形或橢圓形顆粒狀，直徑為60 nm～140 nm。 Ct 值 cycl

4、e threshold 在實時熒光定量PCR中，每個反應體系中的熒光信號達到設定的閾值時所經歷的循環(huán)數(shù)。 實時熒光反轉錄聚合酶鏈式反應 real-time fluorescent reverse transcription polymerase chain reaction 在反轉錄DNA聚合酶鏈式反應的擴增反應中加入熒光化學物質，通過對擴增反應中每一個循環(huán)產物熒光信號的實時檢測實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析方法。 4 檢出限

5、富集濃縮采用聚乙二醇沉淀法或鋁鹽混凝沉淀法時，方法檢出限為10 copies/mL；富集濃縮采用離心超濾法時，方法檢出限為100 copies/mL。 5 水樣的采集、運輸及保存 根據(jù)采樣場所排水系統(tǒng)分布情況， 重點選取污水排水口、 內部管網匯集處等關鍵位置對未經消殺處理的污水進行采樣。用無菌聚乙烯瓶采集污水樣本，采樣體積為300 mL。可根據(jù)現(xiàn)場條件和檢測需求確 定水樣采集方式，如瞬時水樣（采樣點位某一時間隨機采集的樣本）或混合水樣（

6、同一采樣點位不同時 間所采集的瞬時水樣混合后的樣本）。樣本采集后應在現(xiàn)場使用75 %酒精對采樣瓶外表面進行消毒，然 后將采樣瓶裝入密封采樣袋中，對密封采樣袋外表面再次進行消毒， 并盡快將樣本送至實驗室，運輸過程中確保0 ℃～4 ℃條件下冷藏運輸。到達實驗室后樣本同樣應保存于0 ℃～4 ℃環(huán)境中，實驗室應在 接到樣本后24 h內進行富集濃縮處理，并在富集濃縮后24 h內完成核酸提取及實時熒光反轉錄聚合酶鏈 式反應（實時熒光RT-PCR）檢