雌激素加間斷孕激素對(duì)去卵巢大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松模型子宮及骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)的影響

1、【摘要】 目的 觀察雌激素(E)加間斷孕激素(P)對(duì)雙側(cè)卵巢切除(OVX)大鼠骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)的影響。 方法 35 只雌性大鼠隨機(jī)分成 5 組，每組 7 只。①假手術(shù) (Sham) 組、②卵巢切除 (OVX) 組、③卵巢切除加雌激素 (OVX+E) 組、④卵巢切除加孕激素 (OVX+P) 組、⑤卵巢切除加雌激素和孕激素 (OVX+E+P) 組。實(shí)驗(yàn) 10 w 后處死大鼠，稱取大鼠子宮和股骨濕重，并測(cè)定子宮內(nèi)膜厚度、骨密度，并對(duì)第 4

2、、5 腰椎進(jìn)行骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)分析。結(jié)果 與 Sham 組相比:OVX 組和 OVX+P 組體重和骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù) TbSp 和MAR 增加，子宮重量、股骨重量和 BMD 減少，子宮內(nèi)膜變薄，骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)BV/TV 和 TbTh 減少(P＜005)；而 OVX+E+P 組股骨重量、BMD、子宮重量、子宮內(nèi)膜厚度和骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù) BV/TV、TbTh 、TbSp 和 MAR 均無明顯差異(P＞005)。O

3、VX+E 組子宮重量明顯增加、子宮內(nèi)膜明顯增厚(P＜005)。 結(jié)論 單用孕激素不能阻止 OVX 導(dǎo)致的骨丟失；單用雌激素導(dǎo)致 OVX 鼠子宮重量增加和子宮內(nèi)膜增厚；雌激素加間斷孕激素能阻止 OVX 導(dǎo)致的骨丟失和體重增加,并可避免 OVX 和雌激素對(duì)子宮內(nèi)膜的不良作用；孕激素的間斷加入不影響雌激素對(duì) OVX 大鼠骨代謝的有利作用。 【關(guān)鍵詞】 骨質(zhì)疏松，絕經(jīng)后；去卵巢；雌激素；孕激素；骨組織形態(tài)學(xué)雌激素替代治療(ERT)來阻止絕經(jīng)

4、后骨質(zhì)疏松(PMO)的發(fā)生、發(fā)展，取得了一定的療效，但長期單純使用雌激素有一定的副作用，而孕激素可對(duì)抗雌激素的副作用。目前常用的 HRT 有序貫療法和持續(xù)療法，前者常伴周期性陰道出血，后者則可能導(dǎo)致子宮內(nèi)膜萎縮；并在最初使用的 6 個(gè)月內(nèi)易發(fā)生突破性陰道出血〔1〕 ，令病人難以接受，常不能堅(jiān)持用藥，因而達(dá)不到 HRT 的目的。本文對(duì)去勢(shì)大鼠股骨、子宮的檢測(cè)及第 4、5 腰椎進(jìn)行骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)分析，以探索一種比較合理的 HRT。1 材

5、料與方法11 材料 選取 3 月齡、體重(19929±1543)g 的 Wistar 雌鼠(中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供)35 只。隨機(jī)分成 5 組，每組 7 只。①假手術(shù) (Sham) 組、②卵巢切除 (OVX) 組、③卵巢切除加雌激素 (OVX+E) 組、④卵巢切除加孕激素 (OVX+P) 組、⑤卵巢切除加雌激素和孕激素 (OVX+E+P) 組。動(dòng)物條件一致，均在(22±2)℃室溫、燈光 12 h

6、交替、相對(duì)濕度 55%的屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)，給予標(biāo)準(zhǔn)全價(jià)顆粒飼料喂養(yǎng)。12 實(shí)驗(yàn)藥物 雌激素選用苯甲酸雌二醇注射液，1 ㎎/支 (上海第九制藥廠生產(chǎn))，每 3 d 皮下注射 1 次，每次注射 35 μg/kg。孕激素選用黃體酮注射液，20 ㎎/支，(浙江仙居制藥股份有限公司生產(chǎn))，皮下注射 3 d(每天 1 次，每次 1 ㎎/㎏),停用 3 d。骨標(biāo)記物選用鹽酸四環(huán)素(TH)250 ㎎/支(上海華美公司生產(chǎn))，按 30 mg/Kg 每

7、天分 2 次灌胃，在處死動(dòng)物前 15 d 連續(xù)使用 2 d，進(jìn)行第 1 次標(biāo)記；停藥 9 d 后(即處死大鼠前第 4 天)，進(jìn)行第 2 次標(biāo)記，方法同前。13 方法131 建立模型 將大鼠以 1%硫噴妥鈉 40㎎/㎏腹腔注射麻醉，無菌條件下，經(jīng)腰部正中縱切口進(jìn)入腹腔背側(cè)，將②～⑤組大鼠雙側(cè)卵巢切除，①組僅行開關(guān)術(shù)。術(shù)后正常攝食水。1 w 后③～⑤組開始用藥，且給藥劑量每周按體重校正 1 次，10 w 后處死全部大鼠。OV

8、X+P 組股骨重量減輕，同時(shí) BMD 減少(P＜005)；而 OVX+E 組和 OVX+E+P 組股骨重量和 BMD 無明顯差異(P＞005)。與 OVX 組相比：OVX+E 組和 OVX+E+P 組股骨重量和 BMD 明顯增加(P＜005)；而 OVX+P 組則無明顯差異(P＞005)。表 1 各組大鼠體重及股骨重量、BMD 的比較（略）Sham 組相比：1)P＜005，2)P＜001；與 OVX 組相比：3)P＜00

9、5；表 2 同23 各組大鼠實(shí)驗(yàn)后子宮重量和子宮內(nèi)膜厚度的對(duì)比 實(shí)驗(yàn) 10 w 后，與 Sham 組相比：OVX 組和 OVX+P 組子宮重量明顯減少、子宮內(nèi)膜明顯變薄(P＜005)；OVX+E 組子宮重量明顯增加、子宮內(nèi)膜明顯增厚(P＜005)；而 OVX+E+P 組則無顯著性差異(P＞005)。見表 2。表 2 實(shí)驗(yàn)后各組大鼠子宮重量和子宮內(nèi)膜厚度的對(duì)比（略）24 各組大鼠骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)比較 表 3 中可見

10、，與 Sham 組相比：OVX 組和 OVX+P 組骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù) BV/TV 和 TbTh 減少，TbSp 和 MR 增加 (P＜005)；而 OVX+E 組和 OVX+E+P 組骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù) BV/TV、TbTh、TbSp 和MR 均無明顯差異(P＞005)。與 OVX 組相比：OVX+E 組和 OVX+E+P 組骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù) BV/TV 和 TbTh 明顯增加，TbSp 和 MR 明顯減少 (

11、P＜005)；而 OVX+P組骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù) BV/TV、TbTh 、TbSp 和 MR 均無明顯差異(P＞005)。表 3 各組大鼠骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)比較（略）與 Sham 組相比：1)P＜001；與 OVX 組相比：2)P＜005，3)P＜0013 討論31 OVX 導(dǎo)致體重增加、骨丟失、子宮內(nèi)膜萎縮 實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠體重?zé)o差異，實(shí)驗(yàn) 10 w 后 OVX 組大鼠體重明顯增加，盡管這種改變可部分抑制

12、 OVX 導(dǎo)致的骨丟失〔5〕 ，但與 Sham 組相比，其股骨重量和 BMD 都明顯減少，其骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)BV/TV 和 TbTh 明顯減少、TbSp 和 MR 明顯增加，說明 OVX 導(dǎo)致骨形成率增加，但由于破骨細(xì)胞骨吸收活性加強(qiáng)，骨吸收大于骨形成，所以表現(xiàn)為骨小梁體積減少，厚度降低，間隙增加，從而骨量減少(見表 3)；同時(shí)顯示，不同藥物的攝入導(dǎo)致的骨代謝改變與這些動(dòng)物的體重改變無直接關(guān)系(見表 1)。與 Sham 組相比，

13、OVX 組大鼠子宮重量減少、子宮內(nèi)膜變薄，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明 OVX 導(dǎo)致子宮內(nèi)膜萎縮，與臨床資料一致。32 ERT 預(yù)防 OVX 的骨丟失 雌激素缺乏是 PMO 發(fā)病的主要原因，其詳細(xì)機(jī)制尚未完全闡明，但已知雌激素通過多種途徑參與骨代謝，雌激素可抑制骨吸收，減少骨丟失。1987 年 Eriksen 等〔4〕首次證實(shí)，成骨細(xì)胞上存在著雌激素受體，雌激素可直接調(diào)節(jié)骨代謝。近年來的研究表明，破骨細(xì)胞也是雌激素的靶細(xì)胞〔5〕 ，