尿液exosomes的分離、富集、純化及其內(nèi)部蛋白指紋圖譜分析

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 1 級(jí)博士學(xué)位論文尿液e x o s o m e s 的分離、富集、純化及其內(nèi)部蛋白指紋圖譜分析U r i n a r yE x o s o m e s E n r i c h m e n t ，P u r i f i c a t i o n ，a n d t h eI n t e r n a lP r o t e o m e P r o f i l e A n a l y s i s課題來(lái)源： 導(dǎo)師指定課題學(xué)位

2、申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院劉新宇鄒和群內(nèi)科學(xué)( 腎病)在職博士博士研究生研究生學(xué)院2 0 15 年0 3 月2 0 日萬(wàn)方數(shù)據(jù)中文摘要目前也有不少關(guān)于對(duì)血液、尿液、唾液等e x o s o m e s 的研究發(fā)現(xiàn)了多種疾病的生物標(biāo)記物，有望對(duì)指導(dǎo)疾病的早期與個(gè)體化治療帶來(lái)新的希望。2 0 0 4 年，P i s i t k u n 等首先報(bào)道在尿液中發(fā)現(xiàn)并分離出e x o s o m e s 。人體尿液中含有大量的e

3、 x o s o m e s ，其可以由泌尿系統(tǒng)( 包括腎臟、膀胱、前列腺) 的所有上皮細(xì)胞釋放進(jìn)入尿液。尿液e x o s o e m s 與其它類型的e x o s o m e s 一樣，攜帶大量來(lái)源細(xì)胞的信息，十分有利于探索特定細(xì)胞的生理功能與病理變化。通過(guò)蛋白組學(xué)等方法人們已經(jīng)在分離出的正常人尿液e x o s o m e s 中鑒定出超過(guò)1 0 0 0種蛋白質(zhì)。尿液相對(duì)于其它體液具有無(wú)創(chuàng)、人量的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)，對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病的早期診

4、斷生物標(biāo)記物、治療和監(jiān)測(cè)的靶點(diǎn)以及疾病的發(fā)病機(jī)制等研究具有極大的意義。近年來(lái)的一些研究發(fā)現(xiàn)，尿液e x o s o m e s 蛋白譜的變化可以反映某些特定的腎臟病變情況。E x o s o m e s 可以攜帶信息穿梭于腎臟細(xì)胞之間，改變受體細(xì)胞蛋白譜與功能，這可能代表著一種’腎單位內(nèi)細(xì)胞與細(xì)胞間的信號(hào)傳遞機(jī)制。近年來(lái)結(jié)合尿e x o s o m e s 分離技術(shù)及先進(jìn)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已經(jīng)檢測(cè)出不少腎臟結(jié)構(gòu)與功能損害相關(guān)的尿e x o

5、 s o m e s 生物標(biāo)記物。尿液e x o s o m e s 的發(fā)現(xiàn)對(duì)糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制、早期診斷和監(jiān)測(cè)標(biāo)記物的研究帶來(lái)了新的方向。最近( 2 0 1 4 年) Z u b i r iI 等發(fā)表在《JP r o t r o m i c s ) ) 上的論文報(bào)道其在對(duì)糖尿病腎病患者尿液e x o s o m e s 質(zhì)譜分析結(jié)果，其首先比較了兩種目前常用的尿液e x o s o m e s分離富集方法，然后選擇較適宜的方法進(jìn)行液相

6、色譜．串聯(lián)質(zhì)譜( L C ．M S ／M S )分析。結(jié)果顯示A M B P 、M L L 3 、V D A C l 這三種蛋白在糖尿病l 腎病與正常組尿液e x s o m e s 中表達(dá)差異，可以作為糖尿病腎病早期診斷的備選生物標(biāo)記物。除上述研究外，還有尿e x o s o m e s 用于急性腎損傷、多囊腎、腎臟纖維化、膀胱癌等疾病的報(bào)道。尿液e x o s o m e s 給腎臟病等泌尿系統(tǒng)疾病的研究帶來(lái)了極大的前景，但目前還處