PM1降解MTBE的特異蛋白和藻菌混合新工藝的研究.pdf

1、MTBE（Methyl tert-Butyl Ether，甲基叔丁基醚）是一種添加劑，用以提高汽油的辛烷值和燃燒效率，但由于其強(qiáng)水溶性和難降解性，使其成為潛在的地下水污染物質(zhì)，而引起了世界各國(guó)的重視。 本文試圖通過(guò)考察MTBE降解菌株Methylibium petroleiphilum PM1（PM1）的全細(xì)胞蛋白差異，尋找MTBE降解途徑的特異蛋白。另外，試圖通過(guò)考察菌藻混合工藝對(duì)該菌降解MTBE效率的影響，尋求PM1高效降

2、解新工藝。 首先，考察了該菌以不同碳源底物（MTBE，TBA和丙酮）培養(yǎng)的全細(xì)胞蛋白SDS-PAGE電泳圖譜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以MTBE和TBA為底物培養(yǎng)的PM1菌全細(xì)胞蛋白電泳圖譜無(wú)明顯差別，而以丙酮為底物培養(yǎng)的PM1全細(xì)胞蛋白電泳圖譜與前兩者有明顯差異，分別在28 KD，42 KD以及66.2 KD處的有特異蛋白條帶。選取最明顯的差異條帶，即28 KD處蛋白條帶切割，并經(jīng)過(guò)水平電泳，透析，丙酮沉淀等步驟回收。利用銀染和雙向電泳檢測(cè)

3、，發(fā)現(xiàn)通過(guò)該方法能回收到較為單一的蛋白。通過(guò)肽質(zhì)量指紋譜鑒定后發(fā)現(xiàn)回收蛋白與弧菌的連接轉(zhuǎn)移蛋白最為接近。 考慮到PM1為好氧菌，氧氣的供給會(huì)對(duì)該菌降解MTBE起重要作用。故設(shè)計(jì)進(jìn)行了密閉系統(tǒng)中PM1菌與小球藻Chlorella ellipsoidea混合光照培養(yǎng)降解MTBE試驗(yàn)，混合培養(yǎng)系統(tǒng)中小球藻的光合作用可為PM1提供氧氣，而PM1降解MTBE最終產(chǎn)生CO2可為小球藻生長(zhǎng)提供碳源。結(jié)果顯示密閉光照培養(yǎng)系統(tǒng)中小球藻的存在確實(shí)