五分類血細胞分析儀的原理及使用

1、五分類血液分析儀原理及使用Hematologic Analyzers,血液分析儀,臨床血液一般檢查最常用儀器。50年代，美國庫爾特（W.H.Coulter）發(fā)明電子血細胞計數(shù)儀并申請專利。 1982 年，Technicon 公司生產(chǎn)了 H6000 型血液細胞，分析儀器，應(yīng)該是首款具有白細胞五分類能力的儀器。同時代日本日立公司推出圖像分析法的白細胞分析儀HITACHI 8200 型，僅僅是用于完成白細胞血片分類的儀器，沒有其

2、他血細胞計數(shù)分析能力。,血液分析儀優(yōu)勢檢測項目多 速度快 精度高 易操作,血液細胞分析儀是醫(yī)院檢驗科、化驗室的常規(guī)設(shè)備之一，也是發(fā)展最快、應(yīng)用最普及的檢驗儀器，當(dāng)前血液細胞分析儀分為三分群和五分類兩種。國際市場上五分類血液細胞分析儀已經(jīng)成為發(fā)達國家醫(yī)院血液臨床檢驗的主流產(chǎn)品，但由于五分類血液細胞分析儀需集光學(xué)、電子、氣路、液路、計算機等技術(shù)于一體，技術(shù)含量非常高，縱觀全球，也僅有美國、法國、日本等國家的 6 個廠家能

3、夠生產(chǎn)真正意義上的五分類血液細胞分析儀。2006年 4 月深圳邁瑞 BC-5500推出之前，由于國內(nèi)沒有掌握該類產(chǎn)品生產(chǎn)制造的核心技術(shù)，因而在中國市場銷售的該類產(chǎn)品由國外品牌所壟斷，價格都比較昂貴，導(dǎo)致該類產(chǎn)品不能在中國醫(yī)院臨床檢驗中大范圍推廣應(yīng)用，BC-5500 的推出推動了五分類血液細胞分析儀在國內(nèi)的臨床應(yīng)用，提高整個國內(nèi)血液細胞檢測的臨床應(yīng)用水平。,一、常見血細胞分析儀品牌,1、庫爾特2、希思美康3、邁瑞4、雅培5

4、、光電6、拜耳7、……,二、五分類血細胞分析儀的檢測原理,（一）、儀器基本結(jié)構(gòu)1、機械系統(tǒng) 2、電學(xué)系統(tǒng) 3、光學(xué)系統(tǒng),（二）、分類計數(shù)的基本原理,1、電阻抗的利用2、激光技術(shù)、射頻技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,血細胞五分類技術(shù)是一種綜合應(yīng) 用光學(xué)、機械學(xué)、流體力學(xué)、電子計算機、細胞生物 學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科技術(shù)，讓被測溶液流經(jīng)測量區(qū)域 并逐一檢測其中每一個細胞的物理和化學(xué)特性從而對 高速流動的細胞或亞細胞進行快速定量測定和

5、分析的 方法。它一秒鐘能分析幾千個細胞，并同時測定細胞 的多個參數(shù)。阻抗法也在五分類血細胞儀中被采用，即所謂的鞘流阻抗法。,1、電阻抗原理，又稱庫爾特原理,孔電流 真空 內(nèi)電極 外電極

6、 - + 血細胞 懸液 標

7、本杯,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,鞘流技術(shù)聯(lián)合電阻抗的應(yīng)用,2、激光技術(shù)、射頻技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,五分類儀器與三分類儀器的主要區(qū)別在于：白細胞不再粗略地以大小來進行分群，而是采用激光技術(shù)、組織化學(xué)技術(shù)、射頻技術(shù)等等來對白細胞進行分類。根據(jù)儀器廠家的不同，不同品牌的儀器采用了不同的分類計數(shù)。,在激光技術(shù)中目前有半導(dǎo)體激光和氣體激光。半導(dǎo)體激光功率弱,但作為細胞分類自己足夠;氣體激光功率強。二者比較

8、半導(dǎo)體激光具有壽命長(7~10年)體積小,啟動快,耗電小,對穩(wěn)壓要求低,更為經(jīng)濟適用等特點。,（1） 電阻抗、高頻電導(dǎo)及激光散射聯(lián)合檢測法即庫爾特公司的VCS技術(shù)。V:代表體積容量。電阻法微孔技術(shù)應(yīng)用于計數(shù)血細胞和測定其體積的大小。C:代表傳導(dǎo)性即電導(dǎo)(conductivity),指一束電磁波或稱射頻,穿透細胞的傳導(dǎo)性,它取決于細胞的大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu);經(jīng)校正后的傳導(dǎo)性叫opacity即“不透明性”,這時不再反映細胞大小,而是反映細胞

9、內(nèi)部的結(jié)構(gòu),像核的大小,核漿比例和密度等。S:代表散射(scatter),指在不同角度測得的散射光強度。由于各類細胞的表面結(jié)構(gòu)不同和顆粒大小不同而對光的散射各異,進而區(qū)分各類細胞。,容量、電導(dǎo)、光散射（volume，conductivity， scatter, VCS）法,原理細胞體積技術(shù)（測量細胞大?。╇妼?dǎo)性技術(shù)（測量細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)）光散射技術(shù)（測量細胞形態(tài)、細胞核和細胞顆粒）。,,,,體積 電導(dǎo)

10、光散射,VCS可顯示3種細胞散點圖DF1（體積值和散射光值）DF2（體積值和電導(dǎo)值）DF3（體積值和電導(dǎo)值）,,儀器在單一通道上同時用這三種方法對同一白細胞進行測量,避免了有些血液分析儀要設(shè)計好幾個通道或加染色試劑的麻煩。采用VCS技術(shù)的儀器主要是Coulter公司的STKS型、MAXM型以及Gen.s型五分類血液分析儀。MAXM型和Gen.s型可計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,Gen.s型可選配自動制血片機。以上幾種型號還可直接計數(shù)CD4和

11、CD8淋巴細胞,并算出其比率。,（2）光散射和細胞化學(xué)染色聯(lián)合應(yīng)用,Bayer公司的的DVIA120型和2120型血細胞分析儀、Sysmex公司的SF-3000型、邁瑞的BC-5500血細胞分析儀均采用了該原理進行工作。利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進行細胞分類。利用光散射的原理計數(shù)血細胞,因細胞表面結(jié)構(gòu)不同,在不同角度上散射光有差別,有助于對白細胞的區(qū)分。,白細胞化學(xué)染色 在稀釋液中加入過氧化酶(MPO)的底物及顯色劑

12、,根據(jù)白細胞對MPO的反應(yīng)分類。中性細胞MPO為強陽性,嗜酸性細胞陽性更強,單核細胞為弱陽性,淋巴細胞陰性,嗜堿性細胞亦為陰性,故綜合光散射和細胞化學(xué)染色的特點, 可得到二維或三維圖像-----不同顏色的散點圖。由于嗜堿性細胞不含此酶,不能被檢測,因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細胞檢測系統(tǒng),它的測量通道采用時間差的方法,與RBC、PLT的測量系統(tǒng)共用一個通道。,（3）電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法,這種方法是分別采用四個檢測系統(tǒng)來檢測不同類型

13、的細胞①淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統(tǒng):在細胞懸浮液中加入溶血劑使紅細胞溶解,而使白細胞保持完整細胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài),當(dāng)這些細胞通過檢測系統(tǒng)時,對白細胞進行電阻抗法(測量細胞體積)和射頻電導(dǎo)法(檢測細胞核和顆粒密度)的聯(lián)合檢測,結(jié)果將細胞分成淋巴細胞、單核細和中性粒細胞三個群體。,②嗜酸性細胞和嗜堿性細胞兩種檢測系統(tǒng):在細胞懸浮液中加入特殊的溶血劑,除嗜酸性細胞和嗜堿性細胞外,其他細胞均被溶解或萎縮再對保持完整的嗜酸性

14、細胞或嗜堿性細胞進行計數(shù)。③幼稚細胞檢測系統(tǒng):在細胞懸浮液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,結(jié)合在幼稚細胞的氨基酸比成熟細胞多,且對溶血劑有抵抗作用,當(dāng)加入溶血劑時,成熟細胞被溶解,只保留著可能存在的幼稚細胞用來計數(shù)。Sysmex公司的SE-9000血細胞分析儀就是采用這種方法進行五分類的。,電阻抗與射頻法能透入細胞內(nèi)，測量核的大小及顆粒的多少。,RF:射頻電流 細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息,DC:直流電 細胞大小的信息,（4

15、） 多角度激光偏振光散射檢測法,儀器使用鞘流液將標本血稀釋,稀釋后白細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài),只有嗜堿性細胞由于其吸濕的特性而使細胞結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下,從細胞中分離出來。而鞘流的水分則進入紅細胞內(nèi),使細胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整,它與鞘流的折光系數(shù)相同,不影響白細胞的檢測。儀器同時從四個角度來檢測通過激光束的細胞所產(chǎn)生的散射光,因為細胞大小、折射指數(shù)、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等,均可影響在不同角度測得的散射

16、光量。,0°：前角光散射（1°～3°），可粗略測定細胞大小。 10°：狹角光散射（7°～11°），可測定細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)相對特征。 90°：垂直光散射（70°～110°），測定細胞核分葉情況。 90°：消偏振光散射（70°～110°），區(qū)分嗜酸性粒細胞與其他細胞。,值得一提的是市面上偶見假五分類血球儀。假五分類血球儀

17、則不用上述原理分析血細胞成分,更多的使用電腦軟件的分析而得出五分類結(jié)果。分辨是否真五分類技術(shù)的血球儀，如果是試劑法,試劑不應(yīng)該少于四種,如果是激光法,試劑不少于三種。,三、五分類血細胞分析儀的使用,1、自動進樣2、手工進樣3、末梢血、靜脈血的可選性4、結(jié)果的判斷5、質(zhì)量控制6、儀器的校準 準品的來源、什么情況下需要校準？如何校準？7、儀器的維護,標本的重要性,1、高檔的儀器并不意味著結(jié)果一定可靠。2、標本的采集直接關(guān)系

18、到結(jié)果的準確性。 壓脈帶的使用時間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標本放置的溫度和時間、標本的混勻等等。,檢驗報告的審核,1、當(dāng)日質(zhì)控是否在控。2、比較報告各參數(shù)之間是否有矛盾。3、注意觀察多個測定標本相關(guān)參數(shù)是否有一致的系統(tǒng)誤差。4、報告與臨床是否符合，不符合時可能存在的原因。如PLT過低、過高。5、什么樣的結(jié)果必須手工復(fù)查？如何復(fù)查？復(fù)查完畢后的報告簽發(fā)模式。6、直方圖、散點圖的利用。,血細胞自動分析異

19、常結(jié)果人工顯微鏡復(fù)檢,1、鏡檢復(fù)核的現(xiàn)狀血細胞分析儀仍只能作為CBC 分析的一種過篩手段 ，當(dāng)遇到可疑情況 ，尤其是在病理條件下 ，其測定結(jié)果并不可靠 ，需要人工以顯微鏡復(fù)查 ，這已是不爭的事實 。但是 ，國內(nèi)目前各醫(yī)院檢驗科對CBC異常結(jié)果基不或很少進行人工顯微鏡復(fù)查 ，這種現(xiàn)象在經(jīng)濟發(fā)達的沿海地區(qū)更是普遍 。有資料顯示 ，國內(nèi)各醫(yī)院        CBC實際鏡檢率在0%

20、～15% ，大部分醫(yī)院鏡檢率< 5%或者不鏡檢 。這種現(xiàn)象引發(fā)了不少的醫(yī)療投訴 、糾紛或事故 。分析這類題出現(xiàn)的原因可能有 : (1)認識不夠 ，認為血細胞分析儀尤其是五分群的血細胞分析儀的檢測結(jié)果可靠 ，不需要復(fù)查 ； ( 2)工作量大 ； ( 3 )怕麻煩 ，圖省事 ； ( 4 )目前沒有一個可參照的執(zhí)行標準 ，即對CBC結(jié)果的人工復(fù)查的標準 、內(nèi)容 、方法及程序尚無明確的規(guī)定 。,需要鏡檢的標準目前即使是最先進的血細胞分析

21、儀也不能完全取代人工鏡下白細胞分類。因此，各實驗室應(yīng)根據(jù)所使用的儀器型號、性能和實驗室條件，制定出手工復(fù)檢方案，建立涂片復(fù)檢制度。只有在WBC、Hb、Plt均在正常范圍內(nèi)，細胞散點圖和直方圖均正常，儀器無報警顯示情況下，儀器分類結(jié)果才可作為篩選數(shù)據(jù)報告。通過鏡檢達到的目的通過顯微鏡檢查，核實儀器出現(xiàn)的各類報警是否真實存在，有無原始及幼稚細胞，有無血細胞形態(tài)異常，有無小紅細胞、紅細胞碎片、微小血凝塊、巨大血小板、血小板聚集等，并估計白

22、細胞、血小板數(shù)量，必要時對結(jié)果進行校正后才能發(fā)出報告（如有核紅細胞存在時對白細胞計數(shù)進行校正）。,血細胞自動分析與臨床的緊密結(jié)合,CBC檢測結(jié)果最終是用于臨床患者的診斷 、治療 、預(yù)后監(jiān)測或用于受檢者的健康狀況的評估 。因此 ，當(dāng)遇檢測結(jié)果異常時 ，一方面可咨詢受檢者當(dāng)事人 /親屬或通過實驗室信息系統(tǒng) (L IS)查受檢者檢測記錄外 ；另一方面與臨床聯(lián)系非常重要 ，因為臨床醫(yī)生更加了解受檢者 /患者的病情與實際情況 ，通過與臨床的聯(lián)系

23、，可了解并證實異常 CBC結(jié)果與患者病情的符合程度或因其他原因如輸液或患者標本張冠李戴引起的CBC結(jié)果異常 ?？傊?，與臨床聯(lián)系可起到事半功倍的效果 。,1、血細胞直方圖 橫坐標為血細胞體積大小 縱坐標為不同體積細胞的相對頻率。,結(jié)果的判斷,白細胞直方圖,%,紅細胞直方圖,,,,,%,血小板直方圖直方圖在2～28fl（不同儀器不一）。,,,,10 20 30(fl

24、),,,,%,散點圖,1、白細胞直方圖正常白細胞直方圖,異常白細胞直方圖,,2、紅細胞直方圖（1）正常紅細胞分布：50～200fl （2）異常紅細胞直方圖,3、血小板直方圖正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布：2～30fl分布，主要在2～15fl。,異常血小板直方圖,血液分析儀,江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院　　　　　　　朱　偉,血細胞分析儀教學(xué)要求,掌握血細胞分析儀的概念、庫爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測型血細胞分析儀器

25、的檢測原理，網(wǎng)織紅細胞檢測原理，血紅蛋白檢測原理、儀器性能評價和維護。了解血細胞分析儀的分類、性能指標、常見故障和排除及進展。,一、血細胞分析儀概述,血細胞分析儀(Blood cell analyzer,BCA)是指對一定體積全血內(nèi)血細胞異質(zhì)性進行自動分析的臨床檢驗常規(guī)儀器。又稱血細胞自動計數(shù)儀(ABCC)、血液學(xué)自動分析儀(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延過大。,,發(fā) 展 史 手工計數(shù)　　儀器

26、簡單計數(shù)　　兩分群　　三分群　　五分群　　五分群＋網(wǎng)織紅,,20世紀40年代末， 電阻抗法微粒子計數(shù)專利50年代， Coulter Model A型用于臨床60年代， 測定參數(shù)達7項70年代， 全血細胞計數(shù)（CBC）80年代， 雙通道、白細胞2~3分群、五分群90年代以來，多功能、多參數(shù)、流水線,,血細胞計數(shù)儀（Blood cell counter),Coulter principle ：微小粒子通過特殊的小孔時可產(chǎn)

27、生電阻變化，并根據(jù)這種電阻變化特點將其應(yīng)用于微小粒子的粒度測量和計數(shù)上。1953 年獲得美國發(fā)明專利,Wallance H. Coulter,昨天,血細胞計數(shù)儀,1958年，庫爾特電子（Coulter Electronics ）公司成立電阻式血細胞計數(shù)原理。單參數(shù)測定儀器，只能對血液中的紅細胞和白細胞進行計數(shù)，并且需人工切換。,昨天,日本東亞公司（SYSMEX）CC-1001,日本TOY公司1962 年生產(chǎn)的CC-1001 型血球

28、計數(shù)儀,昨天,血紅蛋白檢測功能的增加,具有單獨的血紅蛋白比色計，將加入專用的溶血劑后的樣本進行白細胞計數(shù)后再將其倒入血紅蛋白比色計， 即可得到比色法測定的血紅蛋白結(jié)果。當(dāng)時國內(nèi)使用最多的血細胞計數(shù)儀是Coulter ZF 型和血紅蛋白計。此時就能檢測MCV、HCT、MCH、MCHC。,昨天,1975 年日本東亞公司（TOA， Sysmex 的前身） 推出了包含以上7 個參數(shù)的全自動血細胞計數(shù)儀器CC－710 和CC －720 型。,昨

29、天,血小板自動計數(shù),儀器使用特殊離心速度將紅細胞和白細胞進行沉淀，使上層血漿中盡量保存最為豐富的血小板，然后應(yīng)用這種PRP 血漿進行血小板計數(shù)。如Sysmex PA-701 型和CONTRAVE 1000 型，此類儀器多配有專用PRP 離心機。右圖為TOA PLT-100 型血小板計數(shù)儀和離心機。,昨天,血細胞計數(shù)儀血小板計數(shù)功能的增加,血細胞分析儀將血小板計數(shù)這一重要功能合并到全血細胞計數(shù)（CBC） 范圍內(nèi)。將血小板按體積大小

30、劃分到64 個通道，分別累加體積大小不同的血小板數(shù)量。除了給出血小板數(shù)量外，還提供了兩個新的參數(shù)，平均血小板體積(MPV) 和血小板體積分布寬度（PDW）。,昨天,Sysmex CC-800,白細胞分類功能的增加,二分類1970 年起Coulter 公司首先推出了兩分類的S-PLUS 系列儀器。1980年又推出了T系列，都是可進行白細胞兩分類的儀器。Sysmex F800 和F820 型也是根據(jù)白細胞體積分布直方圖進行粗略兩分群的

31、儀器。,昨天,Sysmex F820,三分群時代,經(jīng)過特殊溶血劑處理的白細胞，在白細胞分布直方圖上出現(xiàn)兩個明顯的細胞分布峰。體積較小的一群細胞稱為淋巴細胞群（LYM）。右側(cè)體積較大的稱為粒細胞群（GRAN）。位于兩者之間的稱為中間細胞群（MID）， 中間細胞群一般指含有嗜酸粒細胞，嗜堿粒細胞和單核細胞的細胞群。,今天,五分類血液分析儀,BECKMEN COULTE：VCSABBOTT：MAPSS(多角度偏振光散射) ADVIA

32、：POXSYSMEX：核酸熒光染色,今天,血液細胞分析儀是醫(yī)院檢驗科、化驗室的常規(guī)設(shè)備之一，也是發(fā)展最快、應(yīng)用最普及的檢驗儀器，當(dāng)前血液細胞分析儀分為三分群和五分類兩種。國際市場上五分類血液細胞分析儀已經(jīng)成為發(fā)達國家醫(yī)院血液臨床檢驗的主流產(chǎn)品，但由于五分類血液細胞分析儀需集光學(xué)、電子、氣路、液路、計算機等技術(shù)于一體，技術(shù)含量非常高，縱觀全球，也僅有美國、法國、日本等國家的 6 個廠家能夠生產(chǎn)真正意義上的五分類血液細胞分析儀?！?/p>

33、　2006年 4 月深圳邁瑞 BC-5500推出之前，由于國內(nèi)沒有掌握該類產(chǎn)品生產(chǎn)制造的核心技術(shù)，因而在中國市場銷售的該類產(chǎn)品由國外品牌所壟斷，價格都比較昂貴，導(dǎo)致該類產(chǎn)品不能在中國醫(yī)院臨床檢驗中大范圍推廣應(yīng)用，BC-5500 的推出推動了五分類血液細胞分析儀在國內(nèi)的臨床應(yīng)用，提高整個國內(nèi)血液細胞檢測的臨床應(yīng)用水平。,一、常見血細胞分析儀品牌,1、庫爾特2、希思美康3、邁瑞4、雅培5、光電6、拜耳7、……,庫爾特COULTE

34、R GEN.S System,庫爾特5-diff 系統(tǒng),COULTER HmX血液分析儀,,SYSMEX XE-5000型五分類血細胞分析儀,,XT-1800i五分類血液細胞分析儀,ABBOTT CELL-DYN3200五分類血液分析,光電8222k血細胞分析儀,DIANA-5儀器,BC-5500五分類血液細胞分析儀,二、儀器分型檢測原理,（一）血細胞分析儀分型按自動化程度按檢測原理按對白細胞的分類水平,電 阻 抗 法 血 細

35、胞 檢 測 原 理,二、儀器分型檢測原理,聯(lián)合檢測型原理,主要體現(xiàn)在白細胞分類，實質(zhì)是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細胞。共有特點是：均使用了鞘流技術(shù)。,容量、電導(dǎo)、光散射檢測技術(shù),,,,光散射,電導(dǎo)性,電阻抗,每個細胞接受三維分析定義到三維散點圖的相應(yīng)位置,電導(dǎo)性(conductivity，C) 高頻電磁探針，測量細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細胞內(nèi)核漿比例。體積(volume，V) 電阻抗原理測定細胞體積和數(shù)量

36、。光散射(scatter，S)細 胞內(nèi)粗顆粒的光散射強 度要比細顆粒更強。,光散射與細胞化學(xué)聯(lián)合檢測技術(shù),這類儀器是應(yīng)用激光散射與細胞化學(xué)染色技術(shù)對白細胞進行分類計數(shù)。,返回本節(jié)目錄,白細胞分類散射圖,聯(lián)合使用多項技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細胞化學(xué)染色)同時分析一個細胞，綜合分析實驗數(shù)據(jù)，從而得出較為準確的白細胞“五分群”結(jié)果。,返回本節(jié)目錄,網(wǎng)織紅細胞檢測原理,,網(wǎng)織紅細胞中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊

37、的熒光染料結(jié)合熒光強度與RNA含量成正比用流式細胞術(shù)檢測 網(wǎng)織紅細胞大小和 RNA含量及血紅蛋 白的含量,二、儀器分型檢測原理,（五）血紅蛋白測定原理,除干式、無創(chuàng)型外，各型BCA對血紅蛋白測定都采用光電比色原理。血細胞懸液中加入溶血劑后，紅細胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)。特定波長(530～550nm)下進行光電比色。,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),溶

38、血素的作用原理,細胞膜表面脂質(zhì)成分的差異紅細胞膜表面含有較多的脂質(zhì)磷脂膽固醇成熟白細胞膜磷脂類成分相對較少幼稚粒細胞膜磷脂類成分更少溶血素的主要成分表面活性劑主要攻擊細胞膜的磷脂類成分,儀器基本結(jié)構(gòu),機械系統(tǒng)電學(xué)系統(tǒng)血細胞檢測系統(tǒng)血紅蛋白測定系統(tǒng)計算機鍵盤控制系統(tǒng),三、儀器的性能指標、評價與調(diào)校,（一）血細胞分析儀的性能指標 1.測試參數(shù) 2.細胞形態(tài)學(xué)分析 3.測試速度 4.樣本量 5.精密度

39、與示值范圍 6.打印,血細胞分析儀的評價,ICSH公布了電子血細胞分析儀的評價方案：在細胞計數(shù)、血紅蛋白測定方面，要評價儀器測試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準確性等,三、儀器的性能指標、評價與調(diào)校,四、儀器的維護與常見故障,（一）儀器的維護 1.安裝： 潔凈的環(huán)境、穩(wěn)定的電源、可靠的接地、適宜的溫度和濕度是保證BCA正常工作的前提。,2.維護：良好的工作環(huán)境是儀器正常工作的前提，精心細致的維護是儀器處于

40、良好工作狀態(tài)的保證。做好儀器的維護保養(yǎng)，有助于提高儀器測量的準確性，減少故障的發(fā)生，延長儀器的使用壽命。,四、儀器的維護與常見故障,檢測器的維護 ①采血順利②防止纖維絲堵孔③關(guān)機前對檢測器的微孔進行清理沖洗④計數(shù)期間，及時按 “反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)⑤定期卸下檢測器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗,儀器的維護與常見故障,三、五分類血細胞分析儀的使用,1、自動進樣2、手工進樣3、末梢血、靜脈血的可選性4、結(jié)果的判斷5

41、、質(zhì)量控制6、儀器的校準 準品的來源、什么情況下需要校準？如何校準？7、儀器的維護,標本的重要性,1、高檔的儀器并不意味著結(jié)果一定可靠。2、標本的采集直接關(guān)系到結(jié)果的準確性。 壓脈帶的使用時間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標本放置的溫度和時間、標本的混勻等等。,檢驗報告的審核,1、當(dāng)日質(zhì)控是否在控。2、比較報告各參數(shù)之間是否有矛盾。3、注意觀察多個測定標本相關(guān)參數(shù)是否有一致的系統(tǒng)誤差。4、報告與臨床

42、是否符合，不符合時可能存在的原因。如PLT過低、過高。5、什么樣的結(jié)果必須手工復(fù)查？如何復(fù)查？復(fù)查完畢后的報告簽發(fā)模式。6、直方圖、散點圖的利用。,血細胞自動分析異常結(jié)果人工顯微鏡復(fù)檢,1、鏡檢復(fù)核的現(xiàn)狀　　　　血細胞分析儀仍只能作為CBC 分析的一種過篩手段 ，當(dāng)遇到可疑情況 ，尤其是在病理條件下 ，其測定結(jié)果并不可靠 ，需要人工以顯微鏡復(fù)查 ，這已是不爭的事實 。但是 ，國內(nèi)目前各醫(yī)院檢驗科對CBC異常結(jié)果基不或很少進行人工顯

43、微鏡復(fù)查 ，這種現(xiàn)象在經(jīng)濟發(fā)達的沿海地區(qū)更是普遍 。有資料顯示 ，國內(nèi)各醫(yī)院CBC實際鏡檢率在0% ～15% ，大部分醫(yī)院鏡檢率< 5%或者不鏡檢 。這種現(xiàn)象引發(fā)了不少的醫(yī)療投訴 、糾紛或事故 。分析這類題出現(xiàn)的原因可能有 : (1)認識不夠 ，認為血細胞分析儀尤其是五分群的血細胞分析儀的檢測結(jié)果可靠 ，不需要復(fù)查 ； ( 2)工作量大 ； ( 3 )怕麻煩 ，圖省事 ； ( 4 )目前沒有一個可參照的執(zhí)行標準 ，即對CBC結(jié)果的

44、人工復(fù)查的標準 、內(nèi)容 、方法及程序尚無明確的規(guī)定 。,需要鏡檢的標準　　　目前即使是最先進的血細胞分析儀也不能完全取代人工鏡下白細胞分類。因此，各實驗室應(yīng)根據(jù)所使用的儀器型號、性能和實驗室條件，制定出手工復(fù)檢方案，建立涂片復(fù)檢制度。只有在WBC、Hb、Plt均在正常范圍內(nèi)，細胞散點圖和直方圖均正常，儀器無報警顯示情況下，儀器分類結(jié)果才可作為篩選數(shù)據(jù)報告。通過鏡檢達到的目的　　　通過顯微鏡檢查，核實儀器出現(xiàn)的各類報警是否真實存在

45、，有無原始及幼稚細胞，有無血細胞形態(tài)異常，有無小紅細胞、紅細胞碎片、微小血凝塊、巨大血小板、血小板聚集等，并估計白細胞、血小板數(shù)量，必要時對結(jié)果進行校正后才能發(fā)出報告（如有核紅細胞存在時對白細胞計數(shù)進行校正）。,血細胞自動分析與臨床的緊密結(jié)合,CBC檢測結(jié)果最終是用于臨床患者的診斷 、治療 、預(yù)后監(jiān)測或用于受檢者的健康狀況的評估 。因此 ，當(dāng)遇檢測結(jié)果異常時 ，一方面可咨詢受檢者當(dāng)事人 /親屬或通過實驗室信息系統(tǒng) (L IS)查受檢者檢

46、測記錄外 ；另一方面與臨床聯(lián)系非常重要 ，因為臨床醫(yī)生更加了解受檢者 /患者的病情與實際情況 ，通過與臨床的聯(lián)系 ，可了解并證實異常 CBC結(jié)果與患者病情的符合程度或因其他原因如輸液或患者標本張冠李戴引起的CBC結(jié)果異常 。總之 ，與臨床聯(lián)系可起到事半功倍的效果 。,結(jié)果判斷1、血細胞直方圖 橫坐標為血細胞體積大小 縱坐標為不同體積細胞的相對頻率。,,白細胞直方圖,%,紅細胞直方圖,,,,,%,血小板直方圖,