生物化學(xué)15.第十五章 基因工程與分子生物學(xué)常用技術(shù)

1、幻燈片1第十五章基因工程與分子生物學(xué)常用技術(shù)GeicEngineeringThePopularTechnologyInMolecularBiology()分子生物學(xué)技術(shù)現(xiàn)已廣泛滲透到生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)等多個(gè)學(xué)科中，尤其推動(dòng)了基因工程分子生物學(xué)技術(shù)現(xiàn)已廣泛滲透到生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)等多個(gè)學(xué)科中，尤其推動(dòng)了基因工程的發(fā)展。的發(fā)展。對(duì)疾病的發(fā)病機(jī)制、診斷及藥物生產(chǎn)等領(lǐng)域取得了令人矚目的成就，對(duì)醫(yī)學(xué)的發(fā)展起對(duì)疾病的發(fā)病機(jī)制、診斷及藥物生產(chǎn)等領(lǐng)域取得了令人

2、矚目的成就，對(duì)醫(yī)學(xué)的發(fā)展起著巨大的推動(dòng)作用。著巨大的推動(dòng)作用?；脽羝?第一節(jié)第一節(jié)第一節(jié)基因工程與基因重組基因工程與基因重組基因工程與基因重組(GeicEngineeringGeicrecombination)一、基因工程的基本概念一、基因工程的基本概念不同來(lái)源的不同來(lái)源的DNADNA分子可以通過(guò)磷酸二酯鍵連接形成重新組合的分子可以通過(guò)磷酸二酯鍵連接形成重新組合的DNADNA分子，稱為分子，稱為DNADNA重組。重組。將基因進(jìn)行克隆，并

3、表達(dá)制備特定的產(chǎn)物，或定向改造細(xì)胞乃至生物個(gè)體的特性所將基因進(jìn)行克隆，并表達(dá)制備特定的產(chǎn)物，或定向改造細(xì)胞乃至生物個(gè)體的特性所用的方法及相關(guān)的工作統(tǒng)稱為基因工程。用的方法及相關(guān)的工作統(tǒng)稱為基因工程。幻燈片3((一一))工具酶工具酶工具酶工具酶1.1.1.1.限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶(1)(1)(1)(1)能夠切割能夠切割能夠切割能夠切割DNADNADNADNA中磷酸二酯鍵的酶稱核酸酶，其中有選擇地

4、切割中磷酸二酯鍵的酶稱核酸酶，其中有選擇地切割中磷酸二酯鍵的酶稱核酸酶，其中有選擇地切割中磷酸二酯鍵的酶稱核酸酶，其中有選擇地切割DNADNADNADNA分子特異序列的分子特異序列的分子特異序列的分子特異序列的核酸酶，稱為限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制性內(nèi)切酶。核酸酶，稱為限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制性內(nèi)切酶。核酸酶，稱為限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制性內(nèi)切酶。核酸酶，稱為限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制性內(nèi)切酶。(2)(2)(2)(2)命名命名命名命

5、名HindⅢ屬系株序Haemophilusinfluenzaed株流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌d株的第三種酶株的第三種酶(3)(3)(3)識(shí)別特征識(shí)別特征識(shí)別特征識(shí)別特征具有多克隆位點(diǎn)。具有多克隆位點(diǎn)。易從宿主細(xì)胞中分離純化。易從宿主細(xì)胞中分離純化。有易被識(shí)別和篩選的標(biāo)志。有易被識(shí)別和篩選的標(biāo)志。2.載體的選擇標(biāo)準(zhǔn)載體的選擇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒質(zhì)粒質(zhì)粒質(zhì)粒噬菌體噬菌體噬菌體噬菌體粘粒粘粒粘粒粘粒病毒病毒病毒病毒3.常用載體常用載體幻燈片8(1)(1)(