診斷試劑性能指標評估

1、體外診斷試劑分析性能評估指導原則,2013.04.25,目錄,1.檢測限2.線性范圍3.可報告范圍4.準確度（回收實驗）5.準確度（方法學比對）6.精密度7.干擾實驗8.穩(wěn)定性9.參考值（參考區(qū)間）,基本要求,實驗人員儀器設備試劑,檢測限（limit of detection）,1、定義：檢測限是指檢測方法可檢測出的最低被測量濃度，，也稱檢測低限或最小檢出濃度，有時也稱分析靈敏度。2、檢測方法：一次運行中將空白樣

2、本重復測定20次。3、空白樣本制備：空白樣本應不含被測物，但其基質(zhì)應與待測常規(guī)樣本相同。若空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根據(jù)測定項目選用相應基質(zhì)樣本，但應將基質(zhì)效應減至最小。4、數(shù)據(jù)處理記錄：記錄初始響應值，如吸光度值等。 統(tǒng)計：計算20次結(jié)果的均值X與標準差SD。5、結(jié)果報告 以空白均值加兩倍標準差報告方法的檢測限。（即X+2SD）,線性范圍,線性：測量結(jié)果與樣品中被測量的值直接成比例的能力

3、。樣本要求樣本基質(zhì)應與臨床實驗樣本相似。樣本不得含有干擾物質(zhì)：溶血、脂血、黃疸等。實驗過程建立線性范圍：在預期線性范圍內(nèi)選擇9-11個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。驗證線性范圍：測定4-6個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。,線性范圍,數(shù)據(jù)處理記錄原始數(shù)據(jù)計算精密度，剔除離群值進行線性回歸線性范圍應符合一定要求,可報告范圍（reportable range）,可報告范圍包括可報告低限和可報告高限樣本

4、要求低值樣本：接近方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個濃度水平，濃度水平間隔應小于線性范圍低限的10%。高值樣本：含有被測物的高值樣本，必要時可加入被分析物純品，并計算出理論值。將該高值樣本稀釋使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選擇3個高濃度樣本。,可報告范圍（reportable range）,實驗過程在一次運行中將低值樣本重復測定10次，高值稀釋樣本重復測定3次。數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)統(tǒng)計：分別

5、計算AVE、SD、CV值。對于可報告高限還應計算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差。,可報告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表,,可報告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄表,可報告范圍（reportable range）,結(jié)果報告可報告范圍低限：以方法性能標示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平作為可報告低限?？蓤蟾娣秶呦蓿哼x取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法標示的界值時的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍

6、數(shù)，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報告范圍的高限。,準確度（回收實驗）,準確度：一個測量值與可接受的參考值之間的一致程度。樣本制備1、選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的3-4份。2、在其中2-3份樣本中加入不同量的待測物標準，制成2-3個不同加入濃度的回收樣本，計算加入的待測物的濃度。3、在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎樣本。注意事項1、加入體積：加入的標準液體積一般在樣本體積的1

7、0%以內(nèi)2、加入待測物的濃度：保證總濃度在方法分析測量范圍內(nèi)。3、標準物濃度：因為標準物溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的回收樣本，標準物的濃度應該足夠高。,準確度（回收實驗）accuracy（recovery）,實驗過程：用待評價方法對回收樣本和基礎樣本進行測定，通常對樣本進行2-3次重復分析，取其均值進行計算。數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告1、計算回收率：回收率=（回收樣本濃度-基礎樣本濃度）/加入濃度×100%

8、2、計算平均回收率：平均回收率=（回收率1+回收率2+回收率3）/3×100%3、計算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=100%-平均回收率4、可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差應不大于相關(guān)規(guī)定。,范例-某法測定血清葡萄糖回收率,1、樣本制備基礎樣本：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml回收樣本1：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃度22mmol/L）回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃:55mm

9、ol/L）2、數(shù)據(jù)結(jié)果3、計算平均回收率：平均回收率=（103+99）/2×100%=101%4、計算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=/100%-101%/=1%,精密度,批內(nèi)精密度：嚴格的相似條件下，所得到的最佳精密度。批間精密度：指在同一實驗室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時間內(nèi)（一般為一個月或20個工作日）對同一測試樣品（常用質(zhì)控品）測量結(jié)果的精密度。,精密度,樣

10、本要求1、至少評估兩個濃度水平的樣本，若兩個濃度樣本的精密度由顯著差異，則建議增加第三個濃度水平樣本；2、樣本濃度在測量范圍內(nèi)，至少有一個濃度在醫(yī)學決定水平左右；3、不要為了得到較小的精密度，而選擇高值樣本，也不要選擇靠近檢出限的樣本；4、如果不存在醫(yī)學決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個濃度。,精密度,只評估批內(nèi)精密度 1、試劑和標準品：應使用同一種類、同一批號的試劑和校準物。2、方法：在一次檢測中，對同一樣本至少進行20

11、次重復測定。3、數(shù)據(jù)處理：記錄所有數(shù)據(jù)，計算平均值、標準差及變異系數(shù)。4、離群值：結(jié)果與總均值的差值超過4個標準差時，可認為該結(jié)果為離群值。一次評估只能有一個離群值，當離群值超過一個時，應懷疑該方法的穩(wěn)定性及操作者的熟練程度。,精密度,同時評價批內(nèi)和批間精密度依據(jù)樣品的情況選擇實驗方法1、每天做2個批次的測試，每批對同一樣品作雙份測量，工作20天，共80 個測試結(jié)果。2、每天做1個批次的測試，每批對同一樣品作4次測量，工作20