托幼機構消毒衛(wèi)生標準

1、托幼機構消毒衛(wèi)生標準 Hygienic standard for disinfection of nursery,江蘇省疾病預防控制中心 孫俊 徐燕,前 言 本標準4.1.2、4.1.3、4.1.4、4.1.5、4.1.6、4.1.7、4.1.8、4.1.9、4.1.11、4.2為強制性的，其余為推薦性的。 由于我國目前尚未出臺有關托幼機構消毒衛(wèi)生標準，直接影響

2、對托幼機構消毒質量的監(jiān)督指導和效果評價。為此，我們依據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《消毒管理辦法》有關規(guī)定，針對托幼機構的特殊性和衛(wèi)生要求，結合我省常年監(jiān)測結果，特制定本標準。 本標準附錄A為規(guī)范性附錄。 本標準由江蘇省衛(wèi)生廳提出并歸口。 本標準負責起草單位：江蘇省疾病預防控制中心、南通市疾病預防控制中心、徐州市疾病預防控制中心。 本標準主要起草人：孫俊、徐燕、談智、陳越英、

3、吳小成、周品眾、周明浩、章士軍、蔣明倫,1范圍 本標準規(guī)定了托幼機構室內空氣、物體表面、工作人員手、餐（飲）具、游泳嬉水池等消毒衛(wèi)生要求、指標和檢驗方法等。 本標準適用于各類托兒所、幼兒園。,2 規(guī)范性引用文件 下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些

4、文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。,GB14934-1994 食（飲）具消毒衛(wèi)生標準GB15982-1995 醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準GB9664-1996 文化娛樂場所衛(wèi)生標準GB9667-1996 游泳場所衛(wèi)生標準GB/T17220-1998 公共場所衛(wèi)生監(jiān)測技術規(guī)范GB/T18204.9~10-2000 游泳池水微生物檢驗方法2001年

5、 衛(wèi)生部《生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范》2002年 衛(wèi)生部《消毒技術規(guī)范》GB15979-2002 一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準GB/T4789-2003 食品衛(wèi)生微生物學檢驗,3 術語和定義 下列術語和定義適用于本標準 3.1消毒 殺滅或清除傳播媒介上病原微生物，使其達到無害化的處理。 3.2預防性消毒 對可能受到病原微生物污染的場所和物品進行的消毒。,3.3

6、物體表面 玩具、毛巾、桌面、衛(wèi)生潔具、席子、褥具、便器架子等表面。 3.4消毒藥械 用于殺滅傳播媒介上的微生物使其達到消毒或滅菌要求的制劑或器械。 3.5消毒衛(wèi)生標準 指不同對象經(jīng)消毒或滅菌處理后，允許殘留微生物的最高數(shù)量。,4 衛(wèi)生要求和指標 4.1 衛(wèi)生要求 4.1.1托幼機構內環(huán)境整潔，并有綠化防塵措施，有一定面積的綠化場地和室外活動場所，應

7、做到無積水、無垃圾、無蚊蠅孳生地、無鼠害。 4.1.2活動室、教室和寢室應有紗窗和紗門，防止蒼蠅、蚊子等有害生物侵入和隱匿。幼兒被褥單獨疊放，不得混雜堆疊在一起。室內經(jīng)常保持空氣流通，定期進行消毒，傳染病流行期間，每日消毒一次。,4.1.3幼兒園里應設有保健室及隔離觀察室，應配備以下物品：隔離衣、體溫表、壓舌板、手電筒、毛巾、肥皂、便器、清潔用具、消毒藥械等。隔離觀察室應有專人負責，做好觀察護理及消毒工作，記錄完

8、整。同一隔離觀察室內不能同時隔離不同病種的患兒，當患兒離室后須進行終末消毒。當有隔離患兒時進入隔離觀察室的工作人員，必須換上隔離衣，出室后必須脫下隔離衣，并做好手的清潔消毒。隔離觀察室內的污物和污水必須經(jīng)嚴格消毒后方可處理。室內必須配有空氣消毒設備，定期進行空氣消毒。,4.1.4托幼機構的食堂（營養(yǎng)室、廚房）必須取得當?shù)匦l(wèi)生行政部門發(fā)放的衛(wèi)生許可證。廚房應有紗門、紗窗，配有冷藏設備以及消毒、盥洗、污水排放、存放垃圾和廢棄物的設施。備餐間

9、不得裝有自來水和下水道。 4.1.5餐具、飲具和盛放直接入口食品的容器，使用前必須洗凈、消毒，嚴格執(zhí)行一洗二清三消毒四保潔制度。托幼兒做到一人一巾一杯一水，一用一消毒。,4.1.6衛(wèi)生間采用水沖式便池，便器每日消毒；臨時患有腸道疾患者，便器專人專用，及時消毒。 4.1.7游泳嬉水池在使用期間應保持清潔無異味，每日消毒，符合GB9667-1996有關要求。 4.1.8

10、兒童接觸的用具、玩具應定期清洗消毒，傳染病流行期間每日一次。 4.1.9建立嚴格的衛(wèi)生制度，如晨檢檢查制度和全日觀察制度、兒童健康檢查制度和消毒隔離制度；體溫表、壓舌板等每次用完之后清洗消毒。,4.1.10工作人員應身體健康，每年健康體檢一次，取得健康合格證方可上崗。工作人員應注重個人衛(wèi)生。做到勤理發(fā)、勤洗澡、勤剪指甲、勤換洗衣服。工作服要勤洗勤換，定期消毒。保教人員上崗前應接受衛(wèi)生防病消毒知識培訓，合格后方可上崗

11、，掌握消毒藥械的使用方法。 4.1.11 使用的消毒藥械必須具有衛(wèi)生許可批件，有專人保管，存放安全，標志醒目，并在有效期內正確使用。,4.2消毒衛(wèi)生指標 消毒衛(wèi)生指標應符合下表規(guī)定。,表 消毒衛(wèi)生指標,5 檢驗方法 采樣及檢驗方法按附錄A執(zhí)行 6 有關規(guī)定 6.1 各類托兒所、幼兒園必須指定專人負責組織實施。 6.2各級衛(wèi)生監(jiān)督

12、部門按有關法律、法規(guī)開展監(jiān)督管理工作；各級疾病預防控制機構按本標準開展監(jiān)測工作，每年至少一次 。,附錄A（規(guī)范性附錄）采樣及檢驗方法,A1 采樣及檢驗原則微生物指標的檢驗應在采樣后6h內盡快進行。 A2 室內空氣微生物采樣及檢驗方法,A2.1 樣品采集 采樣時間分動態(tài)或靜態(tài)，靜態(tài)選擇消毒處理后與進行保教活動之前期間采樣，動態(tài)即正常保教活動中。室內面積不超過30m2，在一條對角線上設里、中、外3點，里外點位置

13、距墻1m；室內面積超過30m2，設東、西、南、北、中5點，周圍四點距墻1m。平板沉降法采樣：將營養(yǎng)瓊脂平板（直徑為9cm）置于采樣點60cm~100cm高度，打開平板蓋，使平板在空氣中暴露5min，蓋上平板蓋。溶血性鏈球菌監(jiān)測時采用血平板采樣。,A2.2細菌培養(yǎng)將采樣平板置于37℃培養(yǎng)48h觀察結果，計算平板上細菌菌落數(shù)。A2.3 菌落計算

14、 50000×N空氣中細菌菌落總數(shù)（cfu/m3）= A×T式中：N——平板上平均細菌菌落數(shù)（cfu/平板）；A——平板面積（cm2）T——暴露時間(min),,A3物體表面、手表面微生物采樣及檢驗方法 A3.1細菌菌落總數(shù) A3

15、.1.1樣品采集 物體表面：將經(jīng)滅菌的內徑為5cm×5cm的無菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用一浸濕有無菌生理鹽水的棉拭子在其內涂擦5次，并隨之轉動棉拭子，連續(xù)采樣4個規(guī)格板面積，共采集100cm2，然后剪去手接觸部分，將棉拭子放入20ml生理鹽水采樣管內送檢。,手：被檢人在從事幼教工作前，雙手五指并攏，用一浸濕生理鹽水棉拭子在雙手指曲面，從指根到指端來回涂擦2次（一只手涂擦面積約30 cm2），然后剪去手接觸部

16、分，將棉拭子放入含20ml無菌生理鹽水的采樣管內送檢。,A3.1.2檢驗方法 將每支采樣管振打80次，取1ml樣液接種無菌平皿內，如污染嚴重，可做適當稀釋后接種，每個樣本平行接種兩個平皿，傾注營養(yǎng)瓊脂，搖勻并冷卻后置37℃培養(yǎng)48h，計算平板上細菌菌落總數(shù)。,A3.1.3菌落總數(shù)計數(shù)手表面： 平板上平均細菌菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)每只手表面細菌菌落總數(shù)(

17、cfu/ cm2)= 2×30物體表面： 平板上平均細菌菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)物體表面細菌菌落總數(shù)（cfu/cm2）=

18、 采樣面積（cm2）,,,A3.2大腸菌群 A3.2.1樣品采集 使用測定細菌總數(shù)時采集的樣品無需重采。 A3.2.2檢驗方法 取樣液5ml接種到50ml乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報告為大腸菌群陰性；如有產(chǎn)酸、產(chǎn)氣則劃線接種伊紅美藍瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18h~24h

19、，觀察平板上菌落形態(tài)，挑取可疑大腸菌落1個~2個進行革蘭氏染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管于35℃±2℃培養(yǎng)24h，觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管最終產(chǎn)酸產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報告為大腸菌群陽性 。,A3.3致病菌 A3.3.1樣品采集 使用測定細菌總數(shù)時采集的樣品無需重采。 A3.3.2檢驗方法 A3.3.2.1綠膿桿菌 取樣液5ml，加入到50mlSCD

20、LP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)18h~24h。如有綠膿桿菌生長，培養(yǎng)液表面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18h~24h，觀察菌落特征。綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長。,取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應進行下列試驗：氧化酶試驗：取一小塊潔凈

21、的白色濾紙片放在滅菌平皿內，用無菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對苯二胺試液，30s內出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗陽性，不變色者為陰性。 綠膿菌素試驗：取2~3個可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，35℃±2℃培養(yǎng)24h，加入三氯甲烷3ml~5ml，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍色時，用吸管移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1ml，

22、振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。,硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗：挑取被檢菌落純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，培養(yǎng)基小倒管中有氣者即為陽性。 明膠液化試驗：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，取出放于4℃~10℃，如仍呈液態(tài)為陽性，凝固者為陰性。 42℃生長試驗：取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培

23、養(yǎng)基上，置42℃培養(yǎng)24h~48h，有綠膿桿菌生長為陽性。,結果報告：被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗均為陽性者，即可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長試驗三者皆為陽性時，仍可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。,A3.3.2.2金黃色葡萄球菌 取樣液5ml，加入到50mlSCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)24h。自上

24、述增菌液中取1~2接種環(huán)，劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置35℃±2℃培養(yǎng)24h~48h。在血瓊脂平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。,挑取典型菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應進行下列試驗： 甘露醇發(fā)酵試驗：取上述菌落接種甘露醇 培養(yǎng)液，置35℃±2℃培養(yǎng)24h，發(fā)酵甘露產(chǎn)酸者為陽性。,

25、血漿凝固酶試驗：玻片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿混合，5min如血漿內出現(xiàn)團塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴仍呈均勻混濁無凝固則為陽性，如兩者均無凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝固現(xiàn)象，再進行試管凝固酶試驗；試管法：吸取1:4新鮮血漿0.5ml，放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5ml?；靹?，放35℃±2℃溫箱或水浴中，每半小時觀察一次，24h之內呈

26、現(xiàn)凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)各0.5ml作為陽性與陰性對照。,結果報告：凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭氏陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。 A3.3.2.3溶血性鏈球菌 取樣液5ml，加入到50ml葡萄糖肉湯，35℃±2℃培養(yǎng)24h。 將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平板，35℃±2℃培養(yǎng)24

27、h觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無色透明溶血圈。,挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應為革蘭氏陽性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應進行下列試驗： 鏈激酶試驗：吸取草酸鉀血漿0.2ml（0.01g草酸鉀加5ml兔血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液），加入0.8ml滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5ml和0.25%氯化鈣0.25ml，混勻，放35

28、℃±2℃水浴中，2min觀察一次（一般10min內可凝固），待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時間。如2h內不溶化，繼續(xù)放置24h觀察，如凝塊全部溶化為陽性，24h仍不溶化為陰性。,桿菌肽敏感試驗：將被檢菌菌液涂于血平板上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時以已知陽性菌株作對照，在35℃±2℃下放置18h~24h，有抑菌帶者為陽性。 結果報告：鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌，血平板上呈

29、現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗陽性，可報告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。,A3.3.2.4沙門氏菌 按GB/T4789.4-2003。A4餐（飲）具采樣與檢驗方法A4.1發(fā)酵法采樣與檢驗,A4.1.1采樣方法 餐（飲）具抽檢碗、盤、口杯，將2.0cm×2.5cm(5cm2)滅菌濾紙片緊貼內面各10張（總面積50cm2）、碟、匙、酒杯等小件物品以每5件為1份，每件內面緊貼滅菌濾紙片各2張（總面積50

30、cm2/份），如餐（飲）具較干燥可將濾紙片用無菌生理鹽水濕潤后再采樣，經(jīng)1min，按序取下置入50ml滅菌生理鹽水試管中，充分振蕩后，制成原液。 筷：取每雙的下段12cm處約50cm2（12cm×2cm×2cm），置入50ml滅菌生理鹽水試管中，充分振蕩20次，制成原液。,A4.1.2檢驗方法 A4.1.2.1大腸菌群 按GB/T4789.3執(zhí)行。（按本標準A3.2.2執(zhí)行

31、） A4.1.2.2金黃色葡萄球菌 按GB/T4789.10執(zhí)行。（按本標準A3.3.2.2執(zhí)行） A4.1.2.3沙門氏菌 按GB/T4789.4執(zhí)行。,A4.1.2.4志賀氏菌 按GB/T4789.5執(zhí)行。 A4.2紙片法采樣與檢驗 餐（飲）具消毒采用專用的大腸菌群快速檢驗紙片。 A4.2.1采樣方法 隨機抽取消毒

32、后準備使用的各類餐具（碗、盤、杯等），每次采樣6~10件，每件貼紙片兩張，每張紙片面積25cm2（5cm×5cm）用無菌生理鹽水濕潤大腸菌群檢驗用紙片后，立即貼于食具內側表面，30s后取下，置于無菌塑料袋內。,筷子以5只為一件樣品，用毛細吸管吸取無菌生理鹽水濕潤紙片后，立即將筷子進口端（約5cm）抹拭紙片，每件樣品抹拭兩張，放入無菌塑料袋內。 A4.2.2檢驗方法 將已采樣的紙片置37℃培養(yǎng)16h~1

33、8h，若紙片保持紫藍色不變?yōu)榇竽c菌群陰性，紙片變黃并在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點或片狀紅暈為陽性。,A5 嬉水池、游泳池水質檢驗 A5.1游離性余氯 按2001年衛(wèi)生部《生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范》執(zhí)行。 A5.2細菌總數(shù)、大腸菌群 按《公共場所衛(wèi)生標準監(jiān)測檢驗方法》執(zhí)行。 A6結果判定 檢查結果符合相應的標準值者，判定為該項檢驗合格；反之，不符合相應標準值者，則判定為檢驗不合格。,