農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)

1、甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,內(nèi)容提要,食品安全現(xiàn)狀國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀農(nóng)藥獸藥多殘留檢測(cè)技術(shù)快速篩選檢測(cè)技術(shù)樣品前處理技術(shù)存在的問(wèn)題與措施農(nóng)藥獸藥殘留的控制,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全 世界衛(wèi)生組織（WHO）： 食品安全 指確保食品按照其用途進(jìn)行加工或者 食用時(shí)不會(huì)對(duì)消費(fèi)

2、者產(chǎn)生危害。 食物中有毒、有害物質(zhì)對(duì)人體健康影響的公共衛(wèi)生問(wèn)題。 《中華人民共和國(guó)食品衛(wèi)生法》第六條： 食品應(yīng)當(dāng)無(wú)毒無(wú)害。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全事件英國(guó)“瘋牛病” 英國(guó)因瘋牛病，牛肉和其制品出口受阻，每年損失達(dá)52億美元；因宰殺“瘋?！睋p失高達(dá)300億美元。 德國(guó)因發(fā)生瘋牛病

3、導(dǎo)致衛(wèi)生和農(nóng)業(yè)部長(zhǎng)辭職(2001)。比利時(shí)“二惡英”事件 比利時(shí)發(fā)生的二惡英污染事件損失達(dá)13億歐元。 使歐洲乳、雞、牛肉等食品的出口在全球范圍內(nèi)受阻，而造成比利時(shí)政府內(nèi)閣倒臺(tái) (1999)。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全事件畜禽肉（特別是凍雞）獸藥殘留 — 歐盟、日本凍蝦仁氯霉素殘留；茶葉農(nóng)藥殘留 — 多國(guó)；鴨肉禽流感病毒 —

4、 韓國(guó)；醬油氯丙醇 — 歐盟；花生黃曲霉毒素；美國(guó)FDA以有害物質(zhì)超標(biāo)為由(主要問(wèn)題是含雜質(zhì)和農(nóng)藥殘留、食品添加劑等衛(wèi)生指標(biāo)不符合標(biāo)準(zhǔn)），在 6個(gè)月內(nèi)扣留634批中國(guó)出口食品（2002.8-2003.1),甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全事件食源性甲型肝炎（1980’s 上海, 30萬(wàn)人)。O157:H7大腸桿菌食物中毒（2001，江蘇、安徽等2萬(wàn)人中毒，177人死亡）

5、沙門氏菌食物中毒（1999，寧夏肉品，>1,000人)。金黃色葡萄球菌（1999，城運(yùn)會(huì)，51名動(dòng)員，部分項(xiàng)目取消)。涉紅事件(蘇丹紅、對(duì)位紅）水產(chǎn)品中孔雀石綠啤酒甲醛,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全法規(guī)食品法典委員會(huì) Codex Alimentarius Commission (CAC) 由FAO于1961年建立,自1962年起負(fù)責(zé)FAO/WHO聯(lián)合食品

6、標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目FAO/WHO FAO:聯(lián)合國(guó)糧食和農(nóng)業(yè)組織 WHO:聯(lián)合國(guó)世界衛(wèi)生組織 截止2004年底，CAC制定標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)定等情況如下: 237個(gè)食品標(biāo)準(zhǔn) ；41個(gè)衛(wèi)生規(guī)定或技術(shù)規(guī)程 ；185種的殺蟲(chóng)劑評(píng)價(jià) ；3274種殺蟲(chóng)劑限量 ；25種污染物指南。 對(duì)176種農(nóng)藥在375種食品中規(guī)定了2439條農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)。中華人民共和國(guó)食品衛(wèi)生法（1995年10月30日施實(shí)）

7、 僅對(duì)104種農(nóng)藥在糧食、水果、蔬菜、肉等45種食品中規(guī)定了允許的殘留量，總含291個(gè)指標(biāo)。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全法規(guī)美國(guó)食品和藥物管理局(FDA) 歐盟 2006年1月1日正式實(shí)施食品安全新法規(guī)， 該法規(guī)主要特點(diǎn)： 1 新食品法大大簡(jiǎn)化了食品生產(chǎn)、流通及銷售的監(jiān)督檢測(cè)程序； 2 強(qiáng)化了食品安全的檢查手段； 3 大大提高了食品市場(chǎng)準(zhǔn)入

8、的標(biāo)準(zhǔn)； 4 增加了已經(jīng)準(zhǔn)入歐盟市場(chǎng)的食品安全的問(wèn)責(zé)制； 5 將更加注意食品生產(chǎn)的過(guò)程安全，不僅要求進(jìn)入歐盟市場(chǎng)的食品本身符合新的食品安全標(biāo)準(zhǔn)，而且從食品生產(chǎn)的初始階段就必須符合食品生產(chǎn)安全標(biāo)準(zhǔn)，特別是肉食，不僅要求其終端產(chǎn)品要符合標(biāo)準(zhǔn)，而且要求在整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)也要符合標(biāo)準(zhǔn)。 歐盟是我畜產(chǎn)品、動(dòng)物源性產(chǎn)品及水海產(chǎn)品的重要出口市場(chǎng) 。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,

9、1 食品安全現(xiàn)狀,食品安全法規(guī)日本肯定列表制度 公布了對(duì)所有農(nóng)業(yè)化學(xué)品的限量標(biāo)準(zhǔn)，包括“暫定最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)”、“一律限量標(biāo)準(zhǔn)”和“豁免物質(zhì)”清單，明確設(shè)定了進(jìn)口食品、農(nóng)產(chǎn)品中可能出現(xiàn)的734種農(nóng)藥、獸藥和飼料添加劑的近5萬(wàn)個(gè)暫定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)其未設(shè)標(biāo)準(zhǔn)而歐美國(guó)家也無(wú)標(biāo)準(zhǔn)可參照的農(nóng)藥推行“一律標(biāo)準(zhǔn)”，只有符合要求的食品、農(nóng)產(chǎn)品才能進(jìn)入日本市場(chǎng)?！翱隙斜碇贫取睂?shí)施后，限量指標(biāo)數(shù)量大幅增加、限量指標(biāo)更為嚴(yán)格，檢測(cè)項(xiàng)目成倍增加。每種食品

10、、農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)項(xiàng)目將增加5倍以上(茶葉從89種增至276種，大米從129種增至579種)。大幅抬高了進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品的門檻，對(duì)茶葉、蔬菜等中國(guó)具有比較優(yōu)勢(shì)的農(nóng)產(chǎn)品影響巨大。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,主要食品安全問(wèn)題農(nóng)藥殘留 用于防治有害的植物（包括微生物）和動(dòng)物的任何一種 單一或混合物質(zhì)。如殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、除草劑、殺鼠劑等。 有機(jī)氯（六六六、滴滴涕等）；有

11、機(jī)磷（甲胺磷、對(duì)硫磷、毒死蜱等）；擬除蟲(chóng)菊酯（氰戊菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯等）；氨基甲酸酯（呋喃丹、速滅威等） 目前農(nóng)藥品種已達(dá)600余種，常用的也有200多種，農(nóng)藥殘留累積危險(xiǎn)性及多殘留對(duì)人身危害問(wèn)題已引起世界廣泛關(guān)注。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,主要食品安全問(wèn)題獸藥殘留 獸藥殘留的分類（按種類分） 抗生素：四環(huán)素、氯霉素、青霉素、鏈霉素等

12、 磺胺類：磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺異惡唑等 抗寄生劑：克球酚、左旋咪唑、敵百蟲(chóng)等 激素類：已烯雌酚、丙酸睪丸素、地塞米松 生長(zhǎng)促進(jìn)劑：克侖特羅（b-興奮劑） 鎮(zhèn)靜劑：卡唑心安、氮哌酮,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,主要食品安全問(wèn)題獸藥殘留獸藥殘留的危害 過(guò)敏：如青霉素

13、 細(xì)菌耐藥性和菌群失調(diào)：抗菌素與磺胺類 再生障礙性貧血：氯霉素 耳聾：鏈霉素、雙氫鏈霉素、卡那霉素 致突變：如洛硝咪唑 致癌：如克球酚、已烯雌酚 致畸：丁苯咪唑、丙硫咪唑、苯硫苯胺酯、苯硫苯苯咪唑、苯咪唑等 內(nèi)分泌干擾效應(yīng)：雌激素：已烯雌酚；雄激素：丙酸睪丸素；腎上腺激素： 地塞米松；b-興奮劑：如克侖特羅；b -阻斷劑：如卡唑

14、心安。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,1 食品安全現(xiàn)狀,主要食品安全問(wèn)題病原微生物及寄生蟲(chóng)污染 沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸桿菌、李斯特桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、耐熱耐酸菌、許多霉菌及其毒素污染以及弓形蟲(chóng)、旋毛蟲(chóng)、寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵 食品添加劑 著色劑、防腐劑、漂白劑、甜味劑、發(fā)色劑等重金屬污染 鉛（Pb）汞（Hg）砷（As

15、）生物毒素（包括細(xì)菌毒素和霉菌毒素） 葡萄球菌腸毒素、肉毒桿菌毒素等；黃曲霉毒素、棒曲霉毒素、棕曲霉毒素等200多種霉菌毒素。黃曲霉毒素是毒性最強(qiáng)的致癌物之一，黃曲霉毒素B1的毒性是氰化鉀的10倍。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,典型的殘留分析過(guò)程采樣與樣品制備→提取→凈化→濃縮(衍生化)→分辨→檢測(cè)

16、 └┄┄┄┄┄┘　 　 └┄┄┘ 樣品前處理 測(cè)定 殘留分析特點(diǎn)： 1待測(cè)物質(zhì)濃度低，濃度波動(dòng)范圍大（1μg/kg～10mg/kg） 2樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多 3各種儀器分析方法為主 殘留分析的困難：樣品基質(zhì)背景復(fù)雜、前處理過(guò)程繁瑣且耗時(shí)、被測(cè)成分濃度較

17、低、分析儀器的定性能力的限制、儀器檢測(cè)靈敏度不夠等一系列問(wèn)題。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,樣品前處理技術(shù)樣品前處理 是分析檢測(cè)過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 樣品前處理過(guò)程：提取、凈化、濃縮(衍生化)。 提取是指使用適當(dāng)溶劑(常用丙酮或乙腈)將待測(cè)物連同樣品基質(zhì)從固態(tài)樣品中轉(zhuǎn)移到易于凈化和分析的液態(tài)； 凈化是指將等測(cè)物與提取液中的

18、干擾物質(zhì)分離。 在現(xiàn)代殘留農(nóng)藥檢測(cè)中，提取、凈化可一步完成。 樣品前處理目的：消除干擾、保護(hù)儀器、準(zhǔn)確。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,樣品前處理技術(shù)經(jīng)典技術(shù) 索氏提取、振蕩萃取、超聲波萃取、液－液分配、柱層析、磺化等現(xiàn)代技術(shù) 凝膠色譜（GPC）、固相萃?。⊿PE）、固相微萃取（SPME）、加速溶劑萃取（ASE）、超臨界萃取(SFE)、

19、微波萃?。∕AE）、基質(zhì)分散固相萃取(MSPDE)及 微量化學(xué)法（ MICCM）技術(shù)等。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,儀器分析技術(shù)高分辨分離技術(shù)（高通量） GC LC（HPLC、UPLC）高靈敏度檢測(cè)技術(shù) MS SIM MRM 聯(lián)用檢測(cè)技術(shù) GC-MS LC-MS/MS,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,多殘留

20、檢測(cè)技術(shù)國(guó)外ＵＳＡ ＣＤＦＡ ＦＤＡ-ＰＡＭ DFG S19 320種農(nóng)藥 CSL 104種農(nóng)藥國(guó)內(nèi)中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB/T 19426—2003 蜂蜜、果汁和果酒中304種農(nóng)藥多殘留測(cè)定方法氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 5009.145－2003 植物性食品中有機(jī)磷(16種)和氨基甲酸酯類(4種)農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 GB

21、/T 5009.146-2003植物性食品中有機(jī)氯(10種)和擬除蟲(chóng)菊酯類(6種)農(nóng)藥多種殘留的測(cè)定檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) SN 0334-95出口水果和蔬菜中22種有機(jī)磷農(nóng)藥多殘留量檢驗(yàn)方法“十五”國(guó)家重大科技專項(xiàng) 建立了適用于動(dòng)物組織、水產(chǎn)品和牛奶樣品中四環(huán)素、金霉素、土霉素等7種四環(huán)素類藥物多殘留的液相色譜測(cè)定方法和10種四環(huán)素類獸藥多殘留高效液相色譜

22、/串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)確證方法； 建立了13大類（激素類、磺胺類、阿維菌素類、四環(huán)素類、苯并咪唑類、氯霉素類、β-內(nèi)酰胺類、喹諾酮類、硝基呋喃類、β-興奮劑類、硝基咪唑類、甲狀腺抑制劑類、氨基糖苷類）108種獸藥多殘留的檢測(cè)方法和13大類122種獸藥多殘留的確證方法； 檢測(cè)四大類(有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯、除蟲(chóng)菊酯類)200種未知農(nóng)藥。,2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫

23、局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,快速篩選檢測(cè)技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附法 ELISA膠體金免疫法酶抑制法芯片技術(shù),甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,日本農(nóng)藥獸藥檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展 日本“肯定列表”中，一共提到734種農(nóng)用化學(xué)品，日本官報(bào)公布的測(cè)定方法為157個(gè),共涉及約273種農(nóng)用化學(xué)品及其代謝物，其余461目前尚未公布相應(yīng)的檢測(cè)方法。 主要技術(shù)

24、 GC-MS HPLC LC-MS/MS 多殘留 單殘留 大米共579項(xiàng)，除127項(xiàng)農(nóng)藥殘留有檢測(cè)方法，252項(xiàng)也已經(jīng)有了檢測(cè)方法，50項(xiàng)無(wú)法檢驗(yàn)，其他150項(xiàng)方法的研發(fā)任務(wù),2 國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,問(wèn)題檢測(cè)方法不足多殘留檢測(cè)方法太少快速篩選檢測(cè)技術(shù)不成熟缺乏超痕量分析等高技術(shù)檢測(cè)手段樣品前處理技術(shù)太過(guò)傳統(tǒng),3 存在的問(wèn)題與措施,甘肅

25、出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,-農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù) 日本“肯定列表”中，一共提到498種農(nóng)藥，通過(guò)查詢GB和SN標(biāo)準(zhǔn)庫(kù)，結(jié)合目前植物源性殘留監(jiān)控計(jì)劃實(shí)際測(cè)定的項(xiàng)目，目前我國(guó)現(xiàn)有的檢測(cè)方法能覆蓋到107種，其余391種我國(guó)目前尚未建立相應(yīng)的檢測(cè)方法。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)多為單一殘留物的分析方法，多殘留和快速篩選檢測(cè)方法極少；已制定的197項(xiàng)農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，還缺少部分檢測(cè)方法；農(nóng)藥殘

26、留酶抑制法和免疫法快速篩選檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性、特異性方面有待進(jìn)一步研究。傳統(tǒng)的溶劑萃取，液液分配，柱層析凈化進(jìn)行樣品的前處理，自動(dòng)化程度低，提取凈化的效果差，速度慢，環(huán)境污染。,3 存在的問(wèn)題與措施,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GANSU,3 存在的問(wèn)題與措施,-獸藥殘留檢測(cè)技術(shù) 日本“肯定列表”中，一共提到231種獸藥和飼料添加劑，通過(guò)查詢GB和SN標(biāo)準(zhǔn)庫(kù)，結(jié)合目前動(dòng)物源性殘留監(jiān)控計(jì)劃實(shí)際

27、測(cè)定的項(xiàng)目，目前我國(guó)現(xiàn)有的檢測(cè)方法能覆蓋到76種，其余155種我國(guó)目前尚未建立相應(yīng)的檢測(cè)方法。杯碟法和免疫法等快速篩選檢測(cè)方法不能滿足實(shí)際需要。在儀器檢測(cè)和質(zhì)譜確證，大部分為單一殘留藥物的檢測(cè)方法。在樣品前處理方面，現(xiàn)代前處理技術(shù)如固相萃取(SPE)、超臨界萃?。⊿FE）、凝膠層析(GPC)、加速溶劑提取（ASE）、基體分散提?。∕SPD）、免疫親和柱（IAC）等應(yīng)用甚少。,甘肅出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫綜合技術(shù)中心CIQ GAN