大菱鲆hepcidin基因在巴氏畢赤酵母中的表達(dá)研究.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文大菱鲆hepcidin基因在巴氏畢赤酵母中的表達(dá)研究姓名：肖健康申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物物理學(xué)指導(dǎo)教師：曾憲垠;陳松林20070501菌株經(jīng)過Y P D 培養(yǎng)基在3 0 ℃，2 5 0 r ／m i n 培養(yǎng)后用蝸牛酶法提取胞內(nèi)蛋白，T r i c i n eS D S ．P A G E 電泳顯示陽性菌株在5 ．8 k D a 處有蛋白條帶出現(xiàn)，而陰性對(duì)照菌株和酵母X - 3 3 菌株在相應(yīng)位置則沒有條帶出現(xiàn)

2、。W e s t e r n - b l o t t i n g 分析表達(dá)的融合蛋白能與特異抗體a n t i ．6 h i s 特異性結(jié)合，表明大菱鲆抗菌肽h e p e i d i n 基因在酵母菌中進(jìn)行了表達(dá)。4 ．陽性轉(zhuǎn)化子時(shí)間表達(dá)動(dòng)態(tài)：轉(zhuǎn)化子菌株在培養(yǎng)過程中，按照時(shí)間點(diǎn)0 、1 2 、2 4 、4 8 、7 2 、9 6 、1 2 0 h 分別取培養(yǎng)基1 0 m L ，在6 0 0 r i m 下測(cè)定O D 值，后破壁菌體提取