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1、本研究從染病斑的玉米葉片中分離純化出3株真菌,分別編號(hào)為zsy-01、zsy-02和zsy-03。經(jīng)菌落形態(tài)、孢子形態(tài)等形態(tài)特征并結(jié)合ITS1-5.8S-ITS2 rDNA序列分析確認(rèn)zsy-01為新月彎孢霉(Curvularia lunata),zsy-02為鏈格孢菌,zsy-03為球腔菌。經(jīng)丁香醛連氮法、愈創(chuàng)木酚法和ABTS法聯(lián)合檢測(cè)顯示菌株zsy-01是一株產(chǎn)漆酶的菌株。
健康玉米葉片接種新月彎孢霉后,病原菌在活體內(nèi)
2、產(chǎn)生一系列的細(xì)胞壁降解酶[果膠甲基半乳糖醛酸酶(pectin methylgalacturonase,PMG)、多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)、纖維素酶(β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶,Cx)]和漆酶,并且?guī)追N酶的產(chǎn)生有一定的時(shí)間順序,首先是PMG和PG起作用,然后是Cx起作用。漆酶促進(jìn)酚類(lèi)物質(zhì)的代謝,加速病原菌的浸染,活體外產(chǎn)生的細(xì)胞壁降解酶中PMG、PG和Cx要低于活體內(nèi),而漆酶活性卻是活體外要高于體內(nèi)??共?/p>
3、品種的細(xì)胞壁降解酶和漆酶活性要低于感病品種,但酶活高峰出現(xiàn)較早。
通過(guò)研究新月彎孢霉侵染不同抗性品種后,寄主防御酶系活性及酚類(lèi)物質(zhì)含量的變化,結(jié)果表明:酚類(lèi)物質(zhì)的含量與品種的抗性存在明顯的正相關(guān),無(wú)論是接種前的基礎(chǔ)水準(zhǔn),還是感染后酚類(lèi)物質(zhì)的積累量以及積累速度上,抗病品種明顯高于感病品種;侵染后,抗、感品種的PAL酶活性均呈上升趨勢(shì),且峰值出現(xiàn)時(shí)間相同,但抗病品種的PAL酶活性上升速度及峰值均高于感病品種;抗、感品種的POD
4、酶活性均呈上升趨勢(shì),但抗病品種的酶活峰值出現(xiàn)早于感病品種。
分別研究了枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)培養(yǎng)液、過(guò)濾液和滅活液對(duì)菌株zsy-01、zsy-02和zsy-03菌絲生長(zhǎng)的抑制作用,結(jié)果表明:枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液對(duì)菌株zsy-01、zsy-02和zsy-03都有很好的抑制作用。在菌液濃度達(dá)到103 CFU/mL時(shí),對(duì)3種病原菌的抑制率均達(dá)到了100%;當(dāng)濃度降低為104 CFU/mL時(shí),抑制率明顯降
5、抵??莶菅挎邨U菌菌液(濃度為108CFU/mL)的過(guò)濾液對(duì)zsy-01、zsy-02和zsy-03的菌絲生長(zhǎng)有抑制作用,抑制率均在50%以上。滅活液比過(guò)濾液對(duì)病原菌的抑制作用要好,菌液濃度為108 CFU/mL時(shí),對(duì)zsy-01、zsy-02和zsy-03的抑制率分別為69.2%、53.4%和46.9%。
研究中還對(duì)綠色木霉(Trichoderma viride)的揮發(fā)及非揮發(fā)代謝產(chǎn)物對(duì)菌株zsy-01、zsy-02和zs
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