急性弓形蟲小鼠感染模型的建立與抗動(dòng)物弓形蟲病藥物的初步篩選.pdf

1、弓形蟲病是一種重要的機(jī)會(huì)致病性人獸共患寄生蟲病,能在人和多種哺乳動(dòng)物之間傳播。動(dòng)物感染后不但會(huì)影響生產(chǎn)性能,還將會(huì)成為人類弓形蟲病的傳染源,因此,對(duì)該病的防治具有重要的經(jīng)濟(jì)學(xué)價(jià)值和公共衛(wèi)生學(xué)意義。本研究通過(guò)建立急性弓形蟲小鼠感染模型后,進(jìn)行抗弓形蟲藥物的篩選,擬發(fā)現(xiàn)用于動(dòng)物弓形蟲病防治的藥物,并對(duì)有效藥物的抗蟲機(jī)制進(jìn)行初步研究,為臨床上用于治療動(dòng)物弓形蟲病提供理論依據(jù)。
　　 1.弓形蟲復(fù)蘇方法及蟲體毒力的摸索及急性弓形蟲小鼠感

2、染模型的建立
　　 通過(guò)對(duì)弓形蟲株經(jīng)不同保存時(shí)間及復(fù)蘇條件后對(duì)小鼠致病性的研究,評(píng)價(jià)蟲體保存方法。使用液氮凍存和體內(nèi)傳代法,摸索出了得到毒力穩(wěn)定的蟲體最佳保存時(shí)間、復(fù)蘇代次與接種劑量。在此基礎(chǔ)上,確立了急性弓形蟲小鼠感染模型:使用本實(shí)驗(yàn)室保存半年以內(nèi)的弓形蟲RH蟲株速殖子,經(jīng)小鼠體內(nèi)傳代2次后,腹腔接種超過(guò)4000個(gè)蟲體／鼠／0.2 mL(KM系、體重20-24 g),將保證所有小鼠在6-10 d內(nèi)全部死亡。通過(guò)模型的建立,為后

3、續(xù)弓形蟲蟲體生物學(xué)和藥物篩選研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 2.抗弓形蟲病藥物篩選的研究
　　 鑒于目前無(wú)專用于動(dòng)物的抗弓形蟲病藥物,本研究擬通過(guò)選用11種己用于抗動(dòng)物其它原蟲病及其病原微生物的藥物,來(lái)進(jìn)行抗弓形蟲病的研究。發(fā)現(xiàn)原用于抗動(dòng)物球蟲病的藥物一磺胺氯吡嗪具有很好的抗弓形蟲效果,能明顯減少弓形蟲在小鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)、繁殖,可保護(hù)50％以上的小鼠免于死亡并長(zhǎng)時(shí)間存活,并無(wú)法檢測(cè)到蟲體。
　　 3.磺胺氯吡嗪對(duì)弓形蟲速殖

4、子超微結(jié)構(gòu)的影響
　　 弓形蟲速殖子經(jīng)磺胺氯吡嗪溶液處理后,通過(guò)掃描電鏡與透射電鏡觀察蟲體結(jié)構(gòu)的變化。在掃描電鏡下,藥物處理后的蟲體大小不均,細(xì)胞膜凹凸不平、皺縮呈現(xiàn)不完整,部分蟲體出現(xiàn)破損、崩解,蟲體反光度不均一等。在透射電鏡下,藥物處理后,部分蟲體發(fā)生崩解,蟲體細(xì)胞膜和核膜結(jié)構(gòu)損壞；致密斑顆粒數(shù)量明顯減少,細(xì)胞質(zhì)發(fā)生均質(zhì)樣改變,細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)許多空泡；細(xì)胞核發(fā)生異染色質(zhì)化,染色質(zhì)邊緣與核膜分離并出現(xiàn)空泡；頂端類錐體結(jié)構(gòu)模糊,出