長牡蠣近交家系生物學(xué)特性及遺傳多樣性分析.pdf

1、近交(inbreeding)指存在親緣關(guān)系的個(gè)體間的交配。一方面隨著近交代數(shù)的增加，近交可以加快一些控制優(yōu)良性狀的等位基因的純合，加快育種進(jìn)程;另一方面，近交也會(huì)使后代生長、存活等相關(guān)表型性狀的指標(biāo)降低，產(chǎn)生近交衰退。一直以來近交都是遺傳育種以及生物多樣性領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問題。海洋雙殼貝類由于具有高繁殖力、高的遺傳變異水平以及多樣的交配系統(tǒng)，已經(jīng)成為研究近交及近交衰退的良好模式生物。長牡蠣（Crassostrea gigas）又稱太平洋牡

2、蠣，是世界上養(yǎng)殖范圍最廣、產(chǎn)量最大的海洋經(jīng)濟(jì)貝類，也是我國重要的傳統(tǒng)養(yǎng)殖品種。近年來隨著長牡蠣養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，養(yǎng)殖群體內(nèi)近交的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生，伴隨出現(xiàn)死亡率高、經(jīng)濟(jì)性狀衰退等問題，開展關(guān)于長牡蠣近交生物學(xué)及遺傳多樣性研究具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。
　　本研究利用全同胞交配的方法，獲得了連續(xù)2代的長牡蠣近交家系，研究了不同近交系數(shù)的長牡蠣家系在幼蟲期和稚貝期產(chǎn)生的的近交效應(yīng)，探討了近交代數(shù)對(duì)長牡蠣不同生長階段主要表型性狀的影響。同時(shí)利

3、用AFLP分子標(biāo)記比較研究了長牡蠣一代全同胞交配家系F1、兩代全同胞交配家系F2和野生對(duì)照家系的遺傳多樣性水平，探討了近交對(duì)長牡蠣遺傳多樣性的影響。主要研究結(jié)果如下:
　　1.長牡蠣近交家系生物學(xué)特性
　　研究了對(duì)照家系(F=0)、F1家系(F=0.25)和F2家系(F=0.375)在孵化階段的受精率與孵化率以及幼蟲和稚貝階段生長與存活等生物學(xué)特性。結(jié)果表明，各組的受精率均在90％以上，除F2組外其余2組的孵化率也在90％以

4、上。幼蟲階段，近交組的殼高與殼長均從12日齡出現(xiàn)衰退，幼蟲殼高的近交衰退程度隨著近交系數(shù)的增加而加大;近交組存活率的衰退在整個(gè)幼蟲階段始終存在，且衰退程度隨幼蟲日齡的增加而加大。稚貝階段，F(xiàn)1組和F2組的平均殼高在各日齡均出現(xiàn)近交衰退，且稚貝殼高的衰退程度也隨著近交系數(shù)的增加而加大;3個(gè)實(shí)驗(yàn)組稚貝的平均殼長在60-240日齡無顯著性差異(P＞0.05)，直至300日齡近交組的平均殼長顯著小于對(duì)照組，出現(xiàn)明顯衰退;F1組和F2組稚貝存活率

5、的衰退在不同日齡始終存在(IDC＜0)，且隨日齡的增加其衰退的程度逐漸地加大。研究表明近交對(duì)不同近交系數(shù)的長牡蠣家系影響不同，且不同性狀的表現(xiàn)也不相同;長牡蠣雖經(jīng)連續(xù)2代的全同胞交配，但部分性狀衰退程度有增大趨勢，沒有獲得具有優(yōu)良等位基因的純系后代，這也驗(yàn)證了長牡蠣具有較高遺傳負(fù)荷的結(jié)論。因此有效淘汰長牡蠣群體中的遺傳負(fù)荷（隱性有害等位基因）需要經(jīng)過一段較長的近交歷史，特別是一些在個(gè)體生長發(fā)育后期才表現(xiàn)出的危害程度較小的等位基因，它們并

6、不會(huì)隨著近交代數(shù)的增加而被輕易淘汰。
　　2.長牡蠣近交家系遺傳多樣性研究
　　利用9對(duì)AFLP引物對(duì)三個(gè)家系的遺傳多樣性進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，每對(duì)引物可產(chǎn)生14-35條清晰的擴(kuò)增條帶，9對(duì)引物在對(duì)照組、F1組和F2組三個(gè)家系中擴(kuò)增出的位點(diǎn)總數(shù)分別為215、204和200個(gè)，平均每對(duì)引物擴(kuò)增的位點(diǎn)數(shù)為23.9、22.7和22.2個(gè)，其中有多態(tài)性的位點(diǎn)總數(shù)分別是67、58和55個(gè)，平均每對(duì)引物擴(kuò)增的多態(tài)性位點(diǎn)數(shù)為7.4、6.4