小鼠孕期感染弓形蟲對子代發(fā)育及糖皮質(zhì)激素對宿主抗弓形蟲的影響.pdf

1、弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種專性細胞內(nèi)寄生原蟲,能感染所有哺乳動物的有核細胞。它能導(dǎo)致先天性和獲得性弓形蟲病(toxoplasmosis),其中先天性弓形蟲病可導(dǎo)致胎兒死亡、畸形及其他后遺癥。我們重點研究了小鼠不同孕期感染弓形蟲(Prugniaud strain)對子代生長發(fā)育的影響。研究結(jié)果顯示:來源于孕期感染的新生子代鼠體重明顯低于對照組的,然而在子代鼠60日齡時,感染組和對照組子代小鼠體重之間差異不顯著。懷孕

2、早期感染組的子代鼠存活率明顯低于其它孕期感染的子代鼠和對照組的子代鼠。小鼠避暗試驗結(jié)果顯示:與來自晚期感染的陽性子代鼠(腦內(nèi)能夠找到包囊的個體)、對照組的子代鼠以及所有來自感染組的陰性子代鼠(腦內(nèi)未找到包囊的個體)相比,來自于早期感染和中期感染的陽性子代鼠顯示出更短的潛伏期和更多的錯誤次數(shù)。來自早期感染和中期感染的子代鼠腦內(nèi)包囊負荷數(shù)明顯高于晚期感染組的腦內(nèi)包囊負荷數(shù)。此外,我們的試驗結(jié)果也顯示了,NIH小鼠有更高的先天性感染率(90％

3、左右)。結(jié)論:懷孕早期和中期感染弓形蟲能導(dǎo)致子代嚴重的先天性弓形蟲病,如死胎,存活率降低以及學習記憶能力的損傷。本研究為更詳盡的地闡明小鼠不同孕期感染弓形蟲所造成的子代影響提供了重要的理論依據(jù),而且也為更好地研究理解其他哺乳動物(包括人)的先天性弓形蟲病提供了很有價值的資料和模型。
　　 眾所周知,對免疫缺陷人群如艾滋病及器官移植病人來說弓形蟲病可能危及生命。隨著糖皮質(zhì)激素類免疫抑制劑在治療自生免疫性疾病和免疫排斥反應(yīng)方面的廣泛

4、使用,使急性弓形蟲感染的病例常有報道。然而,在急性弓形蟲感染和免疫抑制劑之間相互作用的機制仍然不是很明晰。這部分研究了糖皮質(zhì)激素對SD大鼠腹腔巨噬細胞抗弓形蟲(RH strain)感染的影響。我們的研究結(jié)果顯示,不論是體外給藥細胞試驗還是體內(nèi)給藥一體外觀察試驗,經(jīng)糖皮質(zhì)激素處理過的腹腔巨噬細胞體外培養(yǎng)12,24和36 hrs后,其上清一氧化氮(NO)的分泌量明顯低于正常組；巨噬細胞iNOS的mRNA以及蛋白的表達也明顯下降。隨后,我們又

5、分析了弓形蟲在腹腔巨噬細胞內(nèi)的增殖情況。在正常大鼠腹腔巨噬細胞內(nèi),弓形蟲不但不增殖,而且在培養(yǎng)24 hrs后,弓形蟲數(shù)量出現(xiàn)一定的減少。與之形成鮮明對比的是在經(jīng)糖皮質(zhì)激素處理過的腹腔巨噬細胞內(nèi),弓形蟲大量增殖尤其是培養(yǎng)24 hrs后更為明顯。此外,我們也對弓形蟲感染后的巨噬細胞NO分泌量也進行了檢測,發(fā)現(xiàn)弓形蟲感染能更進一步抑制巨噬細胞NO的產(chǎn)生,這可能也是弓形蟲為了能在巨噬細胞內(nèi)生存,逃避宿主攻擊的一種有效地機制。我們的研究結(jié)果表明糖

6、皮質(zhì)激素能使大鼠腹腔巨噬細胞抗弓形蟲能力顯著下降,其中巨噬細胞NO分泌的減少是其中一個重要的因為。
　　 在此基礎(chǔ)上,我們還建立了NIH小鼠弓形蟲慢性感染模型并通過糖皮質(zhì)激素藥物的治療來誘發(fā)弓形蟲的急性感染。我們的研究結(jié)果顯示:糖皮質(zhì)激素能導(dǎo)致脾臟萎縮和腹腔巨噬細胞數(shù)量的減少,使小鼠的脾臟指數(shù)和腹腔巨噬細胞的數(shù)量明顯低于非用藥組小鼠。我們也對各試驗組小鼠的脾臟細胞和腹腔巨噬細胞體外培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)慢性弓形蟲病復(fù)發(fā)組(慢性感染用藥組)小