白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的機(jī)制研究.pdf

1、非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是指由非酒精因素引起的肝內(nèi)嚴(yán)重的脂肪變性。超重與肥胖、高脂血癥等是非酒精性脂肪肝的主要病因。早期診斷、調(diào)節(jié)飲食、增加運(yùn)動(dòng)鍛煉、加強(qiáng)治療為預(yù)防和控制非酒精性脂肪肝的重要措施。
　　非酒精性脂肪肝包含一系列與肝內(nèi)脂肪蓄積相關(guān)的病征,其發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜,研究認(rèn)為非酒精性脂肪肝與脂質(zhì)代謝異常、胰島素抵抗、肥胖和代謝綜合征等密切相關(guān),其中脂質(zhì)代謝

2、異常被廣泛認(rèn)為是其發(fā)病的最主要和最基本機(jī)制之一。低密度脂蛋白受體(low density lipoprotein receptor, LDLr)和清道夫受體B族I型(scavenger receptor class B type I, SR-BI)及甲狀腺激素受體β1(thyroid hormone receptorβ1, TRβ1)在肝臟調(diào)控脂質(zhì)代謝過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
　　白藜蘆醇是一種生物學(xué)效應(yīng)非常廣泛的植物多酚,其功效包括

3、減少脂質(zhì)合成、抗炎、延長(zhǎng)壽命等,有著治療多種慢性病的巨大潛力。
　　本實(shí)驗(yàn)采用高脂高糖喂養(yǎng)大鼠形成非酒精性脂肪肝,研究白藜蘆醇對(duì)NAFLD的改善作用及作用機(jī)制(對(duì)TRβ1,LDLr和SR-BI表達(dá)的影響),為防治NAFLD提供新的思路。
　　本文從以下兩部分就白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的機(jī)制研究進(jìn)行了綜述。
　　第一部分:白藜蘆醇對(duì)大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用
　　目的:高脂高糖飼料喂養(yǎng) Wistar雄性大鼠

4、,建立非酒精性脂肪肝的動(dòng)物模型,觀察白藜蘆醇(resveratrol, Res)對(duì)非酒精性脂肪肝的改善作用。
　　方法: Wistar雄性大鼠40只,隨機(jī)平均分成4組:正常組(Control),高脂高糖組(HFS),兩個(gè)白藜蘆醇劑量組(HFS+Res1,HFS+Res2),劑量分別為50、100 mg/kg·bw。采用高脂高糖喂養(yǎng)方式建立大鼠非酒精性脂肪肝模型,實(shí)驗(yàn)期間準(zhǔn)確記錄體重、進(jìn)食量等指標(biāo)。基礎(chǔ)飼料由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)

5、驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供,基礎(chǔ)飼料供能比為:蛋白質(zhì)26.48％,脂肪10.19％,碳水化合物63.33％。高脂飼料供能比為:蛋白質(zhì)18.33％,脂肪54.22％,碳水化合物27.45％(其中蔗糖7.8％)。13周末每組斷頭處死7只大鼠并檢測(cè)血清及肝勻漿總膽固醇(TC)、總甘油三酯(TG)含量;每組其余3只大鼠取出肝臟進(jìn)行HE染色和油紅O染色。
　　結(jié)果:高脂高糖組大鼠體重、能量利用率、血清及肝臟 TC和TG明顯高于正常組,而白藜蘆醇干預(yù)有顯

6、著的改善效果;HE染色和油紅O染色能明顯觀察到高脂高糖組大鼠肝細(xì)胞明顯的脂肪變性,而白藜蘆醇各劑量組均得到了明顯的改善。
　　結(jié)論:高脂高糖喂養(yǎng)能引起大鼠肝臟嚴(yán)重的脂肪變性,引發(fā)非酒精性脂肪肝,而白藜蘆醇干預(yù)能起到明顯的改善作用。
　　第二部分:白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的機(jī)制研究
　　目的:探究白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝過(guò)程中血清甲狀腺激素(TH)的變化,以及白藜蘆醇對(duì)甲狀腺激素受體β1(TRβ1),低密度脂

7、蛋白受體(LDLr)和清道夫受體B族I型(SR-BI)表達(dá)的影響。
　　方法:使用夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒測(cè)定大鼠血清FT3和FT4含量。用TRIzol提取肝臟的總RNA,應(yīng)用Real-Time RT-PCR檢測(cè)大鼠肝臟組織TRβ1,LDLr和SR-BI mRNA的表達(dá)水平;用RIPA裂解液充分勻漿裂解提取肝臟總蛋白,用Western blot方法檢測(cè)這三種基因的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　(1)

8、各組大鼠血清FT3、FT4之間無(wú)顯著性差異。
　　(2)白藜蘆醇能提高NAFLD大鼠肝臟LDLr和SR-BI mRNA和蛋白表達(dá)的水平,但是白藜蘆醇干預(yù)對(duì)TRβ1 mRNA和蛋白的表達(dá)均無(wú)影響。
　　結(jié)論:
　　(1)白藜蘆醇可能并未通過(guò)改變甲狀腺激素的含量來(lái)改善非酒精性脂肪肝。
　　(2)白藜蘆醇對(duì)大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用可能是通過(guò)提高LDLr和SR-BI的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的,但此過(guò)程中LDLr和SR-BI不受T