PPARγ配體對1型糖尿病大鼠的治療作用探討.pdf

1、1型糖尿病的發(fā)病機制尚不清楚，目前認為，它的發(fā)生和發(fā)展不僅與遺傳因素有關，而且自身免疫反應在發(fā)病中也占有著重要地位。研究表明：致敏的T淋巴細胞、激活的巨噬細胞等釋放的細胞因子，包括NO、TNF-α、IL-1、干擾素等，可能參與胰島的炎性細胞侵潤及其對胰島β細胞的破壞作用，其中高濃度NO可能是損傷β細胞的終末因子，通過抑制線粒體功能，降低β細胞代謝和胰島素分泌。同時NO可能參與了許多自由基級聯(lián)反應，誘導β細胞凋亡。目前，國內外用鏈脲菌素(

2、strepozotocin，STZ)復制糖尿病模型已得到廣泛的應用。STZ是經典的致糖尿病藥物，具有活潑的烴基結構，可以選擇性地直接損傷胰島β細胞DNA，使β細胞抗原釋出并被巨噬細胞加工、呈遞給T淋巴細胞，引起免疫應答反應；后者進一步活化巨噬細胞，使其釋放NO、TNF-α、IL-1等細胞因子，對胰腺組織發(fā)揮毒性作用；同時活化的巨噬細胞亦可誘導胰腺細胞內的NOS活性，使NO合成增加。過量的NO將進一步加重胰腺自身的炎癥損傷，釋放更多的β細

3、胞抗原，呈惡性循環(huán)，最終導致胰島素絕對缺乏，動物呈現(xiàn)1型糖尿病臨床病理表現(xiàn)。 過氧化物酶體增殖激活受體γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ，PPARγ)屬于核受體超家族中PPARs家族成員，為配體依賴性轉錄因子。PPARγ被配體激活后，與9-順式-維甲酸受體形成異二聚體，然后結合所調節(jié)基因啟動子上游的過氧化物酶體增殖物反應元件(PPRE)而發(fā)揮轉錄調控作用。目前已知PPARγ存在

4、多種配體和激活物，可分為合成型配體和天然型配體兩大類。其中合成型配體噻唑烷二酮(thiazolidinediones，TZD)類藥物可選擇性的與PPARγ結合，調控與胰島素效應有關的多種基因轉錄，調節(jié)葡萄糖的產生、轉運、利用以及脂肪代謝，增強胰島素的作用，降低胰島素抵抗性，俗稱胰島素增敏劑，因此主要用于2型糖尿病的治療。然而近年研究表明，PPARγ的表達與單核/巨噬細胞的分化和激活有關，其配體可抑制巨噬細胞炎癥反應，減少多種炎癥介質的分

5、泌(包括TNF-α、IL-1、IL-6等)，降低誘生型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)和清道夫受體-A的表達。此外，TZD在體外抑制T淋巴細胞增生反應和炎性細胞因子產物釋放；在體內可減輕動脈粥樣硬化、關節(jié)炎、腎間質纖維化、過敏性結腸炎及實驗性自身免疫性腦脊髓膜炎等多種炎癥性疾病，提示PPARγ可能是一些自身免疫反應性炎癥的重要調節(jié)因素。鑒于STZ誘導糖尿病大鼠的病理特點和1型糖尿病發(fā)病機

6、理，推測PPARγ配體可能對其具有一定的治療效果。因此，本研究首先利用STZ復制1型糖尿病大鼠動物模型，再以TZD類藥物羅格列酮(rosiglitazone)對其進行治療，同時結合免疫細胞化學染色、NADPH-d組織化學以及半定量分析等方法對羅格列酮治療1型糖尿病的治療效果和改善病理特點進行評價，并初步探討其作用機制，為1型糖尿病的治療開辟新的方法。 主要結果如下： 一、建立1型糖尿病大鼠模型 STZ誘導的1型糖

7、尿病大鼠主要表現(xiàn)出多飲、多食、多尿和體重減少的“三多一少”癥狀、血糖水平明顯升高。胰腺呈病理學改變，組織間質輕微水腫，淋巴細胞浸潤較明顯；外分泌腺腺泡細胞腫脹顯著，部分呈類空泡樣改變；胰島內部分細胞發(fā)生核溶解壞死，細胞數(shù)量減少，胰島體積縮小。免疫細胞化學顯示胰島素陽性細胞數(shù)量較正常大鼠減少，提示STZ能夠成功復制出大鼠1型糖尿病模型。 二、PPARγ配體對STZ誘導的1型糖尿病大鼠的治療 給予PPARγ配體羅格列酮后，S

8、TZ誘導的1型糖尿病大鼠“三多一少”癥狀明顯減輕，血糖降低，恢復正常水平，并在停藥30天后任能維持。胰島周圍炎癥被抑制，未見病理學改變。胰島素陽性細胞數(shù)量較糖尿病鼠多，但仍低于正常大鼠，提示羅格列酮促進了胰島β細胞數(shù)量和功能的恢復。 三、PPARγ配體治療1型糖尿病大鼠機制的初步探討 PPARγ配體對STZ誘導的1型糖尿病大鼠胰腺有保護作用，可能是早期通過抑制巨噬細胞合成NO，減輕胰島的炎性損傷；晚期通過維持胰腺nNOS