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文檔簡介
1、主要研究內(nèi)容:一、三個常染色體顯性遺傳先天性白內(nèi)障家系突變位點篩查;研究目的:對3個來自中國南方地區(qū)的常染色體顯性遺傳孤立性先天性白內(nèi)障家系(ADCC-1,ADCC-2和ADCC-3)進行基因突變位點的篩查,以了解這三個家系的先天性白內(nèi)障與國外文獻報道的10個基因上17種突變是否相關.二、CRYAB基因片段的克隆和序列分析;研究目的:通過第一部分實驗,在家系ADCC-3中發(fā)現(xiàn)CRYAB基因第443核苷酸位點發(fā)生了單個堿基置換(G→A),
2、由于PCR擴增產(chǎn)物的計算機自動測序出現(xiàn)的雜峰較多,不利于結果分析,為了進一步證實這一序列改變,我們將該家系9名家族成員(包括4名先天性白內(nèi)障患者和5名非患者)的CRYAB基因片段作為目的基因,將其在體外與質粒載體重組,導入生物宿主細胞內(nèi),通過自主復制產(chǎn)生大量分子克隆,篩選鑒定陽性重組體進行擴增和測序,確定目的基因的序列,以證實突變的存在.三、αB-晶狀體蛋白及其D140N突變體的生物信息學分析1、研究目的通過前面兩個部分實驗,在家系AD
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