福建省H3N2亞型流感病毒分子流行病學特征分析.pdf

1、為了了解福建省H3N2亞型流感病毒基因進化過程，從分子生物水平上認識其變異特征和規(guī)律，并分析疫苗對福建省人群保護的效果，本次研究對1996～2011年福建省流感監(jiān)測情況進行了描述，同時選用了64株分布于1996～2011年間的福建省H3N2亞型流感毒株來進行分子流行病學特征研究。首先通過MDCK細胞和雞胚分離的方法來擴容病毒量少的病毒株，采用紅細胞凝集（HA）和紅細胞凝集抑制（HI）試驗來對病毒株進行鑒定和分型，其次通過PCR和測序方法

2、獲得64株H3N2亞型流感病毒HA1區(qū)序列，最后運用生物信息學和統(tǒng)計學軟件來分析獲得的序列資料，在此基礎(chǔ)上進行分子流行病學研究，結(jié)合監(jiān)測數(shù)據(jù)來揭示H3N2亞型流感在福建省的流行規(guī)律和特征。
　　結(jié)果顯示，福建省流感流行存在冬春季和夏季兩個高峰，ILI的異常增加在一定程度上可以提示流感流行的風險。1996～2011年期間，福建省流感流行優(yōu)勢株存在H1N1、H3N2和B型流感之間交替的規(guī)律。福建省1996年以來的H3N2亞型流感病毒基

3、因進化可以分為兩個譜系，1996～2000年譜系和2002～2011年譜系，其進化規(guī)律都是沿著樹枝主干隨著時間推移向上延伸，序列的差異和年代成正比，初步判斷2000～2002年福建省H3N2亞型流感病毒抗原性發(fā)生較大轉(zhuǎn)變。1996年以來福建省H3N2亞型流感病毒HA1區(qū)共計在91個位點出現(xiàn)過變異，其中有25個氨基酸位點變異發(fā)生5個抗原決定簇上；7個變異位點發(fā)生在受體結(jié)合位點（RBS）及其附近；59個變異位點發(fā)生在抗原決定簇和RBS以外的

4、位點，其中13個位點變異涉及年代間流感毒株的轉(zhuǎn)換，值得高度關(guān)注。與WHO推薦疫苗株比較，1996～1999年和2005～2009年疫苗對福建省H3N2亞型流感的保護效果較好，而2000～2004年疫苗保護效果不佳，存在滯后現(xiàn)象。從HA1蛋白結(jié)構(gòu)上分析，1996～2011年潛在糖基化位點有增多的趨勢，而5個二硫鍵位點氨基酸密碼子仍然保守，這均為維持HA蛋白的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定起到重要作用。
　　本次研究較詳細地對1996～2011年福建省H3